内皮素-2基因多态性与老年原发性高血压发生及非洛地平降压作用的关系

王健楠 王立忠 习瑾昆 李永乐

(天津医科大学总医院心内科，天津 300050)

原发性高血压为一种环境因素和遗传因素相互作用的疾病，是肾衰竭、脑卒中和冠心病的危险因素。临床上高血压的治疗药物有多种，但不同患者对不同降压药的反应不同，因此合理选择降压药具有重要意义〔1，2〕。分子遗传学的发展为从基因水平研究疾病的易感因素和药物反应差别提供了技术和理论支持，对高血压患者进行基因多态性研究可以为高血压的预防、诊断和治疗提供依据〔3，4〕。内皮素是缩血管物质〔5，6〕，本文对内皮素-2基因多态性与老年原发性高血压发生及降压治疗效果的关系进行研究。

1 资料与方法

1.1临床资料 选择天津医科大学总医院2011年1月至2016年12月诊治的汉族老年原发性高血压患者200人作为高血压组，健康体检老年人200例作为对照组。高血压组年龄(71.23±8.32)岁，男127例，女73例；对照组年龄(70.03±6.57)岁，男114人，女86人，高血压组和对照组性别和年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。高血压组高血压家族史高于对照组(P<0.05)，体重指数、总胆固醇和三酰甘油水平均高于对照组(P<0.05)。见表1。高血压诊断标准：至少3次非同日未服降压药的情况下收缩压≥140 mmHg和(或)舒张压≥90 mmHg。排除标准：相互之间有血缘关系者，冠心病者，继发性高血压者，糖尿病者，肝肾功能异常者，恶性肿瘤者，拒绝参与者。

表1 高血压组和对照组临床资料比较

1.2方法

1.2.1高血压患者降压治疗 高血压患者给予非洛地平(5 mg，1次/d)口服治疗2个月。

1.2.2内皮素-2基因A985G位点基因型检测 对照组于体检时抽取外周静脉血3 ml于抗凝管中，高血压组于高血压诊断时和高血压常规治疗2个月后抽取外周静脉血3 ml于抗凝管中，采用基因芯片技术测定内皮素-2基因A985G位点基因型。具体步骤：将扩增液分装，将各离心管中加入血液，并混匀，加入红细胞裂解液，震荡后离心，抽提裂解细胞，加入扩增液进行扩增，扩增条件为50℃ 5 min，94℃ 5 min，94℃ 25 s、56℃ 25 s、72℃ 25 s共40个循环，72℃延伸5 min。扩增后加入杂交液进行杂交，杂交后用蒸馏水把芯片清洗干净，烘干，采用基因芯片分析软件对芯片基因型进行分析。

1.3统计学方法 采用SPSS20.0软件，基因多态性遗传平衡检验及率的比较采用χ2检验，均数比较采用t检验，高血压影响因素分析采用多因素二分类Logistic分析。

2 结 果

2.1高血压组和对照组内皮素-2基因A985G位点基因型基因多态性遗传平衡检验 经Hardy-Weinberg平衡检验，两组内皮素-2基因A985G位点基因型均符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05)，可见，高血压组和对照组样本具有群体代表性。

2.2高血压组和对照组内皮素-2基因A985G位点基因型比较 高血压组和对照组内皮素-2基因A985G位点基因型比较差异有统计学意义(P<0.05)，高血压组GG基因型〔157例(78.5%)〕显著高于对照组〔113例(56.5%)，P<0.05〕，AA基因型〔4例(2.0%)〕和AG基因型〔39例(19.5%)〕显著低于对照组〔14例(7.0%)，73例(36.5%)，均P<0.05〕。

2.3高血压组和对照组内皮素-2基因A985G位点等位基因频率比较 高血压组和对照组内皮素-2基因A985G位点等位基因频率比较差异有统计学意义(P<0.05)，高血压组G等位基因频率〔353例(88.3%)〕显著高于对照组〔299例(74.8%)，P<0.05〕，A等位基因频率〔47例(11.8%)〕显著低于对照组〔101例(25.3%)，P<0.05〕。

2.4高血压相关因素的二分类Logistic回归分析 将体重指数、总胆固醇、三酰甘油、内皮素-2基因多态性作为自变量，有无高血压作为因变量进行二分类Logistic回归分析，结果显示：体重指数、总胆固醇和内皮素-2基因多态性与高血压的发生有关(P<0.05)。见表2。

表2 高血压相关因素的二分类Logistic回归分析

2.5高血压患者治疗前后血压变化情况 200例高血压患者治疗后收缩压〔(133.26±9.67)mmHg〕和舒张压〔(82.14±7.68)mmHg〕均明显低于治疗前〔收缩压(153.24±10.32)mmHg,舒张压(98.67±8.53)mmHg，P<0.05〕。

2.6内皮素-2基因多态性对高血压降压治疗效果的影响 不同内皮素-2基因型患者治疗后血压下降值比较差异有统计学意义(P<0.05)，其中GG基因型收缩压〔(18.32±5.64)mmHg〕和舒张压下降值〔(15.42±5.12)mmHg〕明显高于AA基因型〔(8.56±3.24)mmHg,(6.45±3.02)mmHg〕和AG基因型〔(13.21±4.35)mmHg,(12.13±4.64)mmHg，P<0.05〕，AG基因型收缩压和舒张压下降值明显高于AA基因型(均P<0.05)。

3 讨 论

内皮素为一种活性多肽，由血管内皮细胞合成，内皮素通过和血管平滑肌细胞上的相应受体结合发挥内皮素加压作用和血管收缩作用，促进血管平滑肌增殖，具有非常强的缩血管作用。内皮素收缩血管的机制可能为通过细胞内存储钙离子释放或钙离子通道开放引起细胞内钙离子水平增加，从而引起血管收缩。内皮素可增加血管对5-羟色胺、去甲肾上腺素等缩血管物质的缩血管反应而增加外周血管阻力，从而引起血压升高〔7,8〕。内皮素-1的基因多态性和血压水平的关系已被研究证实〔9～11〕，A985G基因多态性是内皮素-2基因多态性研究比较多的基因位点〔12,13〕。本文对内皮素-2基因A985G位点和汉族老年原发性高血压患者的关系进行研究，结果发现老年原发性高血压具有家族聚集性，内皮素-2基因A985G位点基因多态性和高血压的发生关系密切，考虑内皮素-2基因A985G位点基因多态性是老年原发性高血压的易感因素。

血管内皮细胞分泌的内皮素在原发性高血压的发生过程中发挥重要作用，内皮素和一氧化氮共同参与维持血压稳定和调节血管张力，如果内皮素和一氧化氮比例失调可引起左心室肥厚、原发性高血压、心力衰竭等。非洛地平为选择性钙离子拮抗剂，对小动脉平滑肌细胞钙内流具有抑制作用〔14〕。本结果发现，内皮素-2基因A985G位点基因多态性和老年原发性高血压的降压效果有关，非洛地平对内皮素-2基因A985G位点GG基因型患者的效果较其他基因型好。

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