颊针疗法在类风湿关节炎家兔模型镇痛效应中的特点研究

蒲瑞生，方晓丽，颉旺军，刘丁龙，权 可，苏成红，杨晨光，张延菊

1.730000甘肃省兰州市，甘肃中医药大学针灸推拿学院 2.741000甘肃省天水市，天水瑞生堂连锁国医馆

·论著·

·中医·中西医结合研究·

*通信作者：方晓丽，教授，博士生导师；E-mail：fangxlzyxy@163.com

颊针疗法在类风湿关节炎家兔模型镇痛效应中的特点研究

蒲瑞生1，2，方晓丽1*，颉旺军1，刘丁龙1，权 可1，苏成红1，杨晨光1，张延菊1

1.730000甘肃省兰州市，甘肃中医药大学针灸推拿学院 2.741000甘肃省天水市，天水瑞生堂连锁国医馆

目的观察颊针疗法在类风湿关节炎兔模型镇痛效应中的特点，为颊针临床留针时间、疗程的制定提供理论依据。方法2014年1—9月将筛选合格的40只清洁级大耳白兔随机分成正常组、模型组、体针组、颊针组，每组10只。模型组、体针组、颊针组制备类风湿关节炎兔模型，正常组不予处理。实验第27天开始正常组和模型组均予以体针组、颊针组相同方法固定30 min；体针组选双侧后肢膝眼和足三里针刺，留针30 min，1次/d；颊针组选颊针膝穴针刺，留针20 min，1次/d；4组均连续治疗10次，分别在治疗第1、4、7、10次针刺时测定针刺0、5、15、30、60、120、240 min各时间点痛阈值。结果第1、4、7、10次针刺方法和时间在痛阈值上存在交互作用(P<0.05)，时间在痛阈值上主效应显著(P<0.05)，针刺方法在痛阈值上主效应不显著(P>0.05)。正常组和模型组的痛阈值无时间效应(P>0.05)，体针组和颊针组的痛阈值有时间效应(P<0.01)。颊针组时间在痛阈值上主效应显著(F=15.473，P<0.001)，颊针组时间与针刺次数在痛阈值上不存在交互作用(F=0.973，P=0.486)。颊针组第1次针刺时镇痛效应量效曲线与第7次针刺时比较，差异有统计学意义(t=-3.227,P=0.012)；颊针组第7次针刺时镇痛效应量效曲线与第10次针刺时比较，差异无统计学意义(t=0.463,P=0.656)。结论颊针疗法的镇痛效应具有明显的时间变化曲线，且具有起效快、上升快、下降亦快的特点。

关节炎，类风湿；针灸疗法；镇痛；剂量效应关系,针灸；颊针疗法

颊针疗法是通过在面颊部的特定穴位上针刺来治病的一种方法，其以生物全息理论为指导，是一种全新的全息针灸疗法，经过二十余年的临床实践、穴位解剖的研究，颊针临床诊疗体系已日趋完善，颊针疗法具有取穴简单、操作简便、止痛效果迅速、不易复发、安全、主治范围广等优点[1]。但相关的理论研究尚处于探索阶段，其镇痛效应的特点及作用机制尚不清楚，还需进一步的研究，以为临床应用提供科学的理论依据。本研究拟以颊针疗法镇痛效应为切入点，采用卵蛋白诱导的类风湿关节炎兔模型，通过颊针与体针针刺不同时间点、不同治疗次数的痛阈值比较，明确颊针疗法镇痛效应的时效、量效特点，为颊针疗法临床治疗疼痛提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 2014 年 1—9 月选取健康2月龄清洁级大耳白兔40只(兰州陆军总医院动物实验中心提供，合格证号：0021062)，雌雄各半，体质量2.0～2.5 kg。实验前适应性喂养7 d，实验室温度25 ℃，湿度50%～55%。

1.2 实验药品试剂及仪器 弗氏完全佐剂(CFA)：Sigma公司，批号：CAS9007-81-2；卵蛋白干粉：Sigma公司，批号：SLBF-0342V；PL-200热刺痛仪：成都泰盟软件有限公司；针灸针：苏州医疗用品厂有限公司，产品规格：0.25×25 mm；JA1003N 精密电子天平：济南普纳仪器设备有限公司；L-550 离心机：长沙恒宇实验仪器设备有限公司。

1.3 动物分组 适应性喂养7 d后用热痛阈测定法进行痛阈筛选，痛阈值低于3 s或高于10 s表示痛觉反应过敏和迟钝，则淘汰不用。将筛选合格的白兔40只用Excel 2003软件随机分为正常组、模型组、体针组、颊针组，每组10只。

1.4 类风湿关节炎兔模型制备 参考相关文献[2-7]方法将卵蛋白干粉按4 mg/ml的浓度与等量CFA混匀，充分震荡搅拌约15 min，两者成胶状液体即可，然后用电推剪剪去兔背部和双膝关节的毛，在模型组、体针组、颊针组白兔的背部肩胛骨之间对称选择3对共6个注射点，每个注射点皮下注射卵蛋白CFA混悬液0.2 ml，14 d后以相同剂量在6个点再次进行皮下注射，1周左右后，在兔双膝关节内分别注入卵蛋白干粉与0.9%氯化钠溶液的混合液0.4 ml，浓度为20 mg/ml。1周后白兔进食量减少，活动减少，双侧膝关节肿胀，造模前后痛阈值比较有统计学差异为造模成功。正常组于相应部位、相应时间注射等量0.9%氯化钠溶液。

本文创新点：

通过比较颊针与体针在同一次针刺时不同时间点痛阈值及不同治疗次数的痛阈值，阐明颊针镇痛效应的时间效应曲线、量效累加特点，为颊针临床上留针时间、治疗频次、疗程长短及疗程间隔的制定提供理论依据，对临床有一定指导意义。但其进一步的神经生理学及神经化学机制尚需进一步研究。

1.5 穴位选取 颊针组取颊针膝穴，取穴方法：髋与承浆穴连线中点处[1](见图1)。体针组选取临床治疗关节炎的常用穴位膝眼：胫骨内外侧1 cm；足三里：小腿背外侧上1/5折点处，约为腓骨小头下1.2 cm，胫骨后1 cm处[8]。

图1 膝穴定位图

1.6 针刺方法 正常组：于实验第27天开始，每天予以体针组、颊针组相同方法固定30 min。模型组：于实验第27天开始，每天予以体针组、颊针组相同方法固定 30 min。体针组：于实验第27天开始，选双侧后肢膝眼和足三里，用1寸30号毫针，直刺0.3～0.5寸，采用捻转针法，每隔5 min行针1次，15 s/次，频率100次/min，留针30 min，1次/d。颊针组：于实验第27天开始，选颊针膝穴治疗，用0.5寸30号毫针斜刺0.2～0.3寸,采用捻转针法，每隔5 min行针1次，15 s/次，频率100次/min，留针20 min，1次/d。

1.7 镇痛效应量效观察 PL-200热刺痛仪采用高聚光灯产生可变强度的辐射光束，经过红外滤光镜聚焦照射兔耳部测痛点，以免出现缩耳挣扎动作作为疼痛反应指标，自照射开始至兔出现反应的潜伏期时间(s)作为该兔的痛阈值。连测3次，取其平均值作为痛阈值。连续治疗10次，分别在治疗第1、4、7、10次针刺时测定针刺0、5、15、30、60、120、240 min各时间点痛阈值。

2 结果

2.1 造模成功与否判定 正常组造模前后痛阈值比较，差异无统计学意义(P>0.05)；模型组、体针组、颊针组造模后痛阈值低于造模前，差异有统计学意义(P<0.05，见表1)。

2.2 各组家兔第1、4、7、10次针刺不同时间点痛阈值比较 第1、4、7、10次针刺方法和时间在痛阈值上存在交互作用(P<0.05)，时间在痛阈值上主效应显著(P<0.05)，针刺方法在痛阈值上主效应不显著(P>0.05)。正常组和模型组的痛阈值无时间效应(P>0.05)，体针组和颊针组的痛阈值有时间效应(P<0.01，见表2～5)。

2.3 颊针组镇痛效应时效曲线 颊针组4次测量到的痛阈值随时间变化的趋势大致相同：5 min时痛阈值显示明显上升，30 min时达峰值，60 min时明显下降，240 min时降到最低值(见图2)。颊针组时间在痛阈值上主效应显著(F=15.473，P<0.001)，颊针组时间与针刺次数在痛阈值上不存在交互作用(F=0.973，P=0.486)。

2.4 颊针组镇痛效应量效曲线比较 颊针组第1次针刺时镇痛效应量效曲线与第7次针刺时比较，差异有统计学意义(t=-3.227,P=0.012)；颊针组第7次针刺时镇痛效应量效曲线与第10次针刺时比较，差异无统计学意义(t=0.463,P=0.656，见图3)。

表1 造模成功与否判定

图2 颊针组第1、4、7、10次针刺镇痛效应时效曲线

Figure2 Time-effect relation of buccal needle acupuncture based on the 1th,4th,7th,10th treatments

图3 颊针组第1、4、7、10次针刺镇痛效应量效曲线

Figure3 Quantity-effect relation of buccal needle acupuncture based on the 1th,4th,7th,10th treatments

表2 各组第1次针刺不同时间点痛阈值比较

表3 各组第4次针刺不同时间点痛阈值比较

表4 各组第7次针刺不同时间点痛阈值比较

表5 各组第10次针刺不同时间点痛阈值比较

3 讨论

颊针疗法是针灸学中微针诊疗系统的一个新分支,是人体在面颊及周围的全息投影系统，其是指在面颊部的特定穴位上针刺来治病的方法。是由王永洲医师及方晓丽教授及其科研团队以生物全息理论为指导，在实践中总结的一种新的微针系统[9]。“颊针理论”由颊针穴位图谱、颊针基本穴位、颊针取穴的五大原则、针法及适应证共同组成。

研究表明，颊针疗法治疗疼痛性疾病的疗效显著，颊针较体针镇痛效果迅速，且具有全身调节作用,通过730多例不同种族的肢体疼痛及内脏疼痛患者的临床观察与验证，颊针的即时止痛有效率达72.5%,充分体现了针灸镇痛起效快的特点,且其具有取穴方便、效果迅速、适应证广泛等优点[9]。有研究应用颊针疗法治疗颈肩综合征患者45例，总有效率达93.3%[10]。任超展等[11]应用颊针结合运动疗法治疗急性腰扭伤，总有效率达94.6%。刘强等[12]应用颊针结合运动疗法治疗落枕，治愈率为85.37%。侯春英等[13]应用颊针疗法治疗偏头痛总有效率为90.00%，而常规针刺的对照组有效率为73.53%。

对穴位进行针刺时，针刺镇痛效应呈现出一个渐进的过程，先经过一个或长或短的潜伏期，然后针刺效应开始上升，达到一定水平后维持一段时间，又开始逐渐下降，回落到针刺前或比针刺前略高的水平，针刺镇痛效应的发生发展与时间的关系，称为针刺镇痛作用的时间效应，可以用时间效应曲线来表示针刺效应与时间的关系，根据此曲线可将针刺镇痛效应的时间过程分为潜伏期、上升期、高峰期和下降期[8]。

针刺镇痛效应的时效特性，对于针灸临床留针时间长短、治疗频次、每一疗程长短及疗程间隔的确定均具有重要的指导意义，了解针刺镇痛效应的时间特征及其影响因素，对于临床治疗和实验研究均非常重要。

机体的不同系统对针刺刺激的反应速度不同，不同性质的病理过程、不同的针刺方法均会影响针刺显效速度，所以表现在针刺镇痛效应的潜伏期上也有所不同，潜伏期短的从几秒到几十分钟，潜伏期长者，针刺效应在针刺后数小时或数天后才逐渐出现并发展到高峰。由于针效反应系统及病变性质不同，针刺效应的高峰期维持长短也有所不同，针刺镇痛作用的时间效应，不仅可在一次针刺过程中表现出来，在多次治疗中仍表现出此种升降趋势。

本研究结果显示，体针组和颊针组的针刺镇痛作用具有十分明显的时间效应，体针组、颊针组镇痛效应均随时间变化而变化。颊针组5 min时开始显示明显的镇痛效应，30 min时到达峰值，60 min时镇痛效应明显下降，240 min时已降到最低值。临床颊针的留针时间一般为15～20 min，体针的留针时间多为30 min，此次的实验结果与颊针临床操作留针时间常规是一致的，为临床颊针留针时间提供了一定的实验依据。

针刺镇痛效应存在逐日积累的特点，即针刺镇痛的量效特性，但针刺治疗的次数并非越多越好，针刺镇痛效应量的积累作用有一定限度，治疗次数达到一定程度后，针刺镇痛效应就不再增加甚至开始下降。即针刺镇痛是存在针刺镇痛耐受的，针刺镇痛耐受是指由于长时间针刺或反复多次针刺后，针刺镇痛效应降低的一种现象，此种现象在针灸临床上是常见的，针刺耐受的产生与针刺的治疗频次、疗程的长短、疗程的间隔均有关系。

本研究结果显示，颊针组在针刺0、5、15、30、60、120、240 min各时间点上，第1次针刺时镇痛效应量效曲线与第7次针刺时比较有差异，第7次针刺时镇痛效应量效曲线与第10次针刺时比较无差异；说明随着颊针治疗次数的增加，镇痛强度逐渐加强，但当治疗次数增加到一定程度时镇痛效应不再随治疗次数的增加而增加，临床上颊针疗法治疗疼痛一疗程一般为7 d，本实验研究的结果与临床实践操作是一致的，说明颊针临床疗程的设定是合理的。

综上所述，颊针疗法具有明显的时间效应，还具有镇痛起效快、上升快，下降亦快的特点；体针表现为镇痛效应起效慢、上升慢、下降亦慢。

作者贡献：方晓丽进行研究的实施与可行性分析，对文章整体负责，并监督管理；蒲瑞生进行研究设计与实施、资料收集整理，撰写论文；刘丁龙、权可、苏成红、杨晨光、张延菊进行研究实施、评估、资料收集；颉旺军进行质量控制及审校。

本文无利益冲突。

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CharacteristicsoftheAnalgesicEffectofBuccalNeedleTherapyonRheumatoidArthritiswithRabbitsasaModel

PURui-sheng1，2，FANGXiao-li1*，XIEWang-jun1，LIUDing-long1，QUANKe1，SUCheng-hong1，YANGChen-guang1，ZHANGYan-ju1

1.SchoolofAcupunctureandMassage,GansuUniversityofChineseMedicine，Lanzhou730000，China2.TianshuiRuishengtangChineseMedicineCentre，Tianshui741000，China

*Correspondingauthor:FANGXiao-li，Professor,Doctoralsupervisor;E-mail:fangxlzyxy@163.com

ObjectiveTo evaluate the analgesic effect of buccal needle therapy in a rabbit model of rheumatoid arthritis,in order to provide a reference for the clinical needle-retaining duration and treatment course of buccal acupuncture.MethodsThis study was conducted from January to September,2014.Forty clean level white lop-eared rabbits were randomly divided into 4 groups,normal group,model group,body needle group and buccal needle group,with 10 in each.The model group,body needle group and buccal needle group were prepared as the rheumatoid arthritis model,while no treatment was applied for the normal group.Since the 27th day after the starting of the experiment,both the model group and normal group were fixed for 30 min each day with the same method used for the body needle group and the buccal needle group;the rabbits of the body needle group were acupunctured at Xiyan points and Zusanli acupoints on bilateral hind limbs 1 time per day,the needle was retained for 30 min,and those in the buccal needle group were acupunctured at "Xi" acupoints with buccal needle 1 time per day,the needle was retained for 20 min.All the four groups were treated 10 times continuously,and the pain thresholds were measured at acupuncture times of 0,5,15,30,60,120,and 240 min,respectively,during the 1st,4th,7th and 10th acupuncture treatments.ResultsBased on the pain thresholds,it was identified that there was interaction effect between acupuncture treatment method and duration(P<0.05) during the 1st,4th,7th and 10th acupuncture treatments.The principal effect produced by acupuncture treatment duration on pain threshold was significant(P<0.05),while that produced by acupuncture treatment method on pain threshold was not(P>0.05).The pain thresholds of the body needle group and buccal needle group were significantly affected by the acupuncture treatment duration(P<0.01),but those of the normal group and the model group were not(P>0.05).The principal effect of acupuncture treatment duration on pain threshold was significant in the buccal needle group(F=15.473,P<0.001).There was no interaction effect between the duration of buccal needle treatment and the number of acupuncture on the pain threshold(F=0.973,P=0.486).The difference in the analgesic effect curves between the 1st and 7th buccal needle acupuncture treatments was significant(t=-3.227,P=0.012);but it was not significant(t=0.463,P=0.656) between the 7th and 10th buccal needle acupuncture treatments.ConclusionThe analgesic effect of buccal needle therapy has obvious time dependence,and it shows typical characteristics of quick response,rapid rise and decline.

Arthritis,rheumatism;Acupuncture and moxibustion therapy;Analgesia;Dose-effect relationship,acupuncture and moxibustion;Buccal acupuncture

国家自然科学基金资助项目(81260559)

R 593.22

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.00.142

蒲瑞生，方晓丽，颉旺军，等.颊针疗法在类风湿关节炎家兔模型镇痛效应中的特点研究[J].中国全科医学，2017，20(33)：4183-4187.[www.chinagp.net]

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2017-07-15；

2017-10-11)

(本文编辑：崔莎)