复方斑蝥胶囊对膀胱癌术后化疗患者免疫功能的影响分析

宋文辉，马洪顺，杨世强，马庆彤 （天津市第一中心医院泌尿外科，天津300192）

复方斑蝥胶囊对膀胱癌术后化疗患者免疫功能的影响分析

宋文辉，马洪顺，杨世强，马庆彤 （天津市第一中心医院泌尿外科，天津300192）

目的：探讨中成药制剂复方斑蝥胶囊对肌层浸润性膀胱癌（BC）术后化疗患者细胞免疫功能的影响.方法：选取经手术及病理证实的浸润性尿路上皮癌患者60例，随机分为甲组（n＝30）和乙组（n＝30）.甲组采用例根治性全膀胱切除术，术后2周行GC方案化疗，在化疗后开始口服复方斑蝥胶囊辅助治疗；乙组采用根治性全膀胱切除术，术后2周行GC辅助化疗，口服安慰剂.另设正常健康人（n＝30，丙组作为对照）.在术前2天、化疗前2天、化疗后21天采用流式细胞仪检查外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK细胞水平和CD4＋/CD8＋的比值.结果：与健康组相比，甲组、乙组术前的CD3＋细胞以及NK细胞的水平均降低.与手术前相比，化疗前2天甲、乙组的CD3＋、CD8＋、NK细胞的水平低于术前2天水平（P＜0.05）.化疗后21天，甲组CD3＋、CD4＋、CD8＋以及NK细胞的水平显著提高（P＜0.05）；乙组NK细胞和CD4＋/CD8＋的水平无显著提高（P＞0.05）.甲乙两组比较，化疗前2天，除NK细胞水平外，两组差异无统计学意义（P＞0.05）；化疗后21天，甲组血CD3＋、CD4＋、CD8＋以及NK细胞水平明显高于乙组，差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论：膀胱癌患者治疗过程中存在免疫功能紊乱，中药复方斑蝥胶囊能提高膀胱癌患者术后免疫功能，尤其是化疗后的T细胞免疫功能，可以更好的辅助患者完成化疗.

膀胱癌；细胞免疫功能；复方斑蝥胶囊

0 引言

现代研究［1］显示，肌层浸润性膀胱癌（bladder cancer，BC）预后不佳，患者生存率低.当前BC治疗方案仍以手术结合化疗为主，笔者依据长期临床治疗经验体会，手术造成的创伤可引起BC患者免疫力下降，而BC的复发、进展、转移又与患者免疫功能状态密切相关.BC患者以老年人居多，随着身体功能的衰弱，自身免疫功能明显下降，当患者遭受手术创伤时，身体免疫功能损伤更加明显.复方斑蝥胶囊具有攻毒蚀疮、破血消淤、抗癌等功效，针对BC术后化疗患者，骨髓抑制的副作用发生率低，而且有升白细胞功效［2－5］.笔者回顾性研究了BC患者细胞免疫功能在全膀胱切除术前、术后、化疗前后的变化，以及复方斑蝥胶囊对以T细胞为代表的免疫功能的影响和作用价值，现报道如下.

1 资料和方法

1.1 一般资料经过医院伦理委员会批准，并取得患者书面同意，选取2014－04/2016－06天津市第一中心医院收治的60例经手术及病理证实的肌层浸润性尿路上皮癌患者，所有入组患者均排除其他免疫系统疾病且3个月内未进行免疫干预治疗，随机分为2组，实验组甲组（n＝30）采用根治性全膀胱切除术，术后2周行GC方案化疗，化疗后开始口服复方斑蝥胶囊辅助治疗；乙组（n＝30）采用根治术，术后2周行GC辅助化疗，口服安慰剂.另设正常健康人（n＝30，丙组）.

1.2 方法两组患者均采用根治性膀胱全切术，手术标本病理检查证实切缘未见癌细胞，保证切缘无癌残留，术后常规护理，保证电解质平衡，监控血氧，预防感染、保护肝功，预防消化道出血等.甲组化疗时服用复方斑蝥胶囊（贵州益佰制药股份有限公司，国药准字：Z52020238），3粒/次，2次/d，服用1个月；乙组患者术后常规护理，服用等剂量安慰剂.

1.3 仪器试剂血液样本采用美国BD公司的四色MultiTEST IMK Kit淋巴细胞亚群检测试剂盒进行处理，采用美国BD公司的FACSCalibur流式细胞仪进行分析；操作由专人严格按照说明书进行。

1.4 检测指标甲、乙组均于术前2 d、术后化疗前2 d、化疗后21 d采集血液样本，健康受试组抽血检测T细胞亚群，监测血液中CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK细胞占比水平，并比较CD4＋/CD8＋的值.1.5 统计学处理采用SPSS19.0统计学软件进行数据分析，计量资料用±s表示，组间行独立样本t检验，组内化疗前后对比采用配对样本t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义.

2 结果

2.1 甲、乙组与丙组T细胞免疫功能的比较与丙组相比，甲、乙组患者术前CD3＋、NK细胞水平均明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；CD4＋、CD8＋T细胞水平微弱降低，CD4＋/CD8＋水平升高，但差异无统计学意义（P＞0.05，表1）.

表1 甲、乙组与丙组T细胞免疫功能的比较（n＝30， ±s）

表1 甲、乙组与丙组T细胞免疫功能的比较（n＝30， ±s）

aP＜0.05 vs丙组.

组别CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋NK细胞（%）甲组56.73±7.94a32.63±7.1823.47±8.911.36±0.7115.73±6.98a乙组55.41±8.27a31.45±6.8523.95±9.171.34±0.7516.34±8.13a丙组65.3±10.4137.21±6.9527.84±7.951.33±0.6824.93±8.71

2.2 BC患者各时间段T细胞免疫功能变化比较膀胱切除术后化疗前2 d甲乙两组患者CD3＋、CD8＋、NK细胞水平均明显低于术前（P＜0.05），化疗前2 d检测，甲组患者NK细胞水平明显高于乙组（P＜0.05）.化疗后21 d，组内比较，甲组CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK细胞水平，乙组NK细胞高于术前（P＜0.05）；乙组患者CD4＋/CD8＋细胞水平无显著提高（P＞0.05）.组间比较，甲组患者CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK细胞水平高于乙组（P＜0.05，表2）.

表2 BC患者各时间段T细胞免疫功能变化比较（n＝30，±s）

表2 BC患者各时间段T细胞免疫功能变化比较（n＝30，±s）

aP＜0.05 vs本组术前；cP＜0.05 vs乙组化疗前；eP＜0.05 vs乙组化疗后.

组别CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋NK细胞（%）甲组术前56.73±7.9432.63±7.1823.47±8.911.36±0.7115.73±6.98化疗前50.34±9.15a28.71±6.4719.71±5.51a1.55±0.8711.32±6.45ac化疗后64.2±10.18ae36.45±6.91ae27.31±7.48ae1.27±0.8123.31±7.91ae乙组术前55.41±8.2731.45±6.8523.95±9.171.34±0.7516.34±8.13化疗前51.21±8.96a27.93±6.3118.45±5.17a1.58±0.9310.37±4.97a化疗后50.19±7.8326.68±5.4717.73±4.871.35±0.7220.15±7.41

3 讨论

在机体肿瘤治愈过程中，由T细胞介导的细胞免疫起着主导作用.按照T细胞表面分化抗原（CD）的不同，可分为CD4＋辅助T细胞、CD8＋效应T细胞两大亚群.两大亚群在机体自身抗肿瘤免疫调节中都发挥着重要的作用.因为CD3＋是T细胞的表面标记，本研究中，选择标记CD3＋的淋巴细胞代表T细胞［6］.CD4＋通过释放细胞因子激活NK细胞、单核细胞、巨噬细胞，介导杀伤溶解肿瘤细胞.CD8＋T细胞亚群分为抑制性CD8＋CD28－T细胞Ts和杀伤性CD8＋CD28＋T细胞Tc.Tc亚群可以通过多种细胞因子和酶产生溶解细胞作用，直接特异性杀伤肿瘤细胞.而Ts亚群具有免疫抑制作用，对免疫应答有重要的负调节功能［7－9］.恶性BC患者多处于免疫抑制状态，免疫功能下降导致T淋巴细胞亚群紊乱，CD3＋、CD4＋细胞明显减少的同时CD8＋细胞相对增多、CD4＋/CD8＋值降低［10］.T细胞亚群在外周血中比较稳定，通过对T淋巴细胞的检测可以了解受试机体免疫状态，辅助疾病的诊断治疗，帮助临床医生探索疾病的发病机理，病情进展程度，指导提示合理的治疗方案.本研究结果显示，BC患者发现问题时一般已处于后期，其术前CD3＋、NK细胞水平明显低于健康组，表明BC患者存在细胞免疫功能的紊乱，表现为免疫抑制.化疗前2 d，甲组患者的NK细胞水平明显高于乙组；化疗后21 d，甲组患者CD3＋、CD4＋、CD8＋以及NK细胞水平明显高于乙组.

复方斑蝥胶囊主要成分为斑蝥素，具有破血祛淤、攻毒蚀疮等功效，用于各种原发性癌症等.动物研究证实，斑蝥、半枝莲等均有良好的抗肿瘤作用.而且复方制剂中还有人参、黄茂、刺五加等补益类中药，具有良好的补益功效，能提高患者自身免疫力.有研究［3，11－13］表明，复方斑蝥胶囊可逆转H22肝癌小鼠细胞免疫功能受抑制的状况，提升小鼠免疫力，达到抗肿瘤的疗效.依据多年临床使用经验，BC患者应用复方斑蝥胶囊无骨髓抑制作用，且有很好的升白功能，与临床相关报道［14］一致.有学者［15－17］指出，复方斑蝥胶囊可抑制HepG2215细胞中的HBV⁃DNA复制，诱导肝癌细胞的凋亡；并通过提高免疫功能移植肝癌细胞的成长，明显延长小鼠的中位生存时间.该中药的有效成分主要是斑蝥素，是否对BC的肿瘤细胞也具有同样的凋亡作用，还需要临床更多的实验性研究应用进行证实.

本研究认为复方斑蝥胶囊可以增强老年人自身免疫力，尤其针对老年BC患者，对患者手术后、化疗后的T细胞为代表的免疫功能有显著的提升作用，有利于遏制潜在BC肿瘤细胞的转移和发展，改善患者的预后，帮助BC患者提高对于手术和化疗的适应能力，故值得临床大力推广.

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Analysis of influence of Compound Banmao capsule on immune function of patients with bladder cancer undergoing chemotherapy after surgery

SONG Wen-Hui，MA Hong-Shun，YANG Shi-Qiang，MA Qing-Tong
Department of Urology，First Central Hospital of Tianjin，Tianjin 300192，China

AIM：To investigate the influence of Compound Banmao capsule on immune function of patients with bladder cancer undergoing chemotherapy after surgery.METHODS：A total of 60 patients with muscular invasive urothelial carcinoma confirmed by surgery and pathology were randomly divided into group A and group B，with 30 cases in each group.Patients in group A was given radical cystectomy，then accepted GC chemo⁃therapy two weeks after surgery，and they were administered with Compound Banmao capsule orally at the beginning of the chemo⁃therapy as adjuvant therapy.Patients in group B was given radical cystectomy，then accepted GC chemotherapy two weeks after surgery，and they were administered with placebo orally.In addition，30 cases of normal healthy people were set as control group（group C）.The levels of CD3＋，CD4＋，CD8＋T cells，NK cells and CD4＋/CD8＋radio were examined by blood flow cytometry 2 days before surgery，2 days before chemotherapy and 21 days after chemotherapy.RESULTS：The levels of CD3＋and NK cells before surgery in group A and group B were lower than those of group C，with statistically significant differences（P＜0.05）.The levels of CD3＋，CD8＋and NK cells in group A and group B 2 days before chemotherapy were lower than those 2 days before surgery，with statistically significant differences（P＜0.05）.The levels of CD3＋，CD4＋，CD8＋and NK cells in group A were significantly improved 21 days after chemotherapy，with statistically significant differences（P＜0.05）.There were no significant increase in the levels of NK cells and CD4＋/CD8＋radio in group B（P＞0.05）.Besides of NK cells，there were no statistically significant differ⁃ences on levels of other cells 2 days before chemotherapy between group A and group B（P＞0.05）.The levels of CD3＋，CD4＋，CD8＋，NK cells in group A 21 days after chemotherapy were significantly higher than those of group B，with statistically signifi⁃cant differences（P＜0.05）.CONCLUSION：There were immune dysfunction in patients with bladder cancer in the course of treat⁃ment.Compound Banmao capsules can improve postoperative T cell immune function of patients with bladder cancer，especially after chemotherapy.

bladder cancer；cellular immune；Compound Ban⁃mao capsule

R737.14

A

2017－01－16；接受日期：2017－02－02

天津市中医药管理局课题（13121）

宋文辉.硕士，副主任医师.研究方向：泌尿肿瘤及临床转化.Tel：022⁃23626850 E⁃mail：15822661308＠163.com

2095⁃6894（2017）10⁃40⁃03