乳腺癌患者ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表达与超声征象的关系

薛林燕　赵　旭　才让卓玛　王　雪　刘 君　张泽恺

(青海大学附属医院超声科，青海　西宁　810001)

1北京民航总医院妇产科

乳腺癌为女性高发恶性肿瘤类型，目前全球每年大概新增乳腺癌病例120万例，并且该数据逐年上涨，早确诊、早治疗对于该病治疗效果和生存率均非常重要〔1，2〕。报道显示，内源性雌激素直接参与影响乳腺上皮本身生长及分化活动，并且对乳腺癌发病及病情进展等起关键作用〔3〕。其中比较经典的可用于评估乳腺癌预后情况及指导治疗方向的重要调节因子包括雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体(C-erbB)-2、增殖细胞核抗原(Ki-67)等，临床通常根据其表达情况判断患者激素依赖情况，并决定是否采用内分泌治疗。同时，超声对于乳腺癌临床诊断及肿瘤良恶性辨别也发挥重要作用，为临床诊疗工作提供较大帮助。近期有学者提出，可将影像学及病理学二者相结合用于乳腺癌临床诊疗，通过生物学标记物及基因技术等来完成病理分子检测，并确定乳腺癌特征〔4〕。本文主要探讨乳腺癌患者ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表达及与超声征象的关系。

1　资料和方法

1.1临床资料选择2014年1月至2017年5月青海大学附属医院接受诊治的乳腺癌患者194例纳入此次研究。入选标准：(1)符合WHO关于乳腺癌的相关诊断标准〔5〕；(2)经术后病理证实；(3)均为女性；(4)年龄>20岁；(5)对本次研究已知情同意，且已签署知情同意书。排除标准：(1)其他类别的恶性肿瘤者；(2)入组前已实施手术治疗者；(3)病历资料缺失者。194例患者中，年龄21～68岁，平均(44.67±1.29)岁。病理类型：浸润型导管癌191例，黏液癌3例。有淋巴结转移64例，无淋巴结转移130例。本次研究经医院伦理委员会评审通过。

1.2研究方法

1.2.1超声诊断方法选择东芝660SSA-660A及飞利浦iU-Elite 550A彩超诊断仪为所有患者实施检查，探头频率4～10 MHz及7.5～12 MHz，患者取仰卧位，将双侧乳房和双腋下予以充分显露，对以乳头作为中心位置的四个象限和乳头下方行多切面扫查，确保扫查的断面均相互重叠，无扫查盲区。记录以下数据信息：(1)腺体厚度；(2)肿块位置；(3)肿块大小；(4)肿块的包膜和边界及形态；(5)肿块内部回声；(6)钙化灶情况等。在肿块和周边行彩色多普勒(CDFI)和能量多普勒(CDE)的血流叠加显像，而后根据Adler半定量法对血流分级进行评定〔6〕，主要分为：(1)0级，无血流；(2)Ⅰ级，可见少量血流，存在1～2个点状血流，且管径<1 mm；(3)Ⅱ级，可见中量血流，存在1～2个主要血管，且长度大于肿块的半径，或同时存在2～4个小血管；(4)Ⅲ级，可见大量血流，存在≥4个血管，且粗细不等。观察患者双侧腋下淋巴结的大小和形态及回声等情况。

1.2.2ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的检测将手术切除的癌灶组织制成石蜡切片，应用产自深圳晶美公司的兔抗人雌激素受体的免疫组化型单克隆抗体(ER)和兔抗人孕激素受体的免疫组化型单克隆抗体(PR)，鼠抗人表皮生长因子的免疫组化型单克隆抗体(C-erbB-2)和鼠抗人Ki-67抗体常规实施免疫组化染色，严格根据说明书所描述的步骤实施操作。其中ER、PR和Ki-67的阳性表达均定位在细胞核，在其中有弥漫性或者深浅各异的棕黄色颗粒记为阳性。C-erbB-2主要定位在细胞质，在细胞质内发现棕黄色颗粒则记为阳性。对每张切片在100倍的视野下选择肿瘤细胞的强染色区，并在400倍的视野下作出100个癌细胞的连续计数，统计阳性细胞的比例，其中比例<6%为阴性，6%～25%为弱阳性，26%～50%为中阳性，≥51%为强阳性。阳性率=阳性细胞数/总细胞数×100%。

1.3观察指标分析患者超声特征与ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的表达的相关性。

1.4统计学方法应用SPSS21.0统计软件进行分析，其中计数资料用(n，%)表示，采用χ2检验，相关性分析采用Pearson法实施评价，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　果

2.1患者的超声特征分析194例乳腺癌患者的超声特征中，肿块边缘均不整齐，且无包膜，超声显示的界限不清。肿块的直径最小者为0.4 cm×0.5 cm，最

大者5.2 cm×6.4 cm。且肿块直径<2.0 cm、有毛刺征、有钙化灶、血流信号分级为Ⅱ～Ⅲ级、无淋巴结转移为主要的超声特征表现见表1。

表1　患者的超声特征分析〔n(%)〕

2.2患者超声征象与ER、PR、C-erbB-2及Ki-67表达ER阳性表达者有毛刺征、无淋巴结转移及血流信号分级为Ⅱ～Ⅲ级的比例明显更高，PR和C-erbB-2阳性表达者无淋巴结转移及血流信号分级为Ⅱ～Ⅲ级的比例明显更高，Ki-67阳性表达者肿块直径≥2 cm及血流信号分级为Ⅱ～Ⅲ级的比例明显更高，差异均有统计学意义(均P<0.05)，见表2。

2.3患者的超声征象与其ER、PR、C-erbB-2及Ki-67表达的相关性患者的ER表达与毛刺征和血流信号分级均呈正相关，与淋巴结转移呈负相关。患者的PR及C-erbB-2均与淋巴结转移呈负相关，与血流信号分级呈正相关。患者的Ki-67与肿块直径和血流信号分级呈正相关。见表3。

表2　患者的超声征象及ER、PR、C-erbB-2及Ki-67阳性表达结果〔n(%)〕

表3　患者的超声征象与ER、PR、C-erbB-2、Ki-67表达的相关性分析(r值，P值)

3　讨　论

多数乳腺癌患者初次就诊时已进入进展期阶段，对患者身心均造成较大伤害，伴随临床对于乳腺癌发病、病情进展及浸润转移等活动不断地深入研究，其治疗方法也不断扩展，逐渐发展为手术、放化疗及内分泌治疗等多种方法相结合的新型综合疗法〔7〕。同时，治疗方案的选定主要依据患者病理分型、分期及雌激素受体表达情况等信息，并且临床规定当患者ER、PR、C-erbB-2、Ki-67等表达结果为阳性时才可以选用内分泌治疗，因此乳腺癌组织内雌激素受体表达情况直接关系到患者治疗方式选择及预后评估等〔8〕。而超声检查属于无创性检查，可重复进行，能够较好地适用于乳腺肿瘤临床诊断，对肿瘤良恶性鉴别起到重要辅助作用，并对临床治疗工作提供可靠依据〔9〕。

本研究发现，194例乳腺癌患者的超声特征中，肿块边缘均不整齐，且无包膜，超声显示的界限不清，且肿块直径<2.0 cm、有毛刺征、有钙化灶、血流信号分级为Ⅱ～Ⅲ级、无淋巴结转移为乳腺癌的主要超声特征表现，这与黄巍等〔10〕的报道结果基本相符，提示对乳腺癌患者实施超声诊断时，较易发现毛刺征和钙化灶，以及更加丰富的血流信号，这主要与乳腺癌的肿瘤形成机制有关。癌灶形成后，其需要的血供明显增多，且边缘变化较大，与乳腺正常组织的超声影像明显存在差异。但本研究发现多数患者的肿块直径相对较小，且较少出现淋巴结转移，主要是因为乳腺癌发病位置较为特殊，患者因乳腺不适就诊的时间相对提前。同时，本文提示乳腺癌患者机体的ER、PR、C-erbB-2及Ki-67表达与其超声征象之间存在着紧密联系。原因主要是因为ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的表达与肿瘤的发生发展有关，而超声征象所反映的即肿瘤的病变情况，因此二者之间具有一定的相关性〔11〕。临床对于激素依赖类型乳腺癌患者，通常应用ER类型拮抗剂进行治疗，此治疗方案对于ER、PR阳性结果患者临床预后效果较理想，进而受到广泛认可及接受，也证实了ER和PR的表达情况有助于乳腺癌临床预后评估以及治疗指导。C-erbB-2属于表皮生长因子类型受体家族，可作为细胞生长、分化及存活等活动关键调节因子，同时在细胞生长和增殖及分裂等活动均有所参与并起到重要调控作用。此外，临床研究发现〔12〕，C-erbB-2对肿瘤生长发挥控制作用，当其蛋白产物呈过度表达或者异性增生时，会与致瘤性之间产生一定联系，并且C-erbB-2和肿瘤预后直接相关。当C-erbB-2表达上升时，患者临床预后往往较差。Ki-67和肿瘤产生以及发展等关系十分密切，属于核增殖性标志物，有助于判断肿瘤细胞本身增殖水平。恶性肿瘤整个生长过程中会分泌出大量多种生长因子，进而促进新生血管产生，以确保自身生长所需。而肿瘤中新生血管通常表现为血管壁缺少肌细胞，通常是由内皮细胞及肿瘤细胞构成，使得血管壁薄并且管腔较大，粗细不匀且走行扭曲，呈紊乱血管网，甚至表现为动静脉瘘，此类病理学特点均是超声对乳腺癌组织血供情况诊断依据。通过对乳腺癌组织内血流状况进行半定量分析，可见其组织周边和内部血流分布状态分成穿入型、周边型及内部型和无血型几种。并且研究结果显示，穿入型血流和患者C-erbB-2、Ki-67的表达呈明显正相关，当癌灶组织内血流丰富，C-erbB-2阳性率较高，且Ki-67的表达越高〔13〕。同时，肿瘤直径和Ki-67水平高低呈正相关，肿瘤直径越大则Ki-67表达水平往往也越高；这在贾志莺等〔14〕的报道中也有类似结论。

1刘丽，徐文贵，戴东，等.小乳腺癌的超声诊断特征及其与ER、PR、c-erBb-2表达相关性研究〔J〕.中国实验诊断学，2016；20(3)：389-92.

2蔡培伟，林腾，朱晓欢，等.三种超声成像技术对乳腺肿瘤大小的测量误差与雌激素受体、孕激素受体、血管内皮生长因子表达的相关性研究〔J〕.中国基层医药，2016；23(5)：641-4.

3杨绍英，刘朝荣，张志刚，等.乳腺癌新辅助化学治疗前后雌激素受体、乳激素受体、Ki-67抗原和人类表皮生长因子受体-2的表达〔J〕.新乡医学院学报，2017；34(2)：125-8.

4李美莺，吴阳，夏寅娟，等.乳腺癌超声数据分级系统与雌激素受体、孕激素受体、原癌基因的相关性〔J〕.实用临床医药杂志，2017；21(1)：103-5.

5姜文彬，任甫.乳腺浸润性导管癌超声征象与生物学指标相关性的研究〔J〕.中国临床医学影像杂志，2017；28(2)：89-94.

6Li B，Zhao X，Dai SC，etal.Associations between mammography and ultrasound imaging features and molecular characteristics of triple-negative breast cancer〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2014；15(8)：3555-9.

7王雯，刘纪锋.乳腺癌超声征象与分子生物学表达的相关性研究〔J〕.中国中西医结合影像学杂志，2016；14(4)：400-2.

8李亚帅，王知力，李晔，等.非肿块型与肿块型乳腺癌的免疫组织化学指标研究〔J〕.中国医学影像学杂志，2016；24(12)：897-9，902.

9马少君，刘延梅，张月浪，等.雌激素受体阴性乳腺癌HER-2过表达及与影像学和临床病理特征的关系〔J〕.现代肿瘤医学，2016；24(23)：3725-9.

10黄巍，程文，高崧瀛，等.乳腺癌彩色多普勒血流分布类型与分子生物学的相关性研究〔J〕.临床超声医学杂志，2010；12(11)：736-8.

11颜丹，何文，邬冬芳，等.乳腺癌超声声像图表现与免疫组化指标的关系及意义〔J〕.临床超声医学杂志，2008；10(10)：659-61.

12Xu G，Han T，Yao MH，etal.Three-dimensional ultrasonography for the prediction of breast cancer prognosis〔J〕.J BUON，2014；19(3)：643-9.

13郭冀鲁，李远，牛俊波，等.乳腺浸润性导管癌超声特征与分子生物学表达的相关性研究〔J〕.中国医学创新，2015；12(26)：32-5.

14贾志莺，艾秀清，张银华，等.乳腺浸润性导管癌直接超声征象与雌激素受体和孕激素受体表达的关系研究〔J〕.中国全科医学，2016；19(27)：3291-5.