中性粒细胞体积分布宽度在溃疡性结肠炎中临床价值研究

屈 霄，李 凯，邱洪清

（张家港市第一人民医院消化科，江苏 苏州 215600）

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是炎症性肠病两大主要类型之一，该病特点是治疗时间长，容易反复。因此，准确评估患者疾病活动性是指导临床治疗的重要依据。血沉（erythrocyte sedimentation rate，ESR）和C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）常常作为炎症标志物用于判断和监测UC活动度[1]，但其血清水平与疾病活动度及病情严重程度往往存在不相符合。近年来，有研究发现活动期UC血清中中性粒细胞会发生形态学变化。本研究通过检测溃疡性结肠炎患者血清中中性粒细胞体积分布宽度（neutrophil volume distribution width，NVDW）值，探讨NVDW值对活动期UC的诊断价值，为UC的诊断和疾病活动评估提供新的理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 收集本院2015年3月～2016年12月所有诊断为溃疡性结肠炎的患者病例作为疾病组，共84例，其中男52例，女32例，年龄28～75岁。UC诊断标准参考《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见（2012年，广州）》[2]，排除标准：合并感染和（或）炎症性疾病患者。选取同期健康体检人群80例作为对照组，其中男20例，女20例，年龄24～70岁。两组患者临床资料比较差异无统计学意义。

1.2 疾病组活动度评分 采用Sutherland疾病活动指数(DAI)评估UC疾病活动度[3]，评估标准如下，①腹泻：正常，0分；1～2次/d，1分；3～4次/d，2分；超过5次/d，3分。②便血：无，0分；少量，1分；明显，2分；血便为主，3分。③肠黏膜：正常，0分；轻度易脆，1分；中度易脆，2分；重度易脆伴渗出，3分。④病情评估：正常，0分；轻，1分，中，2分；重，3分。其中0～2分为缓解，3～5分为轻度活动，6～10分为中度活动，11～12分为重度活动。其中缓解期26例，活动期58例，其中轻度14例、中度28例、重度16例。

1.3 方法 研究对象禁食8 h后，用EDTA抗凝真空管采集全及2 ml，运用LH750全自动血细胞分析仪及其配套试剂检测中性粒细胞平均体积（MNV）、中性粒细胞体积分布宽度（NVDW），用ELISA法检测血清C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP）水平，所有标本于4 h内完成。

1.4 统计学方法 运用SPSSP17.0进行统计学分析，计量资料以表示，采用单因素方差分析进行组间比较。采用ROC曲线计算曲线下面积、敏感性和特异性。

2 结果

2.1 两组MNV、NVDW及血清中CRP水平比较 疾病组MNV、NVDW及血清中CRP水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组MNV、NVDW、血清CRP比较（Table1 The comparison of MNV,NVDW and CRP between the two groups

表1 两组MNV、NVDW、血清CRP比较（Table1 The comparison of MNV,NVDW and CRP between the two groups

注：与正常组比较，aP＜0.05

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2.2 各期溃疡性结肠炎MNV、NVDW、CRP水平 疾病组活动期MNV、NVDW、CRP水平均高于缓解期（P＜0.05），并且其水平随溃疡性结肠炎患者病情严重程度增加而增高（P＜0.05），见表2。

表2 各期溃疡性结肠炎MNV、NVDW、CRP水平Table2 The level of MNV,NVDW and CRP in various stages of UC

表2 各期溃疡性结肠炎MNV、NVDW、CRP水平Table2 The level of MNV,NVDW and CRP in various stages of UC

注：与缓解期比较，bP＜0.05；与轻度比较，cP＜0.05；与中度比较，dP＜0.05

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2.3 MNV、NVDW、CRP血清水平诊断活动期UC的ROC曲线分析 ROC曲线下面积越大，表明其诊断效果越好。约登指数亦称正确指数，指灵敏度和特异度之和减去1，取最大的约登指数作为最佳的诊断切割点。三者对活动期UC的诊断性能指标见表3、图1。

表3 MNV、NVDW、CRP对活动期UC的诊断价值比较Table3 The diagnostic value of MNV,NVDW and CRP in active UC

图 1 MNV、NVDW、CRP的ROC曲线Figure1 ROC curves of MNV,NVDW and CRP

2.4 NVDW对UC轻、中、重度的最佳诊断阈值 为进一步对活动期UC进行病情分度，利用ROC曲线分析并得出MNV在轻、中、重度 UC的参考范围为 146.7～154.5、154.6～169.1、＞169.2，NVDW的参考范围，分别为 21.5～27.3、27.4～33.5、＞33.5。

3 讨论

溃疡性结肠炎主要发生于直结肠，病变局限于肠黏膜及黏膜下层，近年来，有研究认为其发病机制与基因易感性人群中体内肠道菌群和肠黏膜免疫应答平衡失调有关[4]。目前UC的主要治疗原则为维持和诱导缓解，且因为本病缺乏较为有效、快捷的检测指标，因此在临床治疗效果的判定方面亦较为麻烦。近年来有许多血清和粪便标志物应用于临床，如CRP、ESR、核周型抗中性粒细胞胞质抗体、髓过氧化物酶、IL-6等，但由于肠黏膜炎症的部位不同、疾病病程不同、服用的药物因素及是否合并肠道感染等均可能影响着这些指标的变化，以致于这些指标不能准确地预测疾病的发展状态[5]。因此，目前临床上急需简便易测可靠的生物学指标，用于溃疡性结肠炎的诊断和疾病预后的评估。

中性粒细胞在维持肠道稳态过程中发挥重要作用。它们通过清除透过肠黏膜上皮细胞的有害微生物，在肠腔与机体间形成一道至关重要的防御屏障。同时，当肠内发生炎症时，中性粒细胞能够募集大量的免疫细胞，并促进活性介质释放来缓解炎症，促进黏肠膜愈合。然后，中性粒细胞同样会促进一些促炎症因子、蛋白酶、过氧化物的释放，因此过度的中性粒细胞活化，最终会导致组织损伤[6-7]。有研究报道，UC患者外周循环中存在过度活化的中性粒细胞[8]。在炎症激活过程中，中性粒细胞除体积增大外，其不稳定性和外形也会发生变化[9]。McCarthy等[10]通过使用定量光学显微镜观察血细胞时发现，与正常人群和缓解期IBD患者比较，活动期IBD患者外周血中有大量极化的中性粒细胞。因此，在溃疡性结肠炎急性活动期，检测中性粒细胞体积或可以反映出肠内炎症水平，有助于评估病情和疾病诊断。

LH750全自动血细胞分析仪是一种特殊结构的流式细胞仪，其可以快速检测出全血中中性粒细胞的体积（Vole）、传导性（Conductivity）、光散射（Scatter）的参数，即VCS参数，并得出所有参数平均值如中性粒细胞平均体积（MNV），以及样本标准差值（Standard Deviation，SD值），也称中性粒细胞体积分布宽度（NVDW）。NVDW反映了中性粒细胞体积大小的差异性，其值增大说明患者中性粒细胞体积大小不均一程度增加。因此，MNV、NVDW值可以反映中性粒细胞核的形态变化和中性粒细胞反应性改变。有报道[9，11-12]，在细菌感染或败血症时，患者中性粒细胞形态学发生改变，而NVDW值变大反映了这一变化，推测NVDW对于炎症诊断具有一定价值。

通过本次研究我们发现，UC患者MNV、NVDW明显高于正常组，说明MNV、NVDW对UC诊断具有重要价值。同时MNV、NVDW水平随UC疾病活动度的增加而上升，提示MNV、NVDW水平可用于判断UC炎症的严重程度。此外，MNV、NVDW在UC活动期高于缓解期，推测其可以用于评估UC的治疗效果。

CRP长期作为活动期UC的辅助诊断、病情判断、疗效评估的重要指标，但其对诊断UC的特异性不强[13]。本研究中，通过ROC曲线可以看出，MNV、NVDW的曲线下面积和约登指数均明显高于CPR，表明MNV、NVDW在UC诊断中具有较高的敏感性、特异性和准确性，且其诊断价值明显高于CPR。虽然临床中CRP对UC活动性起到参考价值，其值越大，提示疾病活动性越大，但其没有具体的浓度范围用于评估轻、中、重度UC。本研究利用ROC曲线分析出轻、中、重度UC的MNV、NVDW范围，有助于为UC疾病病情评估起到一个参考作用。

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