自体骨髓干细胞移植治疗肝衰竭患者临床疗效及安全性的随机对照试验研究*

郭 锐，邓 宇,郭玲

自体骨髓干细胞移植治疗肝衰竭患者临床疗效及安全性的随机对照试验研究*

郭 锐，邓 宇,郭玲

目的评价自体骨髓干细胞移植治疗肝衰竭患者的疗效和安全性。方法采用随机平行对照试验设计方案，将72例肝衰竭受试者随机分为试验组和对照组，每组36例。给予对照组受试者综合治疗，试验组受试者在此基础上接受自体骨髓干细胞移植治疗。给予患者集落细胞刺激因子 4μg·kg-1皮下注射，行碘过敏试验，以右侧髂后上棘为穿刺点，利多卡因逐层麻醉后，抽取骨髓血50～100 ml，加入肝素4000 U抗凝。送我院干细胞实验室，采用负筛选法进行骨髓干细胞体外分离及纯化。在DSA监视下,将分离的骨髓干细胞（5×107～108）通过导管经肝动脉缓慢注入肝内。常规加测肝功能指标，记录不良反应发生情况和随访患者短期预后。结果在治疗4周末，试验组受试者血清TBIL、ALT和ALB分别为（135.53±31.66）μmol/L、（71.87±21.35）U/L和（36.42±6.17）g/L，而对照组分别为（182.84±30.57） μmol/L、（92.57±19.55） U/L 和（30.58±5.31）g/L 两组差异显著（P＜0.01）；在治疗4周末，试验组受试者INR为（1.63±0.42），显著低于对照组的（2.01±0.58）（P＜0.01）；在接下来的随访中，试验组受试者死亡2例，1例死于消化道出血，1例死于肺部感染，对照组受试者死亡3例，且均死于消化道出血。结论自体骨髓干细胞移植治疗肝衰竭患者疗效显著，术后并发症较少。

肝衰竭；自体骨髓干细胞移植；疗效；安全性

肝衰竭是由多种致病因素导致肝细胞的合成、代谢、解毒等功能严重障碍，其临床表现为黄疸、腹腔积液、凝血功能障碍和肝性脑病等一系列临床综合征[1，2]。在我国，该病最常见的病因为肝炎病毒感染。临床治疗多以药物、人工肝支持疗法以及肝移植等[3]。研究发现，自体骨髓干细胞移植可以明显地改善肝衰竭患者的临床症状，提高生存率[4-10]。但到目前为止，仍然缺乏设计严谨、高质量的随机对照试验。本研究采用随机对照试验设计方案对自体骨髓干细胞移植治疗肝衰竭患者的临床疗效和安全性进行了进一步评价。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2011年1月～2016年2月期间延安市人民医院收治的肝衰竭患者72例，男性49例，女性23例，年龄33～70岁，平均年龄（44.58±13.62）岁。符合《肝衰竭诊治指南》的诊断标准[11]。乙型肝炎引起的肝功能衰竭者61例，酒精性肝硬化引起的肝功能衰竭者11例。排除标准：合并上消化道出血、肝肾综合征、合并肝癌及其他恶性肿瘤、合并HIV感染、合并心、肾等重要脏器严重疾病、孕妇及哺乳期妇女、有药物过敏史和过敏体质者。剔除标准：患者依从性差、在治疗过程中自行退出者、或因发生严重不良反应而终止试验者。受试者签署知情同意书。本临床试验获得延安市人民医院医学伦理委员会批准。

作者单位：716000 陕西省延安市人民医院消化内科

1.2 随机、隐藏和盲法 由统计人员应用SAS软件产生随机数字，然后将其置于密闭、不透光的信封中。将随机试验资料寄到研究中心，研究中心根据受试者入组时间，随机将患者分为试验组36例和对照组36例。两组受试者病程、年龄、性别、肝衰竭原发病等一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究对统计人员实施盲法。

1.3 治疗方法 给予对照组受试者综合治疗和给予乙型肝炎患者恩替卡韦（中美上海施贵宝制药有限公司，批号：0808665）500 mg口服，1次/d；试验组受试者在对照组治疗基础上再给予自体骨髓干细胞移植治疗[12-14]。术前准备：给予患者集落细胞刺激因子 4 μg·kg-1皮下注射，1次/d，连续2 d。行碘过敏试验，患者进入隔离病房。取患者右侧髂后上棘为穿刺点，局部常规消毒后，铺无菌洞巾，给予利多卡因逐层麻醉后，以18号骨髓穿刺针穿刺，抽取骨髓血50～100 ml，加入肝素4000 U抗凝。送我院干细胞实验室，采用负筛选法进行骨髓干细胞体外分离及纯化。在DSA监视下,将分离的骨髓干细胞（5×107～108）通过导管经肝动脉缓慢注入肝内。术毕，拔管。穿刺点按压后加压包扎。返回病房，穿刺侧下肢制动6 h。

1.4 检测 使用日本OlympusAU640型全自动生化仪和上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂检测血生化指标，常规检测凝血功能指标。

1.5 统计学方法 应用SPSS 17.0统计软件包进行处理。数据统计分析采用意向性（intent-to-treat，ITT）分析。计量资料以（±s）表示，采用t检验，计数资料的比较采用x2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受试者治疗前后肝功能指标变化的比较 在治疗前，两组受试者肝功能指标和INR无显著性相差（P＞0.05）；在治疗4 w末，试验组肝功能指标显著改善，明显优于对照组（P＜0.01，表 1）。

表1 两组治疗前后肝功能指标(±s)变化的比较

表1 两组治疗前后肝功能指标(±s)变化的比较

与对照组比，①P＜0.01

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2.2 两组受试者不良反应发生情况比较 见表2。

表2 两组不良反应(%)比较

2.3 两组受试者脱落情况比较 在接下来的随访中，试验组受试者死亡2例，1例死于消化道出血，1例死于肺部感染；对照组受试者死亡3例，且均死于消化道出血。两组受试者脱落情况比较，差异无显著性统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

肝衰竭是指肝细胞受到广泛、严重损害后，细胞坏死，导致机体代谢功能发生严重紊乱而产生的临床危重综合征，并且预后多不良[15]。目前，临床上尚无治疗本病的特效疗法。常规治疗多以保肝、抗病毒、抗肝纤维化等药物治疗为主，但这些疗法的疗效还不甚满意[2-5]。

本研究采用自体骨髓干细胞移植方法,直接将骨髓干细胞移植到患者肝脏内，使移植后的骨髓干细胞在肝脏的内环境下分化为肝样细胞，并进一步代替损伤的肝细胞，从而可以促进细胞再生和肝脏功能修复。另外，本研究选用患者自体骨髓干细胞移植，也可以避免免疫排斥反应,并且不需要考虑组织相容性抗原的配型问题。

本研究结果显示，与治疗前比较，治疗后试验组受试者血清TBIL、ALT、INR均显著改善，差异有统计学意义（P＜0.01）。与对照组比较，试验组血清 TBIL、ALT、ALB、INR 改善更显著，两组差异有统计学意义（P＜0.01）。由此可见，自体骨髓干细胞移植可以改善肝衰竭受试者的肝功能，并且该疗法的并发症少，具有良好的安全性。

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（收稿：2016-11-28）

（本文编辑：陈宗炳）

A randomized controlled trial of clinical efficacy and safety of autologous bone marrow stem cell transportation for treating patients with liver failure

Guo Rui，Deng Yu.Department of Gastroenterology，People's Hospital，Yanan 716000，Shaanxi Province，China

Liver failure；Autologous bone marrow stem cell transportation；Efficacy；Safety

10.3969/j.issn.1672-5069.2017.05.030

陕西省自然科学基金项目（编号：2012CM6108）

郭锐，男，35岁，大学本科，主治医师。主要从事肝病防治研究。E-mail:3429365175@qq.com

郭玲，E-mail:3133635472@qq.com