高危型HPV病毒载量与宫颈癌及癌前分型的相关性分析

谢 春，朱海东

(商丘医学高等专科学校，河南商丘 476000)

临床发现，人乳头瘤病毒(HPV)有诱发乳头状瘤转化为鳞状上皮细胞癌的倾向。文献报道，全球大约有80%的女性查出HPV阳性，其中大部分可以自限性的消除，少部分会持续性进展，最终只有1%左右进展成为子宫颈癌[1]。因此，检测出其中的危险人群，研究出一个有效的分流依据成为筛查的最终目的。高危型HPV(HR-HPV)主要是指感染HPV 16或HPV 18型病毒[2]。有研究报道感染HR-HPV病毒的载量与不同亚型可以造成不同的疾病转归[3]。因此本研究采用高灵敏度的检测技术HC-Ⅱ(PCR)检测HR-HPV DNA的载量及分型，分析病毒载量及分型宫颈病变的关系，希望能为宫颈癌的早期筛查提供一定参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2013年3月至2015年3月在本院妇科初诊筛查HPV病毒阴性的2 287例患者的临床资料，平均年龄(39.98±8.86)岁。纳入标准：(1)有性生活史可以接受妇科检查；(2)非妊娠期；(3)5年内未做过子宫颈癌检查，初诊筛查病毒载量小于1.0 rlu/co；(4)生理学上具有完整宫颈；(5)签订知情同意书。排除标准：初诊感染HPV病毒阳性载量大于或等于1.0 rlu/co,或有其他疾病不适合进行此项研究者。

1.2方法

1.2.1分组方法 采用HC-Ⅱ检查病毒HPV载量，以病毒载量大于或等于1.0 rlu/co为阳性，<1.0 rlu/co为阴性[4]。病毒阳性组中以感染HPV载量分为3组，低载量：1～<500,中载量：500～1 000,高载量：>1 000。采用导流杂交技术法检测病毒HPV的亚型，其中HPV 16 和HPV 18为高危型病毒亚型，其他亚型如31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73 和 82为非高危型病毒亚型，若存在HPV 16或HPV 18与其他亚型混合感染时则归入高危型组，反之无HPV 16或HPV 18则归入非高危型组。对所有研究病例采用以上两种检测方法，并进行阴道镜活检，阴道镜下未发现明显异常时，则分别行四个象限活检+颈管诊刮术同时送病理检查。取出的活检组织送病理科进行制片，并双人独立阅片，病理诊断的级别以CIN来命名，即分为病理阴性、宫颈上皮轻度非典型增生(CINⅠ)，宫颈上皮中度非典型增生(CINⅡ)，宫颈上皮重度非典型增生(CIN Ⅲ) 和宫颈癌。

病毒阳性组203例患者依据病毒载量分为3组，分别低载量组137例，中载量40例，高载量26例；依据病理结果宫颈活检，分为病理阴性组即慢性糜烂性宫颈炎76例，CINⅠ 45 例，CIN Ⅱ 37 例，CIN Ⅲ 32 例和子宫颈癌13例。

1.2.2随访 进行24个月的不做任何干预的随访，随访时对全部研究病例进行阴道镜检查。随访观察HPV病毒载量及分型与CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌的关系。

1.3统计学处理 采用SPSS19.0软件进行统计学分析,计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验；指标之间关系分析采用Pearson相关性分析； 采用多因素 Logistic 回归性分析检验危险因素，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1病毒载量与病理分级的关系 与病毒阴性组相比，病毒阳性组患者发生CIN Ⅲ或宫颈癌变的概率均较高，差异有统计学意义(P<0.05)；病毒阳性组患者感染HPV病毒的载量越高，CIN程度越高，两者呈正相关(r=0.743，P<0.05)，见表1。

表1 感染病毒载量与子宫颈病变程度关系[n(%)]

2.2宫颈癌及癌前病变风险因素分析 经Logistic回归分析结果显示：病毒载量越高发生CINⅢ及宫颈癌的危险系数随之升高，病毒低、中、高载量组发生CINⅢ及宫颈癌的危险系数是病毒阴性组的19.24倍、24.42倍和42.02倍(表2)。其中子宫颈病变典型病理分级的病理图见图1。

表2 感染HPV载量与子宫颈癌变的风险因素[n(%)]

A:CINⅠ；B：CINⅡ；C:CINⅢ;D:子宫颈癌

图1子宫颈病变典型病理分级

2.3病毒亚型与宫颈病变的关系 HPV 16和18与非HPV 16和18患者发生CIN Ⅲ或宫颈癌的危险系数分别是病毒阴性组的17.24(14.45～854.54)和3.42(2.45～272.45)。

3 讨 论

子宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤，原位癌高发年龄在30～35岁，浸润癌在45～55岁[5]。有研究表明，近年来宫颈癌发病渐趋年轻化[6]。近几十年，宫颈液基薄层细胞分析初步筛查的普遍应用，使宫颈癌及其癌前病变得以早发现、早治疗，从而降低了宫颈癌的发病率和病死率。

WHO 2013年发布的《子宫颈癌前病变筛查和管理指南》中建议在有条件采用HR-HPV检测的地域采用此方法进行子宫颈癌的初筛[6-7]。本研究采用的HC-Ⅱ与导流杂交技术法对HR-HPV载量以及分型进行检测，两者均有较高灵敏度与特异度，研究结果验证了通过HR-HPV检测来评价宫颈癌风险性是可靠的,初筛HR-HPV阳性后的分流可筛查出需要提前干预的风险人群，所以HR-HPV的载量检测在宫颈癌前病变与癌变筛查中具有重要意义。2015年ASCCP筛查指南指出，经过HPV初步筛查阳性后，分流出高危型亚型HPV 16或HPV 18，且随访这部分人群是否有HPV病毒的持续感染，是否只是一过性自限性的感染，以此分流出风险人群加以干预，可见HPV 感染的持续监测更为重要。有研究报道，在国内广大经济欠发达及卫生资源匮乏的地区，HPV病毒感染的持续监测不易实现，而卫生资源非常匮乏的地区HR-HPV阳性人群分流的方法也一直被关注[8]。本研究证明感染HR-HPV DNA高载量，即大于1 000 rlu/co可以作为预测HR-HPV持续感染与病情进展的危险因素。本研究通过经过初次基线筛查检测HR-HPV 载量与HR-HPV 病毒亚型，随访的结果显示，采用 HC-Ⅱ将HPV阳性患者的病毒载量分为低载量组、中载量组与高载量组，分析后发现病毒载量是预测CINⅢ与宫颈癌变发生风险的有效指标，同时发现分流出的HPV 16/18亚型具有同样的预测效果，与以往文献报道相一致[9]。朱雨等[10]在中国经济不发达地区进行的调查研究，也证实了病毒载量的阈值设定对CINⅢ及癌变的预测能力。已有大量的研究报道， HPV 16或HPV 18高载量持续感染是宫颈病变进展为宫颈癌的危险因素[11]。

综上所述，HPV检测HPV 16/18 分型与病毒载量大于或等于1 000 rlu/co可作为宫颈癌及癌前病变的高危因素，HR-HPV高病毒载量对CINⅢ与癌变有一定的预测价值，对于此类患者应尽早干预。

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[2]KREVOLIN M D,HARDY D,PANE J,et al.Development and validation of a preanalytic procedure for performing the cobas HPV test in SurePath preservative fluid[J].J Mol Diagn,2017,19(2):288-294.

[3] TAN L S,FREDRIK P,KER L,et al.High-risk HPV genotypes and P16INK4a expression in a cohort of head and neck squamous cell carcinoma patients in Singapore[J].Oncotarget,2016,7(52):86730-86739.

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[7]常小垒，郭科军，张颐，等．HPV亚型与子宫颈癌前病变及癌变的关系探讨[J]．中国医科大学学报，2014，43(8)：720-723,727．

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[10]朱雨，郭瑞霞，李留霞，等．宫颈锥切术后病理由CINⅢ升级为宫颈癌的相关预测因素分析[J]．现代妇产科进展，2017，26(1)：49-51．

[11]徐启英，郭桂兰．沙仁高娃.人子宫颈癌基因在子宫颈上皮内瘤变和子宫颈鳞癌中的表达及其与HPV16整合状态的关系[J]．中国妇产科临床杂志，2016，17(6)：505-507．