高效液相色谱法测定天麻降压胶囊中天麻素的含量

陈红娟

（上海市宝山区中西医结合医院药剂科中药房，上海 201999

天麻降压胶囊系民间验方，由天麻、白芥子、苍术、川芎等8味中药组成的复方制剂，具有化湿、祛痰、熄风的作用，临床上用于痰浊型高血压病。天麻含有天麻素、天麻苷元等成分，天麻素能显著改善在高血压发生发展中起重要作用的内皮素、血管紧张素Ⅱ等的作用，使患者血压下降[1]。天麻苷元和天麻素的作用部位均位于神经中枢，使血管阻力降低，小动脉及微血管扩张，避免激活交感神经，能长时间平稳有效控制血压[2]。天麻为该处方中主要成成分之一，为了控制该制剂的质量，采用HPLC测定该制剂中天麻素的含量，该方法结果满意，专属性强、操作简便，能有效地控制该制剂的质量，报道如下。

1 仪器与试药

2010AHT高效液相色谱仪（岛津）；紫外检测器；CLASS-VP色谱工作站；UV-260可见-紫外分光光度计（岛津），ER-180A型分析天平（瑞士，梅特勒）。天麻素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：1108072-20120）；天麻降压胶囊（苏州雷奥制药有限公司制备）；水为超纯水，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方 法

2.1 色谱条件。色谱柱：Phenomenex Gemini C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.05%磷酸（3∶97）；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：220 nm；进样量10 μL。在此条件下，天麻素与其他色谱峰分离良好，理论板数以天麻素峰计算，应不低于3000。

2.2 对照品溶液的制备：精密称取在80 ℃减压干燥1 h的天麻素对照品适量，精密称取天麻素4.998 mg，置100 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液（49.98 μg/mL）[3]。

2.3 供试品溶液制备：取本品适量，研细，取1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇，称定重量，超声提取45 min，放冷，再称定重量，用50%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10 mL，浓缩至近干，残渣加流动相溶解，转移至10 mL量瓶中，并用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得[4]。

2.4 阴性对照试验：按处方取缺天麻的阴性对照药，按供试品溶液制备方法，制得阴性对照溶液，进样，依法测定，结果阴性对照液在相同位置处无与天麻素相对应的色谱峰，表明处方中其他药材和辅料不干扰天麻素的测定。

2.5 线性关系的考察：分别精密吸取对照品溶液5、10、15、20、25 μL进样，以峰面积（Y）对进样量（X）进行回归，天麻素的回归方程为Y=1857.6X+153.3，r=0.9998，表明进样量在0.250～1.25 μg范围内呈良好的线性关系。

2.6 精密度实验：精密吸取上述对照品溶液10 μL，按照上述色谱条件连续进样5次，测定天麻素峰面积值，计算天麻素RSD为1.37%（n=5），表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性实验：精密吸取同一供试品溶液10 μL，分别于0、2、4、8、24 h测定天麻素峰面积，结果RSD为1.48%，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.8 重复性实验：精密称取同一批次的样品6份，按照供试品溶液制备方法得到供试品溶液，依上述色谱条件测定天麻素的含量，其RSD为1.87%，表明本方法重复性良好。

2.9 加样回收率实验：采用加样回收法测定，取已知含量的样品（批号：161219）研细，取约0.5 g，精密称定，精密加入天麻素对照品适量，制成各自的供试品溶液，依法测定，计算加样回收率。结果见表1。2.10 样品测定：取3批样品，各取1 g，精密称定，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，10 μL进样。结果见表2。

表1 加样回收率试验结果

表2 样品测定结果

3 讨 论

本文应用HPLC法对天麻降压胶囊中天麻素含量进行测定，通过线性、回收率、重复性、以及精密度实验等及其数据分析，可以得出该测定方法具有良好的线性及回收率高，本分析方法操作简便、快速、准确，可用于麻降压胶囊质量控制。

本文对提取溶剂进行了考察，采用了50%、70%甲醇和50%、70%的乙醇作为提取溶剂进行比较，结果发现50%乙醇作为提取溶剂提取相同的样品所得的天麻素含量较高且峰形较好。故采用50%乙醇作为提取溶剂。本文对提取方法进行了选择，比较了超声提取45 min和回流提取45 min两种方法，结果表明，超声提取45 min和回流提取45 min所得天麻素含量相差不大，从方便、节能的角度考虑，采用超声提取45 min方法[5]。

[1] 冼慧,王文利.天麻素对高血压的影响[J].中国民间疗法,2007,15(4):24-25.

[2] 陈江,朱黎明.全天麻胶囊联合硝苯地平缓释片对原发性高血压患者血液流变学及终点时间的影响[J].光明医学,2011,26(10):2090-2091.

[3] 陈韵蓓.应用HPLC法测定天麻头风灵胶囊中天麻素含量[J].实用医院临床杂志,2014,11(6):154-156.

[4] 隆颖,袁惠霞,乔莉,等.高效液相色谱法测定脑栓通胶囊中天麻素的含量[J].今日药学,2015,25(4):236-238.

[5] 杨荣艳,秦玉侠.HPLC测定通络痹痛丸中天麻素的含量[J].中国现代中药,2011,13(3):36-42.