SNCA基因多态性与PD患者发病和临床特征的相关性分析

田小军，郝洁，邢红霞，赵建华，郭双喜，苏洲，杜佳，王玉梅

(新乡医学院第一附属医院神经内科，河南 卫辉 453100)

帕金森病（PD）是临床上常见的中老年人中枢性神经系统病变[1，2]，临床表现为“四主征”症状，其病理基础是黑质多巴胺（DA）能神经元变性缺失和形成路易小体，在我国该病具有较高的发病率，成为临床关注的焦点问题之一[3-5]。目前对于PD的发病机制主流的看法认为，其是在年龄老化的情况下遗传因素和环境因素共同作用引起的[6，7]，据相关研究报道α-突触核蛋白（SNCA）基因是PD的致病基因之一，无论家族性和散发型的PD都与SNCA基因关系密切[8-10]。SNCA基因具有多态性，因此其多态性对PD病发的影响成为学界研究的热点。因此研究ɑ-突触核蛋白（SNCA）基因多态性与帕金森病（PD）发病和临床特征的相关性，为PD的治疗提供理论根据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取新乡医学院第一附属医院确诊的80例PD患者（PD组），同时选取80例年龄、性别与之匹配的健康对象作为对照组，收治时间2014年1月至2017年1月。

PD组，男 48例、女 32例，年龄 58～86岁，平均69.8±8.2岁，受教育年限9.0±3.7年，合并疾病：高血压27例、糖尿病9例、高血脂6例。对照组，男 45 例、女 35 例，年龄 55～85 岁，平均 69.4±9.0岁，受教育年限9.5±3.5年，合并疾病：高血压31例、糖尿病12例、高血脂4例。2组患者的年龄、性别、受教育年限、合并疾病比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 纳入排除标准

1.2.1 纳入标准 ⑴PD患者的诊断参考人民卫生出版社《神经病学》（第七版）制定的诊断标准；⑵健康对照组来源于本院体检中心体检结果健康的自愿者，无PD症状、家族史；⑶均为汉族；⑷本研究获得研究对象、医学伦理委员会的知情同意。

1.2.2 排除标准 ⑴伴有严重的肝肾功能疾病；⑵伴有严重的营养不良、贫血；⑶免疫缺陷、免疫功能障碍；⑷各种原因所致的帕金森综合征及帕金森叠加综合征；⑸脑血管病史、颅脑外伤史；⑹合并精神性疾病。

1.3 检测方法 采集受试者外周血，采用氯仿法提取患者外周血基因组DNA，根据SNCA基因的rs356200位点两侧序列，用Primer5.0软件设计引物，采用聚合酶链反应（PCR）进行扩增，总反应体系为20uL，PCR反应为95℃，预变性2min，95℃、60℃和72℃各30s，72℃延伸5min， 共40个循环。将PCR酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分离确定rs356200基因型。

1.4 研究方法 收集两组的年龄、性别、民族、H-Y分级、帕金森病联合评分量表（UPDRS）评分、帕金森病人生活质量量表（PDQ39）评分、简明精神状态检查量表（MMSE）评分、首发症状类型，并按照SNCA基因rs356200位点的基因性别进行分析。

1.5 统计学方法 统计软件采用SPSS 16.0，采用均数±标准差（x±s）进行统计描述，三组间比较采用单因素方差分析法；计数资料组间比较采用χ2检验；P值＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象SNCA基因rs356200位点的基因多态性比较 PD组的SNCA基因rs356200位点等位基因A所占比例67.50%显著的高于对照组的 56.25%（P＜0.05）；PD 组的 SNCA 基因 rs356200位点A/A基因型所占比例36.25%显著的高于对照组的 18.75%（P＜0.05）；（表 1）。

表1 两组研究对象SNCA基因rs356200位点的基因多态性比较（x±s）

2.2 PD患者SNCA基因rs356200位点的基因型与患者临床特征的关系 SNCA基因rs356200位点A/A、A/G、G/G基因型三组PD患者的患者的年龄、性别、首发症状类型、UPDRS评分、PDQ39评分、MMSE评分比较，差异均不具有统计学意义（P＞0.05）；（表 2）。

3 讨论

帕金森病（PD）又称震颤麻痹，是临床上常见的中老年人中枢性神经系统退行性疾病，其发病率仅次于阿尔茨海默病，临床表现为“四主征”症状，包括运动迟缓、肌肉强直、静止性震颤和步态姿势异常，以路易(Lewy)小体形成、多巴胺能神经元变性和功能缺失为病理基础，由于发病机制尚不清楚，缺乏有效的治疗手段，PD在临床和学界广受关注[11，12]。目前对于PD的发病机制主流的看法认为，在年龄老化的情况下遗传因素和环境因素共同作用引起的。据相关研究报道，PD的病理改变是由SNCA蛋白聚集小体造成的，因此α-突触核蛋白（SNCA）基因被认为是PD的致病基因之一[13]。SNCA蛋白分子量相对较小，可调节神经可塑性、细胞分化和信号传递，其在体内积聚可导致发生功能性障碍甚至神经细胞死亡，而引起PD发病的SNCA蛋白聚集则是由基因的重复突变或者点突变引起。SNCA具有多态性，如rs356200和rs356165等多种基因位点，增加了SNCA蛋白的表达，从而增加了PD发病的风险，据相关报道称无论家族性和散发型的PD都与SNCA基因多态性密切相关[14，15]。

表2 PD患者SNCA基因rs356200位点的基因型与患者临床特征比较（x±s）

3.1 两组研究对象SNCA基因rs356200位点的基因多态性比较 据相关研究表明，SNCA基因rs356200位点的基因是与PD发病的相关基因位点，而该基因位点具有多态性，因此其突变更有可能导致SNCA蛋白异常高表达，从而增加了SNCA的体内水平，增加了其聚集的风险，从而更容易导致PD的病发，因此本文首先考察了SNCA基因rs356200位点的基因的多态性分布，以考察诱发PD病发的基因型，现结果如下：PD组的SNCA基因rs356200位点等位基因A所占比例显著的高于对照组；PD组的SNCA基因rs356200位点A/A基因型所占比例显著的高于对照组，以上结果均具有统计学差异，这表明SNCA基因rs356200位点等位基因A和A/A基因型是诱发PD发病的危险等位基因和基因型，在临床上具有一定预测PD发病的作用。

3.2 PD患者SNCA基因rs356200位点的基因型与患者临床特征的关系 为更为全面的考察PD病情的发展与SNCA基因rs356200位点基因多态性的关系，本文考察了PD组的SNCA基因rs356200位点A/A、A/G、G/G基因型与患者的年龄、性别、首发症状类型、UPDRS评分、PDQ39评分、MMSE评分组间比较，发现以上结果差异均不具有统计学意义，这表明SNCA基因rs356200位点基因的多态性与PD的临床特征和病情严重程度不具有相关性，而可能是与环境因素关系更为密切。

综上所述本文研究了ɑ-突触核蛋白（SNCA）基因多态性与帕金森病（PD）发病和临床特征的关系，证明了SNCA基因rs356200位点等位基因A和A/A基因型是诱发PD发病的危险等位基因和基因型，但其多态性与PD临床特征和病情严重程度不具有相关性，而可能是与环境因素关系更为密切，因此SNCA基因rs356200位点的基因的多态性在临床上具有一定预测PD发病的作用。

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