2017年鲁北地区猪流行性腹泻流行病学调查与防控措施

于新友，李天芝，王金良

（1.山东绿都生物科技有限公司，山东 滨州 256600；2.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600）

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea viruse,PEDV）引起的一种高度接触性肠道传染病[1]。临床表现以呕吐、水样腹泻、脱水为特征[2]。一年四季均可发病，冬、春季节多发[3]。各日龄猪均可感染，哺乳仔猪受到的危害最为严重，尤其是头胎母猪所产7日龄内仔猪死亡率可达100%[4]。成年猪发病较轻，但可长期隐性带毒，康复猪可持续排毒1～2个月。PED发病急，传播速度快，短时间内猪场可反复发病。PEDV主要通过消化道和呼吸道传播[5]。PEDV有囊膜，对外界环境抵抗力弱，阳光照射6小时可杀灭病毒[6]，70℃热水处理10 min可杀灭病毒。1971年，英格兰首次暴发PED[7]，1978年，比利时学者成功分离了PEDV，随后匈牙利、德国、荷兰、瑞士、法国等均有相关报道[8]。我国于1976年有PED发病的相关报道[9]，并于1982年实现了PEDV在肠组织原代单层细胞上传代培养[10]。自2010年底PED在我国大规模暴发[11]，一直未得到有效控制，给我国养猪业造成了重大的经济损失。

为了解山东省鲁北地区PED的流行情况，进一步补充和丰富该地区PED流行病学资料，从而为该地区更好地开展PED的防控工作提供参考。笔者于2017年1—12月，从鲁北地区9个县不同猪场采集的249份病料样品，应用荧光PCR检测试剂盒检测，并统计检测结果，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 病料

2017年1—12月从山东鲁北地区不同猪场无菌采集疑似PEDV感染的猪肠道及内容物等作病料。共从鲁北地区9个县36个猪场采集249份病料。

1.2 试剂盒

猪流行性腹泻、传染性胃肠炎、轮状病毒病三重荧光PCR检测试剂盒和猪圆环病毒病荧光PCR检测试剂盒均由山东绿都生物科技有限公司动物疫病检测事业部研制。AxyPrep体液病毒DNA/RNA小量提取试剂盒购自爱思进生物技术（杭州）有限公司。

1.3 核酸制备

无菌采集的2～3 g疑似PED病猪病料样品，按1∶5比例加入灭菌生理盐水，研磨后，反复冻融3次，12 000 r/min离心5 min，取上清液，按照AxyPrep体液病毒DNA/RNA小量试剂盒说明书提取病毒核酸样品。

1.4 病料样品初步检测

按试剂盒说明书对制备的核酸进行检测，统计PED检测结果及与其它3种病原的混合感染情况。

2 试验结果

2.1 疑似病料检测结果

如表1所示，共从山东鲁北地区9个县采集249份病料，共检测到PED阳性病料108份，总的平均阳性率为43.4%。其中4个县PEDV阳性率高于平均水平，按从高到低的顺序排列分别是利津县（63.4%）、博兴县（47.8%）、沾化县（45.8%）、临邑县（43.8%）。PEDV在猪场发病猪中以单一感染为主，但也有与TGEV、RV、PCV2等其它病原混感的情况，其中PEDV单一感染数占阳性样品总数的85.2%（92/108），二重感染以PEDV和RV混感为主，占阳性样品总数的5.6%（6/108），三重感染仅检测到PEDV、PCV2和TGEV混合感染，占阳性样品总数的2.8%（3/108），未检测到四重感染的现象。

表1 疑似猪流行性腹泻病例临床样品检测结果 份

2.2 不同季节猪场PEDV检测结果

如表2所示，不同季节均有PED发病，山东鲁北地区108份PED阳性病料中，检测的病料数最多且阳性率最高的季节是冬季，阳性率为54.3%（63/116）。夏、秋季检测的PED疑似样品量较少，阳性率相对低，分别为 23.8%（10/42）和 32.5%（13/40）。

表2 不同季节猪场PEDV检测结果

3 讨论

2017年1—12月份，哈兽维科市场部检测实验室共收到来自全国24个省市325个规模猪场的病料样品进行检测，结果显示，PEDV阳性率为40.94%（174/425），TGEV 阳性率为 0.26%（1/386），RV 阳性率为 5.60%（20/357），PCV2 阳性率为 27.84%（233/837），PEDV与PCV2存在一定程度的混合感染。何启盖等2016年1—7月共检测来自全国不同省份的133家猪场腹泻样品1 195份，结果显示，PEDV阳性样品数为558份，阳性率为46.7%，TGEV阳性样品数为21份，阳性率为1.8%，RV阳性样品数为31份，阳性率为2.6%。2017年北京中科基因技术有限公司对河南、湖南、四川等全国主要养殖地区送检的病料样品进行病原检测，结果显示，PEDV的阳性率为 20.49%（126/615），TGEV 的阳性率为 5.43%（15/276），RV 的阳性率为 8.89%（12/135）。

对PED目前尚无有效的治疗方法，只能预防。平时要加强饲养管理，饲喂全价配合饲料，猪料槽内饲料要少喂勤添，防止猪采食霉变饲料，补充足量的维生素、微量元素。减少猪群饲养密度，降低外界环境对猪群应激。哺乳母猪每餐在加料时按照水料比1∶3往料槽里放水，每餐吃完后再放水，提高饮水量。饮水器安装位置要高于背部10～15 cm，与地面成30～45°倾斜，水温15～20℃。猪舍控制适宜温度，一般怀孕舍16℃，待产舍20℃，分娩舍24℃，大环境温度不得超过26℃，哺乳仔猪小环境通过电热板或地暖、红外线灯及保温箱来控制，第1周约34～35℃，第2周约30～31℃，第3周约26～27℃。猪舍保持干燥，开展灭蚊、蝇、飞鸟等工作，猪舍禁止养犬。及时清理猪舍粪便，选用70℃以上热水冲洗。坚持自繁自养，全进全出的饲养模式，减少引种，需要引种时，至少隔离观察1个月，并检测，确定健康不带毒者方能混入大群饲养。加强后备母猪驯化，合格后，方混入大群饲养。消毒剂可选用3%火碱水、1%福尔马林、4%无水碳酸钠、季铵盐类消毒剂和0.2%～0.5%过氧乙酸消毒，用生石灰给猪舍消毒时，先在猪舍地面喷洒适量的水，然后把生石灰均匀地撒在猪圈每个角落上，与水反应生成氢氧化钙，对多种病原均具有杀灭作用，也可配成10%～20%的溶液对畜禽饲养场的地板或墙壁进行消毒。干粉消毒剂对发生PED的养猪场效果好[12]，即能消毒，又能保持猪舍干燥，并吸附氨气、硫化氢等有害气体，消毒无死角，减少环境中病原量，无毒，无害，可带猪消毒，每周至少消毒1次。猪舍门口设消毒池，外来人员车辆一律禁止进入厂区，进入厂区时车辆、人员消毒，换衣物，有条件的话最好淋浴。人流和车流分开，最好单向流动。由专业科研机构对后备母猪返饲驯化，返饲时一定要确保所用病料无CSFV、PRV、PCV2等其它病原，并且PEDV含量要足够。设卖猪台，并远离生产区。饲养人员禁止串舍，出入做好消毒。母猪上产床前一定要全身擦拭消毒，设初产母猪专用的产床，腹泻母猪坚决不允许其上产床。哺乳时母猪奶头挤掉少许初乳，用0.1%高锰酸钾或0.5%聚维酮碘擦拭消毒后，再让仔猪吃奶。初生仔猪吃饱初乳。

疫苗接种也是防控PED的重要措施，目前市场上有17个厂家生产的4种PED疫苗可供选择，PED灭活疫苗有猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗和猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗（WH-1株+AJ1102株）；可供选择的活疫苗有猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（HB08株+ZJ08株）和猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、轮状病毒（G5型）三联活疫苗（弱毒华毒株+弱毒CV777株+NX株）。2018年1月23号猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（WH-1R株+AJ1102-R株）取得生产批准文号，目前尚未有产品上市。2017年12月27号猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（SCJY-1株+SCSZ-1株）获得新兽药证书，还未取得生产批号。已经获得新兽药临床试验审批的有猪流行性腹泻灭活疫苗（XJ-DB2株），猪流行性腹泻灭活疫苗（KB-4clone13株），猪流行性腹泻灭活疫苗（CHYJ株），猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（HY株+HZ株），猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻耐热保护剂二联活疫苗（SCJY-1株+SCSZ-1株），猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（SD/L株+LW/L株）。灭活疫苗不能刺激机体产生黏膜免疫抗体，单独免疫效果不理想，当用病料返饲后或免疫弱毒活疫苗后，再免疫灭活疫苗效果较好。

猪场发病后，首先紧急接种疫苗，1周龄内仔猪可淘汰；1周龄以上仔猪，母猪紧急后海穴接种2头份灭活疫苗，并肌肉接种1头份灭活疫苗，仔猪后海穴接种2头份灭活疫苗，并口服1头份活疫苗。口服补液盐（氯化钠3.5 g、氯化钾1.5 g、碳酸氢钠2.5 g、葡萄糖20 g），加温水至1 000 mL，提供充足干净温水供猪饮用，加强保温。1周龄以上仔猪可提前断奶并找健康母猪寄养或用母猪初乳替代品饲养。饲养员不能踏上产床，对体况好的育成猪也可以采取饥饿治疗方法。病死猪焚烧或深埋处理，猪舍可用干粉消毒剂消毒，病猪用干粉消毒剂涂抹全身，并在母猪躺卧区和仔猪休息区投撒干粉消毒剂。饲养管理人员严禁串舍。病猪饲料中添加泰万菌素、氟苯尼考、黄芪多糖等，防止PED引起猪免疫抑制而导致病毒病或细菌病继发感染的发生。

猪场发生腹泻后原有的常规免疫程序无法执行，猪体质变弱，容易继发一些其它疾病，如猪蓝耳病、猪圆环病毒病、猪大肠杆菌病等。因此，猪场发生腹泻时要分清主要病原。笔者从鲁北地区的9个县采集249份病料样品，对病料中的PEDV进行扩增检测，结果显示，PEDV总平均阳性率为43.4%，以单一感染为主，且与TGEV、RV和PCV2存在不同程度的混合感染。PED全年可发病，寒冷的冬、春季节为高发期。由于条件所限并未对PEDV与PRRSV等其它病原的混感情况进行检测统计，下一步我们将进行全面统计和调查，以获得更多数据。国内科研工作者应加快新流行毒株的分离，筛选免疫原性好的毒株，研制疫苗。因目前所用PED疫苗均为二联苗或三联苗，流行病学调查结果猪病毒性腹泻主要是PED，TGE和轮状病毒病的发病率较低，故可研制PEDV单苗，以提高病毒含量，提高疫苗免疫效果，更好地预防PED的发生。

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