已防腐固定尸头标本的血管灌注方法研究

温一奇 赖赞区 叶晓云 魏小兵▲

1.广东省惠州市第三人民医院神经外科，广东惠州 516001；2.广东省惠州卫生职业技术学院基础部，广东惠州516000

目前临床常用显微外科的技术进行颅脑部位疾病的治疗，但是该手术操作精确细微，严谨细致，对医师的解剖学知识要求非常严格[1]。只有进行该手术的医生有足够的解剖学知识储备，才能够在微创条件下，很好的完成手术的入路以及相关疾病的治疗[2]。因此，很多外科医生迫切地需要充足、制作精良的人体标本进行解剖知识的学习以及手术模式的推演与研究。所有类型的标本中，通过血管灌注制作的标本因为可以清晰地显示人体血管的走形、分布以及各条重要分支，因而备受青睐[3-4]。现阶段我国用于研究的尸体比较紧张，而且绝大部分是用福尔马林进行固定的标本，进行常规的血管灌注有一定的难度。为了研究科学合理并且高效的灌注方法，促进解剖学教育以及显微外科学的发展，我院特利用现有的20例通过福尔马林固定的尸头标本，研究对已固定好的尸头标本的合理灌注方法，现详细报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择惠州市卫生职业技术学院2002年至今保存的经过福尔马林固定防腐处理的尸头标本共计20例进行本次研究。本次研究使用的灌注用品采用白乳胶加质量优良的普通颜料配合而成。动脉灌注时选择红色颜料，静脉灌注时选择蓝色颜料。进行灌注之前标本的浸泡软化采用析纯氨水和蒸馏水蒸馏水。其他用品包括医用一次性注射器以及输液器。

1.2 方法

1.2.1 灌注之前尸头标本的处理 标本从福尔马林固定液中取出以后，因为有比较大的刺激性气味，不适合立即进行灌注[5]。首先把标本浸泡在浓度为60%～70%的酒精中，时间设定为2周。经过充分浸泡以后，标本内的福尔马林大部分都被酒精洗净，因为刺激性气味大大降低，同时酒精也能让因为长期浸泡发生颜色以及形态改变的标本得到一定程度的恢复，标本软化，有利于下一步的操作。

1.2.2 对尸头标本进行解剖 为了下一步插管的顺利进行，需要对尸头部位较大的血管进行解剖，有利于血管的充分暴露及导管的置入。依据具体灌注部位的不同选择合适的解剖部位。

1.2.3 插管并进行血管的冲洗 把去掉头皮针和过滤器的输液器置入提前解剖暴露的尸头标本的血管之中[6]，并进行合理牢固的固定。完成后把插管和盛有蒸馏水的输液瓶连接，并抬举到一定高度形成压力差，开放另一侧未连接插管的血管。注意静脉生理上承受压力的能力低于动脉，为防止血管破裂，应控制好冲洗的压力。冲洗动脉时使用的液体量在500～1000mL之间，进行静脉的冲洗时液体量一般在2000mL左右。

1.2.4 调配灌注所需的颜料 白乳胶以及普通染料和氨水适量混合，搅拌均匀后制作颜料。其中，稀色料的制作需要使用白乳胶的量为20g，氨水需要使用15mL左右。比较浓稠的染料色料需要使用白乳胶的量为40g，氨水需要使用的量大约为3mL左右。

1.2.5 灌注 进行灌注的时候首先用骨蜡堵住颈椎的断口。把所有插管关闭后，开放一侧颈动脉的插管并注入调配好的稀染料。无法继续注入时，进行另一侧颈动脉的注入直至颜料流出。同样的步骤进行椎动脉内的灌注。注入稀色料注成功以后马上依照完全一样的步骤进行较粘的颜料的灌注。操作完成把血管封闭。静脉灌注：注意静脉生理上承受压力的能力低于动脉，为防止血管破裂，应控制好冲洗的压力，不宜过于用力。完成操作60min以后需要再次进行灌注，防止血管收缩后影响灌注效果。

1.2.6 效果的检查 操作成功以后，选择颅顶部位进行钻孔用来检查灌注结果。灌注以后组织分层清晰，脑内动静脉可以轻松辨认，无漏胶现象则认为灌注结果满意。如果未取得令人满意的效果，可以再次灌注。检查结果满意后，将标本放置2 ～ 3d后，置入含有浓度为60%酒精的塑料桶内等待下一步的使用或研究。

1.3 标本灌注效果的评价

观察灌注完成以后尸头标本的组织分离情况，血管的各项分支和各种变异的显示情况，计算灌注的成功率，综合评价本次尸头标本灌注的效果，并分析影响灌注效果的相关因素。

其中，灌注成功的标准为组织分层明显易于辨认、血管分支清晰地显示、可以轻松地发现标本存在的变异，成功率为：（灌注成功标本数/标本总数）×100%。

2 结果

在进行本次研究之前，我们查阅相关文献按照常规新鲜尸头标本制作的流程和方法进行过实验性标本制作，但是发生了大范围的染料露出现象，制作的标本无法用于解剖学研究（见图1 ～ 2），共制作了5具标本，有4具制作失败，制作的成功率仅为20%。本次研究严格依照上述操作步骤进行尸头标本的灌注，总共制作了20例标本。经过浸泡软化以后，长时间固定的标本颜色以及肌肉组织的状态得到一定程度的改善，虽然骨骼颜色变化并不明显，但是组织分层明显，层次非常清晰，有利于灌注的进行（见图3 ～ 4）。制作的20例标本中，有17例制作成功，效果满意，成功率为85%（17/20），明显比以往进行标本制作（20%）的成功率高，有2例（10%）因为静脉灌注时静脉血管破裂导致灌注染料露出影响了标本质量；有1例（5%）标本动脉灌注存在缺陷。制作完成的标本，血管因为有灌注液的充盈，非常饱满容易辨认，动静脉颜色显示清晰，可以轻松地辨别。各个重要分支显示的很清楚，可以很方便及时地发现存在的各种变异。

图1 常规新鲜标本灌注方法发生的染料露出

图2 常规新鲜标本灌注方法发生的染料露出

图3 组织分层明显

图4 骨骼颜色变化不明显

3 讨论

随着我国科技近年来的巨大进步，医学相关技术也得到了极大的发展。这其中，发展最迅速的当属外科学门类中的神经外科学[7]，该科学目前已经发展到不单单进行简单的可视性手术，而是可以利用多种技术和器材就行创口极小的显微外科的治疗的地步[8]。该方式可以用来治疗多种对人们健康有极大的危害的疾病，给患者带来很大的好处，减轻了他们的经济以及心理负担，极大地促进了相关疾病的治疗[9]。但是，显微神经外科手术操作精细，对颅脑外科医师的解剖学知识提出了比较严格的要求。该手术需要进行操作的医生具有综合全面的解剖学知识，对人体颅脑部位分各个解剖结构及其部位甚至重要血管的较大的分支都有清晰的认识。而学习研究解剖学知识最有效的方式就是观察揣摩人体标本，颅脑外科最需要的自然是尸头标本。通过这种标本，解剖研究人员或者相关科室的临床大夫可以对解剖知识更加熟悉，从而对人体的正常结构了然于胸，有利于手术成功率的提高。因此，通过血管灌注的方式进行标本的制作对医学科学的发展具有重要的意义[10]。通常进行灌注的材料选择乳胶和普通染料，乳胶一般不溶于水中，可以使人体死亡后塌陷的血管重新充盈[11]，便于观察；加入的普通染料可以起到标注的作用，能够分别显示动脉以及静脉血管，更利于观察和研究[12]。进行灌注之后的标本，血管充盈度更优秀，各个解剖部位与走形更加直观，而且染料分布均匀，各部位显色清晰[13]，不容易引起相关部位的污染，有利于学习。目前最常见的是针对新鲜尸体标本的灌注方法[14]，而缺乏针对已固定好的标本的灌注方法。因此我院尝试进行经过长时间福尔马林浸泡固定的尸头标本的血管灌注。

较以前按照常规新鲜尸头标本进行的实验性血管灌注研究，本次研究通过科学合理的分析之后，改进了灌注方法，取得了令人满意的灌注效果。总共制作的20例尸头标本中，只有3例标本灌注效果没有达到预期效果，成功率达到85%（17/20），明显高于我们按照传统方法制作标本的成功率（20%）。而且改进方法之后，灌注完成的标本血管充盈、显示良好，清楚地显示了重要血管的分支以及存在的变异，各组织层次分明，是非常优良的学习与观察标本，效果非常令人满意。经过查阅文献以及讨论分析，对于本次研究取得令人满意结果的原因，可能有以下几点因素：（1）本次研究在灌注之前经过了60%乙醇的浸泡软化。长期储存于甲醛溶液之中的标本，受到其影响，标本的颜色发生变化，含有蛋白质的肌肉血管等组织受到福尔马林的侵蚀，对物理刺激的耐受降低，非常容易破裂。通过酒精的作用，可以去除一部分甲醛，恢复血管的物理抗性，使皮肤等组织恢复原有的颜色，有利于灌注的进展和进一步的观察与学习。（2）本次研究对血管进行了冲洗操作。合理的清洗可以去除血管内的淤血，使管腔更加通畅，内部压力降低。从而有利于灌注时染料的顺利进入以及均匀分布[15]。（3）本次研究针对长期福尔马林浸泡过的标本物理抗性降低这一因素制定了合适的压力。压力过大会导致染料露出，污染组织使标本制作失败；压力过低染料无法均匀分布于标本的各个部位，染色不均匀，同样无法取得令人满意的效果。

综上所述，对已经固定好的尸头标本进行血管灌注的操作时，要密切注意灌注前对标本进行浸泡软化，灌注前要对血管进行冲洗，并且选择合适的灌注压力，只有这样，才能制作出令人满意的解剖学标本。

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