HPLC 法和UV 法测定呋喃唑酮片含量的比较

张琦惠

（云南省玉溪市食品药品检验所 云南 玉溪 653100）

1.仪器与试药

Agilent Cary60 紫外分光光度计，岛津LC-20AT 高效液相色谱仪（LC-20AT），液相色谱柱：Benetnach C18 4.6×150mm 5um；赛多利斯MSE224S-11CE-DU 电子天平；HUI 10260F 超声脱气机（天津市恒奥科技发展有限公司）；呋喃唑酮对照品(中国食品药品检定研究院，含量99.9%，批号为100466-201202)，呋喃唑酮片（山西云鹏制药有限公司，批号F170903，规格0.1g/片；赤峰蒙欣药业有限公司，批号1706118，规格0.1g/片；吉林省百年六福堂药业有限公司，批号20170414，规格10mg/片），磷酸二氢钾（分析纯），N，N-二甲基甲酰胺（分析纯），乙腈为色谱纯，水为纯化水。

2.方法和结果

2.1 UV 法

2.1.1 对照品溶液的制备

准确称取呋喃唑酮对照品20mg，置于250ml 容量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺40ml 溶解并用水稀释至刻度摇匀[1]。精密量取10ml 于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即制得8ug/ml 的呋喃唑酮对照品溶液。

2.1.2 样品的含量测定

取呋喃唑酮片10片，精密称定，研细。精密称取细粉适量（相当于呋喃唑酮20mg），置于250ml 量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺40ml 超声溶解，再加水稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，置于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。以纯化水作为空白，在367nm 波长处测定吸光度。再根据2.1.3项下方程计算样品含量。

2.2 HPLC 法

2.2.1 对照品溶液的制备

准确称取呋喃唑酮对照品10mg，置于50ml 容量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml 于100ml 容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，即制得10ug/ml 的呋喃唑酮对照品溶液。

2.2.2 样品的含量测定

取呋喃唑酮片20 片，精密称定，研细。精密称取细粉适量（约相当于呋喃唑酮50mg），置于50ml 容量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺超声溶解并稀释至刻度摇匀，滤过。精密量取续滤液1ml，置于100ml 容量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺稀释至刻度摇匀。制得每1ml 约含10ug 的呋喃唑酮供试品溶液。依次放入样品架中，进样20ul，记录峰面积。

2.3 精密度试验

取对照品溶液（浓度为10ug·ml-1）适量，按照上述色谱条件重复进样5 次，记录色谱峰面积，并计算RSD 值。RSD=0.4%，结果表明仪器精密度良好，满足测定要求，可以进行样品测定。

2.4 样品含量测定结果

分别按“2.1.3”和“2.2.3”项下规定，测定3 批样品含量，结果（见表1）。所测定含量的结果均符合《中国药典》2015 版应为标示量的90.0%～110.0%的规定，见表1。

表1 3 批呋喃唑酮片含量测定结果（n=3）

3.讨论

3.1 对两种测定方法的讨论

《中国药典》2015 年版采用紫外-可见分光光度法进行呋喃唑酮片的含量测定，因该方法准确度、精密度等不如高效液相色谱法，不能完全排除干扰物质的影响，通过本次实验的研究探索，验证了高效液相色谱法可用于测定呋喃唑酮片含量测定的可行性，且该法检测灵敏度高，是一个方便可行的方法。

3.2 溶剂的选择

呋喃唑酮片属硝基呋喃类抗生素，有药典指出硝基呋喃类是非水溶性的，用乙腈、甲醇、乙酸乙酯均可提取，而N，N-二甲基甲酰胺具有较强化学稳定。药典中也使用N，N-二甲基甲酰胺作为呋喃唑酮片的溶剂，因此选用N，N-二甲基甲酰胺作为两种方法测定呋喃唑酮片含量的最佳溶剂。

3.3 结论

UV 法和HPLC 法测定的三批呋喃唑酮片的含量结果均符合《中国药典》2015 版对其片剂的相关规定（含量为标示量的90.0%～110.0%），HPLC 法测定呋喃唑酮片的含量的RSD 值要比UV 法的RSD 值要小，HPLC 法测定呋喃唑酮片的精密度要优于UV 法，因此首选HPLC 法测定呋喃唑酮片含量，可实现较好的质量控制效果。