桔梗饮片的质量控制研究

2018-04-25王船英王成永

长春师范大学学报 2018年4期

王船英，刘圣，王成永

(1.安徽中医药大学，安徽合肥 230038；2.安徽医学高等专科学校，安徽合肥 230601；3.安徽省立医院，安徽合肥 230001)

桔梗(Platycodon grandiflorus)是桔梗科草本植物，可用于治疗痰多、咽痛、抗炎、镇静等。桔梗中的化学成分很多，含有大量皂苷类、黄酮类、酚类、多糖类化合物等。其中桔梗皂苷D是主要皂苷，是其主要的有效成分，具有显著的镇咳祛痰、抗肿瘤、抗氧化及免疫增强作用[1]。因此，桔梗皂苷在食品、医药和化工领域都有着广泛的应用。但市场上销售的桔梗饮片质量参差不齐，本实验通过对15批桔梗饮片的质量进行定性定量分析并作出总结，为市场和企业饮片质量标准的制定提供参考和依据。

1 实验部分

1.1 药材、仪器与试剂

1.1.1 药材

桔梗饮片(安徽源和堂药业股份有限公司提供)，桔梗药材来源安徽亳州(1-3)、太和(4-6)、涡阳(7-9)、吉林(10-12)、抚松(13-15)。

1.1.2 仪器

硅胶G薄层板、称量瓶、打粉机、马弗炉、恒温水浴锅、超声清洗仪(UP-2200H型)、万分之一电子天平(上海越平科学仪器有限公司)、电热恒温鼓风干燥箱(PHG-9140A)、Waters1525 Binary HPLC泵、Waters2489紫外检测器、AT-330柱温箱。

1.1.3 试剂

桔梗皂苷D对照品(批号：11851-2016-07，中国食品药品检定研究院，纯度94.0%)、桔梗对照药材(批号：121028-201210，中国食品药品检定研究院)、娃哈哈纯净水、乙醇、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、无水硫酸钠、甲醇、乙腈、乙醚、浓硫酸。以上试剂，甲醇、乙腈为色谱纯级别，其余为分析纯。

2 水分、灰分及浸出物的测定

2.1 测定方法

水分测定参照《中国药典》2015年版四部通则中的水分测定法第二法(烘干法)，总灰分测定参照《中国药典》2015年版四部通则中灰分测定法，浸出物测定参照《中国药典》2015年版四部通则中浸出物测定法(热浸法)。

2.2 结果分析

15批饮片的水分、灰分及浸出物检查结果见表1所示。

表1 15批饮片的水分、灰分及浸出物检查结果

3 鉴别

15批饮片，经安徽中医药大学药学院王成永教授和安徽省立医院药剂科主任药师刘圣的鉴别，确认为桔梗科植物桔梗的干燥切片。

按中国药典第一部桔梗项下薄层色谱鉴别的处理方法制得15批饮片的供试品溶液。另取桔梗对照药材一份，采用同样的方法制成对照药材溶液。用毛细管吸取上述溶液，分别点于相同规格的硅胶G薄层板上，将配置好的石油醚-乙酸乙酯(7∶4)的展开剂倒入展开槽内进行展开，晾干后用10%硫酸乙醇溶液喷洒后，晾干[2]。将薄层板放置于烘箱中105℃下加热至斑点显色清晰，结果显示：供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上有相同颜色的斑点(图1)。

图1 DZYC为桔梗对照药材；1-15为不同批次的桔梗饮片

4 桔梗皂苷D含量的测定

4.1 色谱条件

高效液相色谱仪(Waters1525二元高压泵，Waters2489紫外检测器),大连依利特C18色谱柱，流动相为乙腈-水(28∶72)，检测波长210 nm,流速1mL/min,柱温30℃。

4.2 对照品的制备

精密称取桔梗皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含桔梗皂苷D 1mg的溶液(1.0026 mg/mL)即得，备用。

4.3 供试品的制备

按药典方法，制取供试品。取本品粉末(过二号筛)约2.0 g，精密加入甲醇50 mL，超声处理30 min，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀、滤过。精密量取续滤液25 mL，水浴蒸干，残渣加水20 mL，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20 mL，合并正丁醇提取液。用氨试液50 mL洗涤，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水50 mL洗涤，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇3 mL使溶解，加硅胶0.5 g拌匀，置水浴上蒸干，加在以氯仿-甲醇(9∶1)装好的硅胶柱(内径2 cm，10 g)上，以氯仿-甲醇(9∶1)50 mL洗脱，弃去洗脱液，再以氯仿-甲醇-水(60∶20∶3)100 mL洗脱，弃去洗脱液，继用氯仿-甲醇-水(60∶29∶6)100 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中，摇匀，即得[3]。15批供试品溶液均用此法制得。

4.4 线性关系考察

分别精密吸取4.2项对照品溶液稀释成0.1、0.25、0.5、0.75 mg/mL不同浓度的溶液，分别取0.1、0.25、0.5、0.75、1 mg/mL溶液20 uL注入液相色谱仪，得回归方程Y=2×106X+15618，R2=0.9992。结果表明，桔梗皂苷D在2～20 ug之间，其浓度与峰面积呈良好的线性关系(图2)。