699株幽门螺杆菌对常用抗菌药物的耐药情况分析

刘 军

(四川省地矿局405医院重症监护室，四川 都江堰 611830)

幽门螺杆菌(helicobacterpylori，Hp)是一种消化系统疾病致病病，主要与慢性胃炎、消化系统溃疡有关，也与胃癌及一些胃肠外疾病有关[1]。研究结果显示，根除Hp治疗不仅能治疗胃炎、消化性溃疡等，降低疾病的复发率，还能有效预防胃癌和胃黏膜相关淋巴瘤的发生[2]。Hp的根除方案有很多，其中2种抗菌药物加质子泵抑制剂组成的三联疗法是目前最主要的治疗方法[3]。但是，随着抗菌药物的应用越来越广泛，Hp对其的耐药性也逐渐增强，导致近年来Hp根除率逐渐降低[4-5]。本研究以四川省地矿局405医院(以下简称“我院”)2013、2016年行胃镜检查患者的标本为研究对象，进行Hp培养，对培养分离出的Hp菌株进行药物敏感试验，探讨Hp对常用抗菌药物的耐药性，报告如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

资料来源于我院2013、2016年行胃镜检查的消化性溃疡患者，按照随机数字表法每年随机抽选1 000例，合计2 000例。其中，男性患者879例，女性患者1 121例；年龄35.46～67.82岁，平均(51.52±2.47)岁；均符合《内科学》中消化性溃疡的诊断标准，且签署知情协议书，自愿接受研究。

1.2 Hp分离培养

在无菌环境下取患者胃黏膜组织，于2 h内接种至培养基内(其中含有选择性抑制剂)，将所取组织反复涂抹于培养基的表面，尽可能使组织和培养基多接触，将组织接种好之后迅速放置于培养罐中，并将需氧产气袋放置其中，置于恒温箱内35 ℃下培养3～5 d后，观察所得菌株。

1.3 菌株鉴定

仔细挑选菌株：菌体弯曲细长呈海鸥形、S形或螺形；革兰染色呈阴性；菌体两端可有鞭毛，带鞘，多根，运动性较强。去除培养基后，打开观察菌株的形态，挑选革兰阴性及优势菌落进行过氧化氢、氧化酶或尿素酶试验，均为阳性则确定为Hp菌株，随后进行菌落转种，四区划分，继续培养1～2 d，获得单个菌落。

1.4 Hp药物敏感试验及判定标准

将菌株用无菌棉签蘸取出来后制作为悬液，将菌液水平校正到2个麦氏水平，使用无菌棉签将多余的菌液从管壁上挤出，连续3次种植到M-H琼脂表面，接种均匀，每次旋转60°，最后沿平板外圈涂抹一周，将平板干燥3～5 min，室温(25 ℃)条件，使用无菌镊子取E-test试纸条并将其贴在琼脂表面，将其与需氧气袋一同放置在培养罐中，密封，置于恒温箱内35 ℃下培养3～5 d后观察结果。根据每一药物抑菌圈直径作为依据进行判断：左氧氟沙星，<15 mm为耐药，15～19 mm为中介，>19 mm为敏感；克拉霉素，<14 mm为耐药，14～17 mm为中介，>17 mm为敏感；呋喃唑酮，<15 mm为耐药，15～16 mm为中介，>16 mm为敏感；庆大霉素，<14 mm为耐药，14～18 mm为中介，>18 mm为敏感；阿莫西林，<14 mm为耐药，14～16 mm为中介，>16 mm为敏感；甲硝唑，<21 mm为耐药，21～25 mm为中介，>25 mm为敏感[3，6-7]。

1.5 统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件处理数据，计数资料以百分比(%)表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Hp培养结果

2 000例患者的标本中，分离培养出Hp 699株，Hp阳性率为35.0%。其中，2013年Hp阳性率为33.6%(336/1 000)，2016年Hp阳性率为36.3%(363/1 000)。

2.2 2013、2016年Hp对单一抗菌药物的耐药率比较

Hp对左氧氟沙星、克拉霉素的耐药率呈上升趋势，分别从2013年的19.31%、24.32%升至2016年的32.05%、30.76%；Hp对庆大霉素、阿莫西林的耐药率相对较低且趋于稳定；Hp对呋喃唑酮的耐药率一直较低；Hp对甲硝唑的耐药率相对较高，且呈上升趋势，见表1。

表1 2013、2016年Hp对单一抗菌药物的耐药率比较[株(%)]Tab 1 Comparison of the resistance rate of HP to single antibiotics between 2013 and 2016[strains(%)]

2.3 2013、2016年Hp对抗菌药物二联应用的耐药率比较

对2013、2016年Hp对各种抗菌药物二联应用的耐药率比较的结果显示，Hp对于阿莫西林+庆大霉素、阿莫西林+呋喃唑酮和庆大霉素+呋喃唑酮3种二联用药方式的耐药率趋于稳定，差异均无统计学意义(P>0.05)；Hp对其他二联用药的耐药率呈上升趋势，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 2013、2016年Hp对抗菌药物二联应用的耐药率比较[株(%)]Tab 2 Comparison of the resistance rate of HP to two combined application of antibiotics between 2013 and 2016[strains(%)]

3 讨论

据统计，全球Hp感染率已>50%[8]，我国也是Hp感染高发国家，研究结果显示，Hp具有高度遗传性，再加上不同地区环境、经济和种族之间的差异，导致Hp对不同药物的耐药性也不同，所以治疗方案很难进行全国性的统一[9-10]。近年来，随着抗菌药物的应用越来越广泛，Hp的根除率逐渐下降，是治疗失败最主要的原因，因此，在治疗过程中药物的选择至关重要[11]。Hp培养是在无菌条件下从患者胃黏膜上取出标本并在适宜的环境下进行培养，所以不会产生假阳性结果。对Hp进行药物敏感试验，参考试验结果制订治疗方案，能够避免Hp耐药性的产生，提高治疗成功率[12]。但在整个培养过程中，各个环节比较复杂，条件要求比较严格，且耗时较长，费用较高，所以很难在临床上大范围推广。因此，应关注区域性Hp耐药情况，制订各区域合适的治疗方案[3]。

本研究随机抽选我院2013、2016年行胃镜检查的消化性溃疡患者2 000例，Hp阳性者699例，其中2013年Hp阳性率为33.6%(336/1 000)，2016年为36.3%(363/1 000)。表明随着人们生活的改善，在生活条件、饮食等方面较以前明显提高的情况下，HP感染率也不断升高，与此带来的各种胃相关疾病也不断增多。药物敏感试验结果显示，Hp对左氧氟

沙星、克拉霉素的耐药率呈上升趋势，分别从2013年的19.31%、24.32%升至2016年的32.05%、30.76%。最主要的原因是目前国内对左氧氟沙星和克拉霉素的长期、广泛应用，不仅在手术前后静脉滴注，医院外各药店同样有大量销售，这属于一种常态，久而久之导致细菌对上述2种药物的耐药性不断提高。研究结果显示，细菌对克拉霉素的耐药率>20%时，则不宜选用克拉霉素；而左氧氟沙星是该研究推荐的根治Hp的二线药物，使用时应首先考虑该地区Hp对其的耐药水平[13]。本研究中，Hp对庆大霉素、阿莫西林的耐药率相对较低且趋于稳定，Hp对呋喃唑酮的耐药率一直较低。主要是因为这3种药物都不是首选抗感染药，通常是在患者感染状况控制不佳并行细菌培养及药物敏感试验后选择的针对性药物，所以平时应用不多，因此，推荐使用这3种药物抗Hp感染。2013、2016年，Hp对甲硝唑的耐药率均相对较高，其原因可能是甲硝唑价格较低，近年来常被临床广泛应用，导致Hp对其耐药性逐渐提高，故不宜选用。对2013、2016年Hp对抗菌药物二联用药的耐药率进行比较的结果显示，Hp仅对阿莫西林+庆大霉素、阿莫西林+呋喃唑酮和庆大霉素+呋喃唑酮联合应用的耐药率趋于稳定，推荐使用[14]；Hp对其他二联用药的耐药率呈明显上升趋势，其原因可能与Hp外排的相关蛋白有关，多重耐药的产生为治疗带来较大麻烦，提示应避免滥用、乱用抗菌药物，尽可能先进行药物敏感试验，根据结果制订治疗方案。

综上所述，Hp对庆大霉素、阿莫西林的耐药率相对较低，对呋喃唑酮的耐药率一直较低，上述3药具有良好的抗Hp效果，推荐使用，同时应注意监测不良反应。

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