汉中不同规格延胡索质量评价△

王晓婷，王亚恒，王芳，王昌利，王小平，白吉庆*

(1.陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046；2.陕西省中药原料质量监测技术服务中心，陕西 咸阳 712046)

汉中不同规格延胡索质量评价△

王晓婷1，2，王亚恒1，王芳1，王昌利1，2，王小平1，白吉庆1，2*

(1.陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046；2.陕西省中药原料质量监测技术服务中心，陕西 咸阳 712046)

目的考察不同种植年限延胡索、一年生大、小规格的延胡索其质量差异。方法采用高效液相色谱法HPLC，迪马C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；以甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH 至6.0)=67∶33，流速为1.0 mL·min-1，柱温：30 ℃；检测波长：280 nm，测定每份样品中延胡索乙素含量并进行比较分析。结果不同年限延胡索的含量比较，以一年生小子折干率为最高、延胡索乙素含量最高为1.776 9 mg·g-1，而母子折干率为是最低、延胡索乙素含量亦最低为1.537 4 mg·g-1。结论不同生长年限和一年生大小不同延胡索药材规格其质量具有差异。

延胡索；延胡索乙素；高效液相色谱法；含量测定

延胡索又名元胡、玄胡、玄胡索，为罂粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥块茎[1]，是常用中药材之一。其含有多种生物碱，具有活血化瘀、理气止痛的功能，对于治疗脘腹疼痛、胸痹心痛、跌打损伤、经闭痛经、产后瘀阻、血瘀痛经有奇效[2]。延胡索中生物碱主要有延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索丙素、原阿片碱、四氢紫堇萨明等[3-5]，大多以生物碱盐结合态形式存在[6]。据记载，延胡索已具有长久的栽培历史[7]。陕西省汉中市属于温暖湿润的亚热带气候，冬无严寒，特别适合在冬春季种植生长期较短的元胡[7]。汉中部分丘陵地区具有种植延胡索的传统[8-9]。延胡索地下块茎由上年母块茎的更新芽形成，在新块茎成长过程中母块茎逐渐于瘪，由此形成的新块茎个大，皮色老。由地下茎芦膨大而长成的新块茎则个较小，皮色新，俗称子元胡。延胡索产新获得新鲜药材后汉中城固县药农通常将其分为，母子(第一年作为繁殖块茎，两年生，俗称母元胡)、中子(优选为下一年种子)、小子(加工成药材使用)三种规格，其均经杀青、干燥后作为药材使用，这样延胡索药材存在多产地鲜品规格和不同加工方法获得产品，其质量差异性也较大，因此本文结合研究确定以煮后、烘干的延胡索为研究对象对其质量进行评价，为建立延胡索药材商品规格等级提供实验依据。

根据现行的商品规格标准划分为为一等和二等两种规格，对于延胡索药材采收没有具体详细的规定，对其块茎有不同生长年份的，本文对于延胡索药材在不同生长年限(主要为一年生和两年生)用HPLC法测定其延胡索乙素含量来认识延胡索药材。本实验采用高效液相法对汉中产延胡索中止痛活性成分延胡索乙素进行含量测定，以此考察不同种植年限的延胡索乙素含量的影响，为药材生产的改进、筛选和制定药材及饮片的质量标准等提供科学依据，并明确各中药材采收年限，合理引导中药材生产，保证药材质量。

1 仪器与试药

1.1 仪器

101-2型电热鼓风干燥箱(北京科伟永兴仪器设备有限公司)，赛多利斯XSE105DU单量程电子分析天平(赛多利斯股份有限公司)，戴安Uiti Mate 3000全自动高效液相色谱仪(二极管阵列检测器)。

1.2 试药

延胡索采自陕西汉中，药材经陕西中医药大学白吉庆副教授鉴定为罂粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang ex Z.Y.Su et C.Y.Wu的块茎。延胡索采收时间于2016年5月下旬，从新鲜的延胡索中挑出中间有肚脐的(根痕迹)扁平的延胡索，即两年生元胡索(母子)，其余去除杂质、过筛，分成大、小二档。延胡索的规格分类：两年生块茎(母子)、当年生块茎大子、小子。分别装入箩筐内擦去外表皮。按照延胡索产地加工，洗净泥土，漂去老皮和杂质，晾干表面水分，按照延胡索：水=1∶4水煮，煮至药材内无白心，取出，控干水分60 ℃烘干得到三种规格的样品。

延胡索乙素对照品(批号110728-201617，中国食品药品检定研究院)；甲醇为色谱纯；浓氨为分析纯；水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：迪马C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；以甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH 至6.0)=67∶33；流速为1.0 mL·min-1；柱温30 ℃；检测波长280 nm。理论塔板数按延胡索乙素峰计算应不低于3 000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取延胡索乙素对照品1.22 mg加甲醇制成0.048 7 mg·mL-1的溶液。

2.3 供试品溶液的制备[1]

取本品粉末(过三号筛)约0.5 g，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入浓氨试液一甲醇(1∶20)混合溶液50 mL，称定重量，冷浸1 h后加热回流1 h，放冷，再称定重量，用浓氨试液甲醇(1∶20)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25 mL，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性关系考察

分别精密吸取浓度为0.048 7 mg·mL-1的对照品溶液1、2、4、6、8、10 μL，按2.1项色谱条件进样，测定峰面积。以延胡索乙素的质量为横坐标(X)，以峰面积为纵坐标(Y)绘制标准曲线，回归方程为Y=10.989X-0.040 1，r=0.999 9，延胡索乙素在0.048 7～0.487 μg范围内与峰面积线性关系良好。

2.5 精密度

精密吸取浓度为0.048 7 mg·mL-1的对照品溶液6 μL，按2.1项色谱条件连续进样6次，测得延胡索乙素峰面积RSD=1.53%，表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性

取2.3项制备的同一规格供试品溶液，按2.1项色谱条件，于0、2、4、6、8、10 h分别进样1 μL，测得延胡索乙素峰面积RSD=2.97%，表明供试品中延胡索乙素在10 h内稳定。

2.7 重复性

取延胡索样品6份，每份约0.5 g，按2.3项方法制备供试品溶液，测定峰面积，结果含量分别为1.388 3、1.364 3、1.3726、1.3967、1.4279、1.372 8 mg·g-1，平均含量1.387 1 mg·g-1，RSD=1.67%，表明样品测定符合技术要求，重复性良好。

2.8 回收率

取已知含量的样品(延胡索)6份，每份约0.25 g，置入具塞锥形瓶，分别精密加入延胡索乙素对照品溶液(0.174 45 mg·mL-1)2 mL，按2.3项制得供试品溶液，按2.1项色谱条件测定延胡索乙素含量，计算加样回收率，延胡索乙素平均回收率99.23%，RSD=1.74%，表明加样回收率符合要求。结果见表1。

表1 加样回收试验测定结果

2.9 样品测定

按上述条件测定不同采收期的延胡索药材中延胡索乙素的含量，分别取延胡索药材约0.5 g，精密称定，按2.3项方法操作，制备供试品溶液，用0.45 μm微孔滤膜滤过后，按2.1项色谱条件进样，记录峰面积，计算各规格样品中延胡索乙素含量，并比较不同采收期的延胡索药材的折干率结果见表1和表2。色谱图见图1。

表2 不同规格延胡索中延胡索乙素的含量

图1 标准品和延胡索样品的HPLC图

综合结果表明延胡索子(小)与延胡索子(大)、延胡索(母子)含量之间分别具有明显的显著性差异，延胡索子(小)在相同条件下含量最大。

2.10延胡索药材

2.10.1 根据延胡索形状大小，将新鲜的药材分为两年生块茎(母子)、当年生大、小三类，随机在三类抽取20个药材，精密量取其长、宽，求得平均值为理论直径。

表3 不同延胡索中延胡索的长宽高(n=20)

统计分析表明延胡索母子、延胡索大、延胡索小三者的理论直径相互具有之间均具有显著性差异(P<0.05)。

2.10.2 折干率[10]

两年、大、小三种规格干品质量/鲜质量×100=折干率，结果见表4。

表4 不同延胡索的折干率对比

3 讨论

3.1延胡索乙素是延胡索的主要活性成分之一，也作为药典质量控制指标成分，本实验采用HPLC法测定延胡索乙素的含量，对考查不同规格延胡索质量具有重要参考价值。

3.2本实验测定汉中不同年限的延胡索，延胡索乙素含量均符合国家规定的不低于0.040%的标准，测量结果表明三种规格延胡索在相同加工条件下，延胡索一年生小子的延胡索乙素含量最高，母子则最低，证明了3种延胡索的延胡索乙素含量存在差异，说明不同生长年限对延胡索乙素含量有重要影响。

3.3通过水煮后在60℃烘干下获得样品，其规格折干率依次为延胡索(小)>延胡索(大)>延胡索(母子)，其表明小子含水分较少，母子含水分较多。

3.4本实验对汉中不同的延胡索进行初步的外观大小的数据测量，表明母子直径大小为18.71～15.33 mm，大子为15.66～13.86mm，小子为11.14～9.98mm。

不同生长年限和一年生大小不同延胡索药材规格及其质量具有差异。建议在延胡索产地加工时对鲜药材应进行挑选分类后进行加工，形成不同规格延胡索药材商品规格等级类型。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2015：139-140.

[2] 李玉山.延胡索乙素的制备工艺及药理作用研究发展[J].解放军药学学报，2013，29(5)：480-483.

[3] 吕子明，孙武兴，段绪红，杨志云等.延胡索化学成分的研究[J].中国中药杂志，2012，37(2)：235-237.

[4] 龙全江，徐雪琴，王晓阁.延胡索化学成分、药理作用与产地加工技术研究概况[N].甘肃中医学院学报，2014，31(5).

[5] 朱蓉，常琪，李钟，等.陕西产延胡索类中药的化学研究[J].西北药学杂志，1987，2(4)：19-21.

[6] 沈志冲.元胡不同炮制方法对延胡索乙素含量的影响[J].现代预防医学，2011，38(21)：4454-4458.

[7] 李时珍.本草纲目.校点本上册[M].北京：人民卫生出版社.1982.803.

[8] 李世全.延胡索生产-路在何方-来自汉中产区的调查[J].中国现代中药，2008，10(3)：47-48.

[9] 张艳.汉中市元胡高产栽培技术[J].中国农技推广，2015，31(9)：31-32.

[10] 赵忠堂，袁燕东，王学军，李光胜.半夏不同收获期的折干率与产量的探讨[J].基层中药杂志，2000，14(2)：46-47.

QualityEvaluationofCorydalisTuberinDifferentSpecificationsinHanzhong

WANGXiaoting1，2，WANGYaheng1，WANGFang1，WANGChangli1，2，WANGXiaoping1，BAIJiqing1，2*

(1.ShaanxiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Xianyang712046，China；2.ShaanxiProvinceTraditionalChineseMedicineRawMaterialQualityMonitoringTechnologyServiceCenter，Xianyang712046，China)

Objective：To investigate the quality difference of Corydalis tuber planting years and its annual large and small size of corydalis.MethodsTetrahydropalmatine in each sample was determined by HPLC with Dima C18 column(250 mm×4.6 mm，5 μm)，mobile phase of methanol -0.1% phosphoric acid solution(triethylamine adjusted to pH 6)=67∶33，the flow rate of 1 mL·min-1，column temperature of 30 ℃ and detection wavelength of 280 nm.ResultsComparison of the content of Corydalis tuber in different years，the drying rate was the highest in the annual small tubers and tetrahydropalmatine content reached to 1.776 9 mg·g-1，while the drying rate was the lowest for biennial tubers，and tetrahydropalmatine was 1.537 4 mg·g-1.ConclusionThere are differences in the quality of different Corydalis tuber with different growth years and annual sizes.

Corydalis Rhizoma；tetrahydropalmatine；HPLC；determination of content

2015年中医药部门公共卫生服务补助资金项目(国中医药发规财﹝2015﹞21号)

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白吉庆，副教授，研究方向：中药资源开发与利用；Tel：(029)38184367，E-mail：baijiqing323@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.11.017

2017-06-09)