ICAM-1和PCT与未足月胎膜早破并发绒毛膜羊膜炎的相关性研究

杜文渊，于晓霞，王小莎，刘庆，王晓玲

胎膜早破(PROM)是较为常见的产科并发症，其中未足月胎膜早破（p-PROM）的发生率约为2%～3.5%[1]。绒毛膜羊膜炎（CA）是PROM的重要并发症。目前临床上主要通过心率、白细胞计数、降钙素原（PCT）等来判断PROM孕妇有无感染，但普遍认为特异度低。有研究显示，细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在PROM发生过程中起着重要作用，是诊断PROM可靠的生物标志物[2]，但是否能够鉴别诊断p-PROM有无合并CA以及对CA的具体诊断效能，目前尚缺乏研究。为此，本研究分析了ICAM-1与p-PROM并发CA的关系及其对疾病的诊断效能。

1 对象与方法

1.1 研究对象选择2014年1月～2016年12月本院收治的48例单纯p-PROM患者（P组）、37例p-PROM并发CA患者（C组）及30例足月正常分娩的孕妇（对照组）为研究对象。p-PROM按《妇产科学》诊断[3]，p-PROM并发CA经病理组织学检查证实。P组年龄25～31（27.4±3.5）岁，孕龄29～35（32.7±4.1）w；C组年龄23～33（26.4±4.4）岁，孕龄28～36（33.4±3.8）w，其中p-PROM并发CA轻中度患者21例，p-PROM并发CA重度患者16例。对照组年龄25～31（28.4±5.0）岁，孕龄38～40（39.0±1.7）w。各组年龄、孕龄比较无显著差异(P＞0.05)。所有研究对象均为单胎妊娠，无其他妊娠并发症及内外科合并症。

1.2 标本采集P组和C组在入院确诊后、对照组在正常产检或待产时，抽取肘静脉血5 ml，离心分离血清冻存待检。胎膜娩出后，距破口2 cm处，剪取全层胎膜组织2 cm×1 cm，经生理盐水冲净血液和羊水后，甲醛溶液固定24 h，常规石蜡包埋、切片。

1.3 检测指标使用人降钙素原（PCT）ELISE试剂盒（上海江莱生物科技有限公司），采用ELISE法检测血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)和PCT水平。采用免疫组化SP法检测胎膜组织中ICAM-1的表达水平，具体方法是：常规脱蜡、水化，加入ICAM-1一抗（北京中杉金桥生物技术有限公司，工作浓度为1∶200），4℃过夜，PBS冲洗，加入二抗孵育20 min，最后行DAB显色、复染、脱水、封片等处理。光镜下见棕黄色颗粒，即可判断ICAM-1表达阳性；胎膜ICAM-1表达水平计算方法：在高倍镜下选取5个视野，ICAM-1构成比=阳性细胞数/绒毛膜细胞及羊膜细胞总数×100%。

1.4 统计学方法应用SPSS20.00统计软件分析数据，计量资料以x±s表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析；率的比较采用χ2检验。绘制血清PCT与ICAM-1的ROI曲线，计算曲线下面积、95%CI及Youden指数，计算敏感度与特异度，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清PCT和sICAM-1及胎膜ICAM-1水平比较P组血清PCT、sICAM-1及胎膜ICAM-1表达水平明显高于对照组（P＜0.05）；C组血清sICAM-1及胎膜ICAM-1表达水平明显高于P组（P＜0.05），血清PCT与P组比较无统计学差异（P＞0.05），见表1。

2.2 不同程度p-PROM并发CA患者血清PCT和sICAM-1及胎膜ICAM-1水平比较p-PROM并发CA重度患者组血清PCT、sICAM-1及胎膜ICAM-1的表达水平明显高于p-PROM并发CA轻中度组（P＜0.05，表2）。

2.3 血清PCT、sICAM-1水平对p-PROM并发CA患者组的诊断效能血清PCT的曲线下面积为0.638(95%CI0.611～0.872），当Youden指数最大值为0.577，截断点为70.36 pg/ml时，PCT对p-PROM并发CA的诊断敏感度、特异度分别为69.8%、55.4%。血清sICAM-1的曲线下面积为0.894(95%CI0.573～0.841），当Youden指数最大值为0.613，截断点为959.41 ng/ml时，sICAM-1对p-PROM并发CA的诊断敏感度、特异度分别为89.6%、79.1%。见图1。

表1 各组血清PCT和sICAM -1及胎膜ICAM-1水平比较

表2 不同程度p-PROM并发CA患者血清PCT和sICAM-1及胎膜ICAM-1水平比较

图1 血清PCT和ICAM-1的ROC曲线

3 讨论

目前认为，PROM的病因与感染、胎膜结构破坏、机械力学及免疫等因素有关，对于p-PROM并发CA的孕妇，无论孕龄长短，都应积极抗感染并及时终止妊娠，以提高早产儿的存活率。

研究证明，血清PCT在诊断细菌感染方面较传统的C反应蛋白（CRP）、白细胞计数（WBC）更胜一筹[4]。至于其在p-PROM合并感染中的应用，p-PROM孕妇血清PCT水平显著升高，是否存在CA对血清PCT水平的影响并不大，PCT对CA患者诊断的敏感度、特异度仅为60%、35%[3]。本研究结果与其接近，单纯p-PROM孕妇与合并CA的p-PROM孕妇血清PCT水平比较无统计学差异，尽管PCT能够反映CA的严重程度。ROC曲线中，以70.36 pg/ml为截断点，血清PCT诊断p-PROM并发CA患者的敏感度、特异度分别为69.8%、55.4%。可见，PCT诊断是否并发CA的最大问题便是特异度欠佳。

ICAM-1被认为是目前诊断PROM的可靠标志物，罗丹等[5]认为，血清sICAM-1诊断PROM的敏感性、特异性分别可高达100.0%、97.1%。但ICAM-1是否能够鉴别诊断p-PROM有无合并CA以及对CA的具体诊断效能，目前尚缺乏研究。本研究结果显示，p-PROM孕妇血清sICAM-1和胎膜ICAM-1水平明显高于正常孕妇，而合并CA的孕妇呈更高表达，且随病情严重程度而增加。ROC曲线分析，当截断点为959.41 ng/ml时，血清sICAM-1诊断p-PROM并发CA的敏感度、特异度可达到89.6%、79.1%，明显较血清PCT提高。

综上所述，ICAM-1与p-PROM并发CA有关，且血清sICAM-1对CA的诊断效能高于PCT。

[1]刘芳芳,李小英,黄莺.孕妇血中细胞粘附因子-1、白介素-6与胎膜早破的关系[J].现代生物医学进展,2010,10(17):3394-3397.

[2]彭静,张学勤,唐树荣.胎膜早破孕妇血清中细胞间黏附分子1及白细胞介素18的意义[J].当代医学,2015,21(2):16-17.

[3]谢幸，苟文丽.妇产科学[M].8版.北京：人民卫生出版社，2013：133-135.

[4]霍会蚕,程国梅,崔世红,等.降钙素原、新蝶呤与亚临床感染胎膜早破的相关性研究[J].现代妇产科进展,2011,20(3):190-192.

[5]罗丹,魏素梅,高岚,等.可溶性细胞间黏附分子-1快速检测方法在胎膜早破诊断中的价值[J].实用妇产科杂志,2015,31(3):232-234.