小剂量美罗华联合冰冻血浆对利奈唑胺所致血小板减少症患者血清细胞因子水平的影响

李文静，王志伟，孙永利，赵田华，王文晋

·临床医学·

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小剂量美罗华联合冰冻血浆对利奈唑胺所致血小板减少症患者血清细胞因子水平的影响

李文静，王志伟，孙永利，赵田华，王文晋

目的探讨小剂量美罗华联合冰冻血浆治疗利奈唑胺所致血小板减少症，观察其对血清白细胞介素(IL)-33、肿瘤坏死因子(TNF)-α及干扰素(IFN)-γ水平的影响。方法选取我院就诊的104例利奈唑胺所致血小板减少症患者为研究对象，研究组给予小剂量美罗华联合冰冻血浆治疗，对照组给予小剂量美罗华治疗，并选择同期入我院进行体检的健康者52例为健康组，分别检测2组患者治疗前后和健康组血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平。结果治疗前2组患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平明显高于健康组(P<0.05)，2组患者间上述血清水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平均明显下降，且研究组血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.05)。结论小剂量美罗华联合冰冻血浆治疗利奈唑腔所致血小板减少症，能显著性降低患者血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平。

美罗华；冰冻血浆；利奈唑胺；血小板减少症

利奈唑胺是目前用于肺炎治疗的常见药物，也是作为恶唑烷酮类抗生素首次被应用于临床的药物[1]。利奈唑胺能抑制细菌蛋白质的合成，进而起到抑菌作用。但其在临床应用于肺炎治疗时常会产生较多的不良反应，如血红蛋白降低、肝功能异常、血小板减少等，其中血小板减少症是最常见和最严重的不良反应[2]。血小板减少症常导致患者外周血血小板减少，皮肤、黏膜出血性疾病，骨髓细胞成熟障碍等，目前治疗方法主要有大剂量的注射丙种球蛋白、肾上腺糖皮质激素、血浆置换、美罗华、脾切除等[3]。本研究对我院收治的利奈唑胺所致血小板减少症患者分别采用小剂量美罗华联合冰冻血浆治疗和小剂量美罗华治疗，观察患者治疗前后血清白细胞介素(IL)-33、肿瘤坏死因子(TNF)-α及干扰素(IFN)-γ水平变化情况。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年3月至2014年12月期间我院就诊的104例利奈唑胺所致血小板减少患者为研究对象。纳入标准：所有患者均接受利奈唑胺治疗，后出现血小板减少症。排除标准：(1)利奈唑胺、美罗华等药物过敏；(2)近期接受过抗血小板减少治疗；(3)其他免疫系统疾病，如原发性血小板减少症、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)等[4]；(4)肝肾功能严重障碍；(5)其他影响血清炎症指标的疾病，如：肝炎、肠炎、心肌炎等。按照患者的治疗意愿分为研究组和对照组，每组各52例。研究组男性4例，女性48例；年龄21～67岁，平均(31.9±9.5)岁；病程为3个月到15年，平均(3.2±1.5)年；其中初次治疗的有17例，反复接受过激素等治疗的有35例。对照组男性5例，女性47例；年龄21～66岁，平均 (31.8±9.4)岁；病程为2个月到15年，平均(3.1±1.4)年；其中初次治疗的有18例，反复接受过激素等治疗的有34例。并选择同期于我院体检的健康者52例为健康组，男性5例，女性47例，年龄22～66岁，平均(32.0±9.4)岁。所有治疗均经患者知情同意和医院伦理委员会批准。3组研究对象在性别、年龄等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 对照组采用小剂量美罗华治疗 在采用美罗华治疗前30 min，给予20 mg苯海拉明肌肉注射，以预防过敏反应。然后分别在第1、8、15、22天将100 mg美罗华(上海罗氏制药有限公司，批准文号：S20120002)用0.9%生理盐水稀释为1 mg/ml的浓度，混匀后静脉注射，刚开始的注射速度为50 mg/h，若患者无明显的不良反应，可增加注射速度至100 mg/h，400 mg/h为最大注射速度，1次/周，共进行4次治疗。治疗过程中采用心电监护监测患者生命体征变化。

1.2.2 研究组采用小剂量美罗华联合冰冻血浆治疗 研究组患者先输注200 ml的冰冻血浆后再给予美罗华治疗，美罗华使用方法与对照组相同。

1.3 检测方法

分别抽取患者治疗前后和健康组入院检查时清晨空腹静脉血5 ml，静置30 min后采用低温离心机3 000×g离心20 min，取其上清液检测IL-33、TNF-α及IFN-γ水平。血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平均采用酶联免疫吸附法进行检测，检测试剂分别为上海信裕生物科技有限公司提供的人IL-33检测试剂盒、上海基免实业有限公司提供的TNF-α检测试剂盒、上海万疆生物科技有限公司提供的人IFN-γ检测试剂盒。以上3种血清学指标的检测，均严格按照厂家提供的说明书操作，由我院检验科专业人员进行操作。

1.4 统计学处理

采用SPSS 20.0统计学软件对本次研究收集的数据资料进行统计学分析。本次研究计量资料采用均数±标准差(x±s)形式进行数据描述，组间比较采用t检验；计数资料采用百分数形式进行数据描述，组间比较采用卡方检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组、对照组患者治疗前与健康组血清水平比较

治疗前2组患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平明显高于健康组，差异有统计学意义(P<0.05)；2组患者间上述血清水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 研究组、对照组患者治疗前与健康组血清各因子水平比较(x±s，每组n=52)

注：与健康组比较aP<0.05。IL为白细胞介素，TNF为肿瘤坏死因子，IFN为干扰素

2.2 研究组与对照组患者治疗前后血清水平比较

治疗后，2组患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平较治疗前均降低，且研究组患者血清水平明显低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 研究组与对照组患者治疗前后血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平比较(x±s，每组n=52)

注：与同组治疗前比较aP<0.05，与对照组比较bP<0.05。 IL为白细胞介素，TNF为肿瘤坏死因子，IFN为干扰素

3 讨论

自利奈唑胺应用于临床，其不良反应的相关报道逐渐增多，尤其在治疗肺炎患者后，易产生免疫性血小板减少症[5]。利妥昔抗体又名美罗华，在临床研究和应用中发现其能清除B淋巴细胞，并且其杀伤淋巴的效应与其表面的CD20抗原呈正相关。美罗华的作用机制为：直接与成熟B细胞或前B细胞膜上的CD20抗原结合，进而杀死B淋巴细胞[6]。美罗华可通过抗体依赖细胞毒诱导、补体依赖细胞毒以及破坏CD20细胞的凋亡，清除体内B淋巴细胞，从而减少体内自身抗体的生成和血小板自身的破坏。有研究指出静脉注射小剂量的美罗华(治疗4周)对血小板减少症患者具有较好的治疗作用，其治疗的有效率约为60%，并可延缓行脾切除术的时间[7]。美罗华在治疗的过程中，补体的数量是补体依赖细胞毒性治疗机制的关键因素，冰冻血浆含有较多补体，正好弥补其补体不足，从而协助提高美罗华的治疗效果。与此同时，冰冻血浆中还含有一定数量的免疫球蛋白(如IgG等)，能抑制血小板抗体的产生，能将血小板包被其中，能减少巨噬细胞、中性粒细胞等破坏血小板[8]。

IL-33是近年来发现的IL-1家族成员之一，是一类炎症因子，在自身免疫性疾病中具有重要作用，其能参与炎症反应，具有免疫调节功能，还能活化平滑肌细胞、上皮细胞、抗原提呈细胞等。IL-33能刺激Th2细胞分泌IL-4等增强抗体接到免疫应答的因袭，研究发现血清中IL-33的水平表达与血小板的数量呈负相关，其与患者的治疗密切相关，这一结果与IL-33增加免疫应答密切相关。临床研究还发现IL-33在体内的高水平与类风湿关节炎、SLE等亦相关[9]，所以本次研究中需要排除该类患者。血清TNF-α由单核巨噬细胞分泌，是目前最强的炎症反应的启动因子，其水平在免疫性血小板减少症中显著增高，其增高主要是由于细菌的感染刺激炎症反应而引起的。IFN-γ由Th1细胞因子分泌，在体内主要介导细胞免疫反应。当体内Th1细胞逐渐增多，会导致Th1/Th2比例失调，诱发巨噬细胞的激活、细胞毒性增强，导致血小板进一步的破坏[10]。

本研究结果表明，采用小剂量的美罗华联合冰冻血浆治疗利奈唑胺所致血小板减少症，有效降低血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平，减轻炎性反应，对患者具有较好的疗效，值得临床推广。

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(本文编辑：莫琳芳)

EffectsofsmalldoseofrituximabcombinedwithfrozenplasmaonserumcytokinelevelinthetreatmentofthrombocytopeniainducedbyLinezolid

LiWenjing,WangZhiwei,SunYongli,ZhaoTianhua,WangWenjin

(DepartmentofHemotolog,BethumeInternationalPeaceHospital,CPLA,Shijiazhuang050082,China)

ObjectiveTo explore the effects of small dose of rituximab combined with frozen plasma on thrombocytopenia induced by Linezolid, as well as on serum levels of IL-33, TNF-αand IFN-γ.MethodsOne hundred and four patients with thrombocytopenia who sought medical care in the hospital were recruited as research objects, and another 52 normal examinees who had physical examination at the hospital at the same period were chosen as the healthy group. The patients in the study group were given small dose of rituximab combined with frozen plasma, while the patients in the control group

just small dose of rituximab. The levels of serum IL-33, TNF-αand IFN-γin in the 2 patient groups were respectively detected both before and after treatment, and those levels in the healthy group were measured as well.ResultsBefore treatment, the serum IL-33, TNF-αand IFN-γlevels of the 2 patient groups were significantly higher than those of the healthy group (P<0.05), and no statistical differences could be seen in the serum levels of the 2 patient groups (P>0.05). After treatment, the serum IL-33, TNF-αand IFN-γlevels of the 2 patient groups were all obviously decreased, and the serum IL-33, TNF-αand IFN-γlevels of the study group were significantly lower than those of the control group (P<0.05).ConclusionSmall dose of rituximab combined with frozen plasma in the treatment of thrombocytopenia could significantly reduce the serum levels of IL-33, TNF-αand IFN-γ, and the effects of the combined treatment with rituximab and frozen plasma were obviously superior to those with single treatment of rituximab.

Rituximab; Frozen plasma; Linezolid; Trombocytopenia

R558.2

A

10.3969/j.issn.1009-0754.2017.05.019

050082 河北 石家庄，解放军白求恩国际和平医院血液科(李文静、王志伟、赵田华、王文晋)；解放军第二五二医院呼吸科(孙永利)

2016-04-02)