血清淀粉酶及脂肪酶参考区间适用性验证探讨

徐文波，张兴锋，叶丹，毛星星，丁怡文，冯磊

(玉溪市人民医院，昆明医科大学第六附属医院检验科，云南 玉溪 653100)

生物参考区间是实验室常用的解释检验报告、分析检验信息的基本尺度和依据，生物参考区间的确立是临床医学中的基本问题[1，2]。临床检验的对象是患者，适宜的参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后判断都有重要的意义[3，4]。建立适合本实验室的生物参考区间，为临床提供准确的诊断依据，对每个实验室来说尤为必要[5，6]。根据ISO15189：2003《医学实验室-质量和能力的专用要求》，实验室必须慎重建立自己的生物参考区间[7]。 血清淀粉酶（AMY）、脂肪酶（LPS）是急性胰腺炎的诊断及预后判断的常用指标。一直以来，国内实验室常采用试剂盒或教科书提供的参考区间，由于受地域，种族、饮食、实验室等因素的影响，导致该参考区间与实际参考区间有较大差异性，甚至影响医学决定水平[8，9]。基于上述情况，本文对AMY、LPS的参考区间进行验证，现报告如下。

1 资料与方法

1．1 研究对象 选取2015年10月-2016年2月来我院体检的汉族人群782例作为研究对象，其中男364例、女性356例。研究对象均符合NCCLS C28-A2健康参考个体的设置条件[10，11]：⑴没有任何影响检测结果的生理指征；⑵未服用药物或进行饮食治疗；⑶发育、精神正常，无心血管、肝、肾、肺等器质性疾病；⑷3个月内无输血和手术史；⑸妇女不在妊娠期或哺乳期；⑹无酗酒史。根据年龄将研究对象分组，16～44岁为青年组，45～59岁为中年组，≥60 岁为老年组[12，13]。

1．2 仪器及试剂 德国罗氏Cobas8000全自动生化分析仪及配套AMY、LPS试剂及校准品、质控品，AMY、LPS 试剂批号分别为 15806909、12961097，校准品批号为1607931，质控品批号为16603197。

1．3 血清样本采集 采用黄色分离胶-促凝剂生化真空采血管，采集外周静脉血3．5ml，室温静置20min后，3500r/min离心5min（无脂血、溶血标本）。

1．4 离群值剔除 离群值剔除采用DIXON方法[14]。首先将检测结果按照由大到小的顺序排序并计算极差(R)，然后分别计算最大值和最小值与其相邻数值之差（Dmax，Dmin），若 Dmax/R≥1/3 或 Dmin/R≥1/3，则将最大值或最小值视为离群值予以剔除；将余下数据重复前述步骤进行离群值检验，直至剔除所有离群值。

1．5 参考区间验证 按照NCCLS C28-A2要求，收集40份汉族健康个体标本，男、女各20份，检测AMY、LPS水平进行参考区间验证，若检测结果95%在现用参考区间以内，≤5%检测结果在现用参考区间以外，判定该参考区间适用[15，16]。

1．6 统计学方法 采用SPSS 17．0进行统计学处理，两组之间比较采用t检验，三组以上数据比较采用单因素方差分析、两两比较Lsd-t检验，P＜0．05具有统计学意义。

2 结果

2．1 汉族健康成人血清AMY、LPS生物参考区间DIXON方法去除离群值后，720份血清样本，AMY结果为18～107U/L，正态性检验显示偏度系数为-0．107、峰度系数为 0．091、均值为 62．5U/L、标准差为 21．0U/L，正态性检验 P＞0．05，符合正态分布，见图1。LPS结果为15-57U/L，经正态性检验，偏度系数为 0．316，峰度系数为-0．568，均值为 34．6U/L，标准差为 9．4U/L，正态性检验 P＜0．01，不符合正态分布，经对数转换P＞0．05，LPS符合正态分布。见图2。

图1 720例汉族健康成人血清AMY频数分布及正态曲线图

图2 720例汉族健康成人血清LPS频数分布及正态曲线图

2．2 不同性别之间血清AMY、LPS的比较 男性组、女性组之间血清AMY、LPS经t检验，t值（-2．705、-2．991）（P＞0．05） 差异无统计学意义， 见表1。

表1 不同性别之间血清AMY、LPS的比较（，U/L）

表1 不同性别之间血清AMY、LPS的比较（，U/L）

分组男性组女性组t样本量（例） 血清AMY 血清LPS 364 356 60．4±20．5 64．6±21．4-2．705 33．5±9．2 35．7±9．5-2．991

2．3 青年组、中年组、老年组不同年龄段之间血清AMY、LPS的比较 不同年龄段之间血清AMY、LPS 经方 差分 析 ，F=0．463、0．332，P=0．630、0．718，P＞0．05 差异无统计学意义），见表 2。

2．4 血清AMY、LPS参考区间确认 血清AMY结果 62．5U/L， 均值 21．0U/L， 生物参考区间是 21～104U/L。血清 LPS经对数转换 P＞0．05，符合正态分布，血清 LPS 结果 34．6U/L，均值 9．4U/L，生物参考区间是 16．2～53．0U/L。

表2 不同年龄段之间血清AMY、LPS的比较（，U/L）

表2 不同年龄段之间血清AMY、LPS的比较（，U/L）

分组青年组中年组老年组样本量（例） 血清AMY 血清LPS 258 226 236 62．1±20．8 62．2±20．7 63．9±21．9 34．4±9．4 34．7±9．2 35．0±9．5

2．5 参考区间验证 我室目前使用试剂盒提供参考区间，AMY参考区间28～100U/L，LPS参考区间5．6～51．3U/L。 选取 40 名健康参考个体，AMY 试剂盒提供参考区间符合率97．5%，我室参考区间验证符合率100%；LPS试剂盒考区间符合率97．5%、我室参考区间验证符合率100%，见表3。

表3 40名健康汉族AMY、LPS生物参考区间验证

3 讨论

本文对720例健康参考个体的AMY、LPS水平进行了统计学处理。经t检验男性组、女性组之间血清 AMY、LPS 经检验 t值（-2．705、-2．991）（P＞0．05）差异无统计学意义；不同年龄段之间血清AMY、LPS经方差分析，方差齐性检验各组间方差齐 （F=0．463、0．332，P=0．630、0．718）P＞0．05 差异无统计学意义。我室血清生物参考区间是21～104U/L。血清 LPS经对数转换 P＞0．05，符合正态分布，血清 LPS，生物参考区间是 16．2～53．0U/L。

3．2 通过对本地区40名健康参考个体AMY、LPS生物参考区间的验证，AMY、LPS试剂盒参考区间验证符合率97．5%，我室参考区间验证符合率100%，均符合≤5%检测结果在现用参考区间以外的规定要求，可以使用文献提供的生物参考区间。本地区为多民族聚居区域，彝族、傣族、哈尼族、回族等为本地区人口最多的少数民族，而彝族、傣族、哈尼族又有饮酒的习惯。在临床使用中，辅助诊断急腹症、急性胰腺等胰腺疾病时应考虑民族、地域等影响因素，结合临床体征、影像学资料、同时联合使用实验室检验指标。

3．3 本文的局限性是参考个体的选择，在很多情况下，尤其是老人，一般不可能获得完全健康的样本。因此，参考区间行业标准在本地区人群的适用性验证非常重要。

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