多次人工授精失败后体外受精-胚胎移植的结局分析

谭展虹，林晓霞，蔡冰红，陈如佳，陈娜

（揭阳爱维艾夫医院，揭阳 522000）

人工授精具并发症少、医疗费用低、操作简便等优点，在不孕不育患者中应用较为广泛，但受其助孕成功率相对偏低影响，不少夫妇采取此方式后仍无法受孕，而选择体外受体-胚胎移植（IVF/ICSI-ET）技术，以达助孕目的[1]。本研究选取多次实施人工授精但结果失败患者作研究对象，应用IVF/ICSI-ET技术实施辅助受孕，并展开效果方面的探讨，旨在指导临床应用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取经多次人工授精失败后采取体外受精-胚胎移植技术辅助受孕的患者49周期，设为观察组，女方年龄平均（32.6±3.4）岁，不孕年限平均（4.5±2.8）年；选择同期因双侧输卵管阻塞采取体外受精-胚胎移植技术辅助受孕的患者共131周期，设为对照组，女方年龄平均（32.8±4.1）岁，不孕年限平均（4.6±2.6）年。组间基线资料无明显差异（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 控制性超排卵操作参考我院常规操作方案，行控制性超排卵操作，具体为：取GnRH-a作降调节药物，Gn药物为尿卵泡刺激素或重组人促卵泡激素和（或）尿人绝经期促性腺激素。经阴道B超监测，待卵泡发育成熟时（即双侧卵巢内＞2个卵泡直径在18 mm及以上），取HCG 10,000 U注射，由阴道B超进行引导，于36 h-38 h后完成有效的穿刺取卵动作，对卵母细胞进行有效培养，时间控制在3 h-6 h内。

1.2.2 体外受精及胚胎移植 （1）体外受精：男方精子质量经测定呈较高显示者，依据常规，实施体外受精，按1万精子/卵细胞的实验比例，加精子加入予以配置，16 h-18 h后，细致对原核特征进行观察，完成3 d的后续培养，对优质胚胎选择，在宫腔内移植；（2）ICSI：针对即往体外受精失败者或男方严重弱、少、畸形精子者，可采取卵胞浆内单精子有效注射手段，其它病例操作与体外受精一致；（3）ICSI（R-ICSI）早期补救：疑似受精失败风险较高者，或男方精子质量介于体外受精与胚胎移植之间者，行早期补救胚胎移植；在人工受精6 h，将于卵母细胞周围区域的卵丘细胞有效去除，细到观察排出的第2极体状况，所有MII卵子无第2极体出现时，即按完全受精失败定义，＞30%MII卵子未出现排出第2极体的情况为低受精率，对第2极体无排出的MII卵子进行立即选取，远成早期对胚胎移植的补救操作。胚胎培养与移植操作同人工授精；（4）晚期R-ICSI：人工授精加精操作后16 h-18 h，对全部卵子观察，若表现为不受精的情况，可行卵泡浆内单精子注射操作，继续行2 d培养，对优质胚胎进行选择并移值。

1.3 指标观察 （1）一般情况：对比两组移植胚胎数、Gn用量等；（2）结局：对比两组正常受精率、临床妊娠率、种植率。（3）对比两组完全受精失败率。

1.4 统计学分析 采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析，计量资料采用均数±标准差（Mean±SD）表示，采用t检验。计数资料采用率（%）表示，采用卡方检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 两组患者一般情况比较（Mean±SD）

表2 两组患者结局对比

2 结果

2.1 两组患者一般情况比较 所选患者组间Gn时间、Gn用量、获卵数、移植胚胎数对比无差异（P＞0.05）。见表1。

2.2 两组患者结局对比 两组正常受精率、妊娠率、种植率均存在明显差异（P＜0.05）。见表2。

2.3 完全受精失败率 观察组：本组40周期体外受精中，3周期完全受精失败，其中行晚期补救胚胎移植2周期，未对可完成移植操作的胚胎进行获取；实验中，9周期R-ICSI有1周期完全受精失败的状况存在，行早期R-ICSI，结果均完成胚胎移植，且妊娠成功。完全受精失败率经统计为8.7%（4/49）。对照组：本组患者体外受精117周期，出现完全受精失败的现象1周期，未行晚期R-ICSI；14周期R-ICSI中1周期存在完全受精失败的情况，行早期R-ICSI，有效获2个胚胎，实施移植操作后未孕，经统计完全受精失几率为1.5%（2/131）。受精失败的患者为2例，经观察示，男方为弱、畸形精子症患者。两组完全受精失败率差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

结合本研究结果示，多次人工授精失败转行体外受精-胚胎移植辅助受孕的患者，与双侧输卵管阻塞患者对比，完全受精失败率居较高水平，而正常受精率居较低水平[2,3]。有研究显示，体外受精中出现MII期卵母细胞发生受精失败的状况，与精子穿透障碍相关，精子自身穿透和黏附有异常情况出现，也可导致受精率降低[4]。故研究中，观察组中男方少、弱、畸形精子因素比例明显高于对照组，且含不明原因不孕具较高受精失败风险的患者，可能为导致上述情况的原因。行ICSI可使受精失败风险呈显著减弱表现，促临床结局得以有效改善，在少、弱、畸形严重的精子症病例中，较为常用体外受精-胚胎移植技术，反复人工授精失败患者行胚胎移植，可使完全不受精风险降低，但出现对胚胎移植生物完全性的考虑，此种操作缺乏科学性[5]。但就现阶段检验方法而言，尚不可准确对受精失败进行有效预测，甚至会有精液检查结果正常，但胚胎移植显示失败的现象，本次观察组中，结果示完全不受精的患者中精液正常1例。不少医师着力于对更好的方式探索，即可防范受精失败，又避免扩大应用胚胎移植的情况，采用早期R-ICSI，可获得理想的妊娠结局，且未使安全性风险增强，本次研究结果与上述理论一致。

综上，多次人工授精失败行体外受精-胚胎移植辅助受孕的患者，相较临床为女方双侧输卵管出现阻塞症状的患者，受精失败风险居更高水平，应在病程早期即取R-ICSI应用，可使风险得以避免，获取理想的IVF/ICSI-ET结局。

参考文献

1 何于夏, 夏容, 陈薪, 等. 在体外受精-胚胎移植中应用多项卵巢储备功能评估指标预测卵巢反应性[J]. 南方医科大学学报 2013, 33(2): 216-220.

2 邱绮, 贾佳, 黄佳, 等. 胚胎移植管血染对IVF/ICSI助孕结局的影响[J]. 广东医学, 2014, 35(8): 1185-1188.

3 谭金凤, 王宁宁, 梁莉莉, 等. 体外受精-胚胎移植后宫内外同时妊娠不同处理方法的结局比较[J]. 实用医学杂志, 2013,29(14): 2286-2289.

4 何玉洁, 王瑛, 土增荣, 等. 体外受精-胚胎移植过程中子宫收缩与妊娠结局的相关性分析[J]. 中国药物与临床, 2015,15(9): 1249-1252.

5 候震晖, 杨伟洪, 耿岚, 等. 子宫内膜异位症患者体外受精-胚胎移植周期妊娠结局影响因素分析[J]. 中国妇幼保健, 2014,29(33): 5458-5461.