不同质量麦冬药材醇溶性浸出物与相关成分研究

2018-06-02干建伟钱广生

中国中医急症 2018年5期

干建伟钱广生△ 胡敏韦婷

［1.四川大学华西药学院，四川成都 610000；2.华润三九（雅安）药业有限公司，四川雅安625000］

参麦注射液是由红参和麦冬两味药材提取而成［1］，其中不同外观性状的麦冬药材会直接影响参麦注射液的质量。本文研究的麦冬药材选用百合科植物麦冬Ophiopogon japonicus（L.f） Ker-Gawl的干燥块根，主产于四川，习称川麦冬。麦冬始载于《神农本草经》，列为上品，具有养阴生津，润肺清心之功效［2］，主要含有麦冬多糖、黄酮类、皂苷类、挥发油类、蛋白质、氨基酸、微量元素等有效成分，其中麦冬多糖、总皂苷、总黄酮的含量与采收期有较大的相关性［3-6］。麦冬主要为川麦冬和浙麦冬，其中的化学成分有较显著差异，主要通过指纹图谱、皂苷、黄酮类成分评价麦冬质量，与相关制剂的关联分析较少［7-14］。麦冬由于栽种、炮制、储存等问题，主要出现红锈、泛油的问题［15-16］，该类麦冬在市场中混杂在符合规定的麦冬中出现，可能对参麦注射液的质量产生影响。由于不同厂家购买的麦冬品质不同，因此导致产品中糖含量的差异［17］。本研究主要是通过醇溶性浸出物、果糖等指标研究正常麦冬、红锈麦冬、泛油麦冬质量差异，进而明确参麦注射液用麦冬药材的醇溶性浸出物控制范围。

1 仪器与试药

1.1 药材

麦冬，购于雅安三九中药材科技产业化公司麦冬GAP 种植基地，共 6 批（批号：130401、130402、130403、130404、130405、130406），按照 2015 年版《中华人民共和国药典（一部）》麦冬质量标准检测均符合规定，以上药材经四川大学华西药学院钱广生教授鉴定，其中批号为 130401、130402、130403、130404 的麦冬为性状正常麦冬，批号为130405的麦冬为红锈麦冬，批号为130406的麦冬为泛油麦冬。

1.2 试剂及仪器

果糖对照品购自中国食品药品检定研究院（批号：100231-200904）；鲁斯可皂苷对照品购自中国食品药品检定研究院（批号：111909-201204）。电子天平（德国赛多利斯）；水浴锅；乙醇为AR级。

2 方法

2.1 醇溶性浸出物测定［2］

将麦冬（批号：130401、130402、 130403、130404、130405、130406）按照 2015 年版《中国药典（四部）》通则2201项下醇溶性浸出物测定法测定，用乙醇作溶剂，即得。

2.2 果糖含量测定

2.2.1 供试品溶液制备取麦冬药材（批号：130401）低温烘干（40℃），打粉后，过6号筛。取麦冬粉末约0.35 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50 mL纯化水，密塞，称定质量，超声提取15 min，取出冷却后用水补足减失的质量，摇匀，过滤取续滤液，作为供试品溶液。其他批次麦冬（批号：130402、130403、130404、130405、130406）按照同法制备，即得。

2.2.2 对照品溶液制备精密称取果糖对照品适量，加5%甲醇溶解，配成约0.5 mg/mL的对照品溶液，即得。

2.2.3 色谱条件色谱柱：Prevail Carbohydrate ES（250 mm×4.6 mm，5 μm）。流动相：水∶乙腈=25∶75。流速：1 mL/min。柱温：35℃。检测器：蒸发光散射检测器（Alltech ELSD 2000ES），分流模式，漂移管温度：50 ℃，氮气流速：1.5 L/min。理论板数按果糖峰计算不得低于5000。

2.2.4 精密度试验见表1。取“2.2.2”项下果糖对照品溶液，连续6次进样，分别为10 μL。计算果糖峰面积的RSD%值，结果仪器精密度良好。

表1 精密度试验结果（n=6）

2.2.5 重复性试验见表2。精密称取麦冬粉末6份，每份0.35 g，依法提取，作供试品溶液。分别用高效液相色谱仪检测，麦冬果糖提取稳定，重复性好。

表2 麦冬药材果糖含量（n=6）

2.2.6 稳定性试验见表3。精密称取麦冬药粉0.3792 g，依法制备成供试品溶液，分别在 0、4、8、16、24、36、48 h进样测定果糖的含量，样品中果糖含量在48 h内稳定。

表3 样品稳定性试验结果

2.2.7 线性关系考察分别精密吸取“2.2.2”项下果糖对照品溶液 1、2、4、8、16、24、32 μL 依次进样，测定峰果糖面积。再分别以果糖峰面积-果糖进样量取对数做图，回归线性见图1，线性方程为y＝1.408734x+5.171397，R＝0.9998（y：面积取对数 lgA；x：浓度取对数lgC），果糖进样量在 0.35585～8.5404 μg 时，双对数呈良好的线性关系。

图1 lgC-lgA线性回归方程图

2.2.8 加样回收率试验见表4。精密称取麦冬粉末350 mg，供6份，每份加入果糖对照品27.53 mg，按方法提取，检测并计算回收率为112%，RSD%达1.50，回收率稳定。

表4 麦冬果糖加样回收率试验

2.3 水溶性浸出物测定［2］取麦冬（批号：130401、130402、130403、130404、130405、130406）按照 2015 年版《中国药典（四部）》通则2201项下水溶性浸出物测定法中的热浸法测定，即得。

2.4 鲁斯可皂苷元测定［2］

2.4.1 对照品溶液制备取鲁斯可皂苷元对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液，即得。

2.4.2 标准曲线制备精密量取对照品溶液0.5、1、2、3、4、5、6 mL，分别置具塞试管中，于水浴中挥干溶剂，精密加入高氯酸10 mL，摇匀，于热水中保温15 min，取出，冰水冷却，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2015年版）测定，在397 nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2.4.3 含量测定取2.2.1项下麦冬（批号：130401、130402、130403、130404、130405、130406）细粉约 3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定质量，加热回流2 h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，回收溶剂至干，残渣加水10 mL使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取5次，每次10 mL，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次5 mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干。残渣用80%甲醇溶解，转移至50 mL量瓶中，加80%甲醇至刻度，摇匀。精密量取供试品溶液2～5 mL，置10 mL具塞试管中，照“2.4.2”项下的方法，自“于水浴中挥干溶剂”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中鲁斯可皂苷元的量，计算，即得。