慢性丙型肝炎患者外周血I L-28B基因型多态性及其对持续病毒学应答的影响

娜 丽

慢性丙型肝炎患者外周血I L-28B基因型多态性及其对持续病毒学应答的影响

娜 丽

目的探讨慢性丙型肝炎（CHC）患者白细胞介素28B（IL-28B）基因型位点多态性及其对持续病毒学应答（SVR）的影响。方法2011年3月～2016年3月收治的CHC患者285例，接受24～48周利巴林韦联合聚乙二醇干扰素治疗。采用双色荧光TaqMan技术检测患者外周血IL-28B rs12979860基因型位点多态性，常规检测HCV基因型。结果在285例CHC患者中，发现HCV 1b型169例（59.29%），2a型 99例（34.74%），非1b/2a亚型 17例（5.96%）；IL-28B rs12979860基因型为CC基因型208例（72.98%），CT基因型64例（22.46%），TT基因型13例（4.56%）；CC型和CT/TT型感染患者血清HCV RNA水平无显著相差（Z=0.260，P＞0.05）；获得 SVR 183例（64.21%），其中 169例 HCV 1b型获得 SVR 23例（13.61%），99例 2a亚型获得 SVR 76例（76.77%），17例非1b/2a亚型获得 SVR 7例（41.18%），组间比较差异有统计学意义（x2=20.415，P＜0.05）；208例 IL-28B CC 基因型获得SVR 192例（92.31%），64例CT基因型获得SVR 12例（18.75%），13例TT基因型中获得SVR 4例（30.77%），组间比较差异有统计学意义（（x2=15.294，P＜0.05）。结论CHC患者获得SVR与IL-28B rs12979860基因位点多态性密切相关，CC基因型感染者可能更容易获得更高的SVR。

慢性丙型肝炎；聚乙二醇干扰素；白细胞介素-28B；持续病毒学应答

近年研究表明，慢性丙型肝炎（CHC）抗病毒治疗CHC患者的效果受宿主IL-28B基因多态性的影响[1-3],IL-28B基因rs8099917位点和rs12979860位点与抗病毒的疗效关系密切[4，5]。在不同种族，应用利巴韦林联合干扰素治疗rs129798 60 C基因CHC患者容易获得更高的持续病毒学应答（SVR）[6，7]，欧洲裔和西班牙裔患者获得SVR居东亚裔和非洲裔之间，而非洲裔远低于东亚裔患者[8，9]。本文旨在探讨并分析中国CHC患者IL-28B基因型位点多态性及其对SVR的影响。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2011年3月～2016年3月我科收治的CHC患者285例，男165例，女120例；平均年龄（42.1±8.7）岁。均接受24～28周利巴林韦联合聚乙二醇干扰素-α治疗。所有患者均符合《慢性丙型肝炎抗病毒治疗专家共识》诊断标准[10]，纳入标准:①年龄≥18岁；②至少两次血清抗HCV和HCV RNA阳性。排除标准：①妊娠及哺乳期妇女；②酒精性肝病、自身免疫性肝病、代谢性肝病；③合并甲状腺疾病、糖尿病及精神疾病；④恶性肿瘤、失代偿期肝病及器官移植术后；⑤合并甲、乙、丁、戊型肝炎。

作者单位：010050内蒙古自治区呼伦贝尔市内蒙古医科大学附属医院

1.2 疗效评价根据 《丙型肝炎防治指南》（2015更新版）[11]，达到治疗结束时病毒学应答（ETVR），停药随访24周仍维持HCV RNA水平低于检测下限者为SVR。

1.3 外周血IL-28B rs12979860基因型和HCV基因型检测参照GenBank中IL-28Brs129860基因序列，应用Vector NTI 11.0软件设计rs12979860 CT位点双色（VIC和FAM）引物和特异性荧光探针，并构造单管等位基因双色荧光PCR体系。探针（T）为 5’-FAM-TGGTTCACGCCT-MGB-3’，探针（C） 为 5’-VIC-GGTTCGCGCCT-MGB-3’；上游引物（IL28 F）为 5’-GGGCGGAAGGAGCAG-3’，下游引物（IL28 R）为5’-GGGCGGAAGGAGCAGTTG-3’。取外周 EDTA 抗凝血，按照基因组DNA提取试剂盒（北京凯杰公司）要求进行基因组DNA提取，PCR反应体系由反应液40μl和模板10μl构成，使用SLAN96实时荧光定量PCR仪（上海宏石公司）。常规检测HCV基因型。

1.4 血清HCV RNA检测采用实时荧光定量PCR法（COBAS TaqMan 48）检测。

1.5 统计学方法应用SPSS 19.0软件进行统计分析，采用x2检验或Fisher精确概率计算法检验定性资料，采用Wilcoxon秩和检验对计量资料进行分析，计量资料因呈偏态分布，故以M（IQR）表示，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 HCV基因型分型和IL-28B rs12979860基因型情况对285例患者进行了HCV基因分型，结果HCV 1b型169例（59.29%），2a型 99例（34.74%），非 1b/2a亚型 17例（5.96%）；IL-28B rs12979860基因型为 CC基因型 208例（72.98%），CT基因型 64例（22.46%），TT基因型 13例（4.56%）。

2.2 不同IL-28B基因型患者临床特征比较不同IL-28B基因型患者性别、年龄、病毒载量、AST、ALT水平无统计学差异（P＞0.05，表 1）。

表1 不同IL-28B基因型患者临床资料[n,M(IQR）]比较

2.3 不同HCV基因型感染患者抗病毒疗效的比较在285例患者中，获得SVR 183例（64.21%），其中169例 HCV 1b型感染者获得SVR 23例（13.61%），99例2a亚型感染者获得SVR 76例（76.77%），17例非1b/2a亚型感染者获得SVR 7例（41.18%），组间比较差异有统计学意义（x2=20.415，P＜0.05），2a亚型感染患者获得SVR最高。

2.4 不同IL-28B基因型患者SVR比较 在208例IL-28B CC基因型患者中，获得SVR 192例（92.31%），64例CT基因型获得SVR 12例（18.75%），13例TT基因型患者获得SVR 4例（30.77%），组间比较差异有统计学意义（x2=15.294，P＜0.05），CC基因型患者获得SVR最高。

3 讨论

聚乙二醇干扰素被作为标准的抗病毒治疗应用于CHC患者[12-15]。为探讨IL-28B基因型位点多态性对SVR的影响，我们在接受24～48周利巴林韦联合聚乙二醇干扰素治疗的285例CHC患者，采用双色荧光TaqMan技术对该基因型进行了研究。

本研究发现，CT基因型与TT基因型感染患者性别、年龄、病毒载量、AST、ALT水平比较无统计学差异（P＞0.05）。HCV 1b型获得SVR为13.61%，2a亚型为76.77%，非1b/2a亚型为41.18%。IL-28B rs12979860基因CC基因型感染患者获得SVR最高，表明对CHC患者抗病毒治疗的效果受IL-28B rs12979860基因型的影响，与既往报道相似[16-18]。

由于本研究病例数量少于既往类似报道，所得数据与之亦有所偏差。对于IL-28B rs12979860基因型位点多态性测定，其特点在于结果可信，操作相对简便。

CHC患者接受利巴林韦联合聚乙二醇干扰素治疗，其持续病毒学应答与IL-28B rs12979860多态性位点基因型密切相关。由于TT基因型和CT基因型分布频率显著低于CC基因型，而CC基因型常见，也更容易获得SVR。因此，在决定抗病毒治疗前检测该指标可以预估疗效。

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（收稿：2016-12-22）

（本文编辑：陈宗炳）

IL-28B genotype polymorphism and its impact on sustained viral response in patients with chronic hepatitis C receiving standardized antiviral therapy

Na Li.Affiliated Hospital，Inner Mongolia Medical University，Hulunbeier 010050，Inner Mongolia Autonomous Region，China

Hepatitis C；Interferon-α；Interleukin-28B；Sustained viral response

10.3969/j.issn.1672-5069.2017.05.024

娜 丽，女，40岁，大学本科，主治医师。E-mail:luguangybj85@126.com