骨疏宁片浸出物测定方法研究*

吴 越，吴勇梅，韦玉燕，梁国宇

(玉林市中西医结合骨科医院，广西 玉林 537000)

浸出物含量测定从整体上反映中药制剂中成分含量的高低，一定程度上反映着中药制剂的内在质量，可以作为中药制剂质量控制的一种方法。骨疏宁片是我院用于治疗骨质疏松症，疗效确切，临床应用广泛的院内制剂，但目前还未有定量方法，生产工艺及不同产地、不同厂家的原料药都可能对骨疏宁片的临床疗效产生影响，因此，对骨疏宁片浸出物含量测定方法进行研究，制定可控的质量标准，可为该制剂的生产工艺和投料的监控工作提供依据。

1 仪器与试药

AB204-S型电子分析天平，梅特勒-托利多公司；DHG-9006型9246A电热恒温鼓风干燥箱，上海精宏。

乙腈(色谱纯)，Fisher； 95%乙醇(分析纯)，国药集团化学试剂有限公司；骨疏宁片，玉林市中西医结合骨科医院制剂室提供。

2 方法与结果

2.1 水溶性冷浸法操作[1]

取供试品约4 g，精密称定，置250～300 mL的锥形瓶中，精密加水100 mL，密塞，冷浸，前6 h内时时振摇，再静置 18 h，用干燥滤纸迅速滤过，精密量取续滤液20 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量。

2.2 水溶性热浸法操作[1]

取供试品约2～4 g，精密称定，置100～250 mL的锥形瓶中，精密加水50～100 mL，密塞，称定重量，静置1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却 30 min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量。

2.3 醇溶性浸出物测定法[1]

照水溶性浸出物测定法测定。除另有规定外，以各品种项下规定浓度的乙醇代替水为溶剂。

2.4 浸出因素考察[2-5]

2.4.1 浸出方法的考察

取骨疏宁片数片，除去糖衣，研细，过二号筛，混匀，精密称定药粉4 g，分别按冷浸法、热浸法操作，平行测定2份，计算浸出物含量，结果见表1。

表1 骨疏宁片浸出方法考察结果Table 1 Results of the extraction method of Gushuning tablets

从表1可知，热浸法浸出物含量明显比冷浸法的高，故选择热浸法作为浸出物的提取方法。

2.4.2 提取溶剂考察

分别取供试品5份，每份约4 g，精密称定，置100～ 250 mL的锥形瓶中，分别精密加水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇各100 mL，按热浸法操作，平行测定2份，计算浸出物含量，结果见表2。

表2 骨疏宁片提取溶剂考察结果Table 2 Results of solvent extraction of Gushuning tablets

从表2可知，以水作为提取溶剂浸出物含量最高，25%、50%、75%乙醇提取的浸出物含量相差不大，但是水提浸出液过滤相当困难，综合考虑最终选择75%乙醇作为提取溶剂。

2.4.3 不同取样量的考察

表3 骨疏宁片不同取样量考察结果Table 3 Investigation results of different sample size of Gushuning tablets

分别取供试品份，每份分别为2 g、3 g、4 g，精密称定，置100～250 mL的锥形瓶中，精密加入75%乙醇75 mL，按热浸法操作，平行测定2份，计算浸出物含量。

从表3可知，取样量为3 g时，浸出物含量最高，故选择取样量为3 g。

2.4.4 提取体积考察

分别取供试品5份，每份约3 g，精密称定，置100～ 250 mL的锥形瓶中，分别精密加入75%乙醇50 mL、75 mL、100 mL，按热浸法操作，平行测定2份，计算浸出物含量。

表4 骨疏宁片提取体积考察结果Table 4 The extraction volume of Gushuning tablets

从表4可知，提取体积为75 mL时，浸出物含量最高，故选择提取体积为75 mL。综上实验结果，最终确定骨疏宁片浸出物最佳测定方法为：取样量3 g，提取溶剂为75%乙醇，提取体积为75 mL。

2.4.5 最佳浸出物测定方法验证

取6批不同批号的骨疏宁片数片，除去糖衣，研细，每批分别取样2份，每份3 g，精密称定，加75%乙醇75 mL，按热浸法操作，平行测定2份，计算浸出物含量，结果见表5。

表5 6批骨疏宁片浸出物测定结果Table 5 6 batches of Gushuning tablets extract determination results

6批骨疏宁片的浸出物测定结果在29.1%～46.4%之间，考虑制剂的浸出物与使用的药材质量有关，为保证产品的质量，根据实测数据并结合生产，规定骨疏宁片75%乙醇热浸出量不得少于23%。

3 结果与讨论

3.1 结 果

《中国药典》2015版四部通则“2201浸出物测定法”项下有水溶性浸出物测定法、醇溶性浸出物测定法、挥发性醚浸出物测定法，其中水溶性浸出物测定法又包括冷浸法和热浸法。不同的提取方法对浸出物含量的结果影响很大，本文对浸出方法、提取溶剂、取样量、提取体积等浸出因素进行了考察，优选出最佳的浸出物含量测定方法，并进行6批验证，最终确定骨疏宁片浸出物含量测定方法为：取骨疏宁片数片，除去糖衣，研细， 过二号筛，取粉末3 g，精密称定，置100～250 mL的锥形瓶中，精密加入75%乙醇75 mL，余按热浸法操作。

3.2 讨 论

(1)骨疏宁片为糖衣片，考虑到糖分过高对浸出物测定结果干扰较大，因此需除去糖衣，骨疏宁片在压片前已严格控制颗粒的水分不超5%，不同批号间样品的含水量差异不大，对浸出物测定结果影响不大，因此确定不以干燥品计算骨疏宁片浸出物的含量。

(2)目前中药制剂多以单一成分或多成分的含量测定作为质控手段，但笔者认为中药制剂是一个整体，应是多组分协同起作用，用单一成分的高低来衡量中药制剂的质量有一定的局限性。浸出物含量能整体反映制剂的质量，是中药制剂质量控制的重要指标之一，尤其对于成分复杂，药效成分不明确的中成药，做浸出物含量的考察更具有实际意义。骨疏宁片为纯中药制剂，共含19味中药，成分复杂，无确切的药效成分，本实验对骨疏宁片浸出物测定方法进行研究，建立其浸出物检查法列入质量标准草案，从整体上对骨疏宁片的质量进行控制。

(3)浸出物测定法检验成本较少，对仪器设备要求低，但又能从整体上对中药制剂的质量进行控制，因此可作为固体中药制剂的常规检查项进行推广应用。特别是医院制剂的检验条件较差，缺少高端的检验仪器设备，引进浸出物测定法，对院内制剂的质量控制有较强的可操作性，建议院内制剂固体制剂增加浸出物测定法。