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黄芩黄酮的研究进展

2018-02-13雷春龙邱时秀吴永胜

畜牧与饲料科学 2018年5期
关键词:仔鸡黄酮类黄芩

李 娟 ,张 龙 ,刘 继 ,雷春龙 ,邱时秀 ,吴永胜

(1.成都市农林科学院畜牧研究所,四川 成都 611130;2.西华师范大学生态研究院,四川 南充 637009;3.成都市农林科学院农产品研究所,四川 成都 611130)

黄芩为唇形科(Labiatae)黄芩属(Scutellaria)多年生草本植物,是一种常用的中草药,以干燥根入药,具有抗菌、抗病毒、清热燥湿、泻火解毒的功效。低剂量的黄芩具有兴奋平滑肌的作用[1]。黄酮类化合物作为黄芩中主要的药用活性成分,在抗氧化、抗肿瘤和抑制HIV等方面具有重要的药用价值[2]。黄芩中所含的黄酮类物质主要为黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素等。黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化等多种生理活性。

1 黄芩黄酮的主要成分

周锡钦等[3]从黄芩中分离获得6种主要黄酮类化合物,包括黄芩苷、千层纸素A苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A。周锡钦等[4]对从黄芩中分离鉴定的9个黄酮类化合物的生物学活性进行了研究,9种化合物分别为黄芩素、汉黄芩素、千层纸素 A、5,7,2′,6′-四羟基黄酮、粘毛黄芩素Ⅲ、黄芩苷、汉黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、白杨素-6-C-α-L-阿拉伯吡喃糖-8-C-β-D-葡萄吡喃糖苷,在前7种化合物中,有邻三羟基的黄芩素抗菌活性最强,且具有良好的量效关系,有邻三取代和多羟基的黄酮具有抑制白细胞介素-1β转化酶的活性。

2 黄芩黄酮的提取工艺和测定方法

2.1 提取工艺

张琴[5]利用离子液体微波辅助法,将溴化1-辛基-3-甲基咪唑盐水溶液作为提取溶剂,微波功率为400 W,提取温度80℃,提取时间90 s,固液比1∶6,提取1次;与药典方法相比,4种主要黄酮类物质的提取时间从3 h大幅度缩短到90 s,与70%乙醇和水相比,溴化1-辛基-3-甲基咪唑盐溶液对黄芩苷具有更好的溶解度,为一种高速、低耗的新方法。研究表明,溴化1-辛基-3-甲基咪唑盐溶液对黄芩药材中存在的黄芩苷水解酶的活性具有抑制作用。

王欣[6]探讨了水提取(WRE)、单一乙醇回流提取(ERE)、氧化石墨烯—水提取(GWRE)、纤维素酶—乙醇协同提取(CERE)、氧化石墨烯—乙醇协同提取(GERE)对黄芩总黄酮提取效果的影响,结果表明,CERE以及GERE为较好的提取方法。

2.2 测定方法

彭易兰等[7]采用HPLC法测定黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A的含量,色谱条件为:使用Agilent 1200型高效液相色谱仪,Eclipse XDB-C18(4.6×250 mm,5 μm)色谱柱,甲醇—0.2%磷酸水溶液(50∶50)为流动相,柱温 35 ℃,流速 1 mL/min,检测波长为275 nm,在该条件下,黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A的线性范围分别为3.501~70.016 μg/mL (r=0.9999)、0.832 ~16.640 μg/mL (r=0.9998)、0.418~8.352 μg/mL(r=0.9999),平均加样回收率 (n=6)分别为 99.55%、98.86%、9.997%,RSD分别为1.74%、1.74%、1.70%。同时,采用UV法测定总黄酮含量,黄芩素线性范围为1.71~8.54 μg/mL (r=0.9991), 平均加样回收率 (n=6)为100.93%,RSD为2.63%;黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A和总黄酮的含量分别为48.22%~60.36%、12.09%~14.46%、5.05%~8.81%、78.11%~90.12%。

3 黄芩黄酮含量的影响因素

3.1 产区

不同产区的黄芩质量差异很大。周锡钦等[3]研究表明,传统道地和传统非道地黄芩药材中黄酮含量差异不显著,但现在道地与非道地、传统道地与现在道地黄芩药材之间黄芩苷、千层纸素A苷含量以及6种黄酮类化合物含量之和差异显著。

3.2 生长年限和时间

周锡钦等[3]研究发现,生长年限对药材质量影响不显著,但一、二年生药材中的黄酮含量稍高;春季采收的黄芩黄酮含量比秋季采收高;野生与栽培药材中除汉黄芩苷和千层纸素A外,其他黄酮类化合物的含量没有显著性差异。与药材比较,商品饮片中黄酮苷的含量较低,而黄酮苷元的含量则较高。段重阳[8]研究发现,黄芩各部位总黄酮的累积在不同生长时期存在差异,在根中总黄酮含量为9月>7月>5月,茎中总黄酮含量为5月>7月>9月,叶中总黄酮含量为7月>5月>9月。肖苏萍等[9]研究发现,采收时间对黄芩花中黄酮化学成分有一定的影响,其中,总黄酮、野黄芩苷和芹菜素在7月底、8月初均出现了峰值,黄芩苷和黄芩素含量在整个采集期内含量均比较稳定。

3.3 分布部位

段重阳[8]研究表明,黄芩根、茎、叶各部位总黄酮含量分布存在差异,黄酮类化合物含量总体表现出叶>根>茎的趋势;CHI、CHS基因表达量与黄酮类化合物的累积成正相关;F3H基因表达量与黄酮类化合物的累积成负相关。

3.4 干燥方法

肖苏萍等[9]研究认为,不同干燥方法对黄芩花中不同黄酮类成分的影响存在一定差异,其中,微波干燥法利于保留总黄酮、野黄芩苷和黄芩苷,真空干燥法利于保留黄芩素,阴干法利于保留芹菜素。

4 黄芩黄酮对动物机体影响的研究进展

蔡健等[10]研究表明,黄芩总黄酮对博莱霉素所致大鼠肺纤维化具有一定的治疗作用,其机制可能与抑制炎症细胞的浸润活化及调控TGF-β1/Smad信号通路有关。梁英等[11]研究表明,日粮中添加适量黄芩黄酮在一定程度上可以促进肉仔鸡生长,改善其肠道微生态菌群,且黄芩黄酮添加组的脾脏指数、胸腺指数、血清IgG含量显著高于对照组,进而表明其具有促进免疫器官的发育和提高免疫功能的作用,其中添加10 mg/kg黄芩黄酮效果较好。此外,5 mg/kg黄芩黄酮添加组肉仔鸡的平均日采食量较对照组显著提高[12]。

任成财[13]研究发现,添加黄芩黄酮后肉仔鸡血清钙含量显著提高。雷燕妮[14]研究表明,黄芩总黄酮能显著降低高血脂大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯、脂蛋白、载脂蛋白B及低密度脂蛋白胆固醇的含量,显著提高高密度脂蛋白胆固醇及载脂蛋白A的浓度。

5 展望

黄酮类化合物具有广泛的药理活性。除了传统意义上的抗炎等生物活性之外,近年来对其抗氧化和抗肿瘤功效的研究也日趋深入。为了生产无公害、绿色的畜禽产品,应对黄芩中的黄酮类化合物在饲料添加剂方面的应用进行研究,推动中草药添加剂的研究与开发。

[1]丁晓曦.不同处理黄芩对家兔离体小肠张力的影响[J].畜牧与饲料科学,2010,31(8):5-7.

[2]梁英,韩鲁佳.黄芩中黄酮类化合物药理学作用研究进展[J].中国农业大学学报,2003,8(6):9-14.

[3]周锡钦,张庆英,梁鸿,等.黄芩中主要黄酮类成分的含量分析 [J]. 中国中药杂志,2009,34 (22):2910-2915.

[4]周锡钦,梁鸿,路新华,等.中药黄芩主要黄酮类成分及其生物活性研究 [J].北京大学学报 (医学版),2009,41(5):578-584.

[5]张琴.离子液体提取黄芩中黄酮类物质研究 [D].太原:山西大学,2015.

[6]王欣.黄芩黄酮的提取及机理研究[D].合肥:合肥工业大学,2015.

[7]彭易兰,刘云华,黄志芳,等.UV和HPLC法测定黄芩黄酮总苷元提取物中总黄酮和3种主要成分的含量[J].天然产物研究与开发,2015,27(7):1210-1214.

[8]段重阳.基于转录组测序的黄芩黄酮类化合物合成关键基因的发掘及表达分析[D].西安:陕西师范大学,2016.

[9]肖苏萍,何春年,曾燕,等.干燥方法与采收期对黄芩花中黄酮类化学成分的影响 [J].中国现代中药,2013,15(11):975-980.

[10]蔡健,顾振纶,蒋小岗,等.黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究 [J].中草药,2012,43(1):119-124.

[11]梁英,任成财,金迪,等.黄芩黄酮对肉仔鸡生长性能和肠道菌群的影响 [J].中兽医医药杂志,2012,31(4):39-42.

[12]梁英,任成财,姜宁,等.黄芩黄酮对肉仔鸡生长性能和免疫功能的影响[J].动物营养学报,2011,23(8):1409-1414.

[13]任成财.黄芩黄酮对肉仔鸡生长性能、免疫指标和肠道微生物菌群的影响[D].大庆:黑龙江八一农垦大学,2010.

[14]雷燕妮.黄芩总黄酮对高血脂大鼠的降血脂作用研究[J].动物医学进展,2014,35(7):64-68.

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