中华蟾蜍仿生态养殖技术△

杨艳，赵群，高波，康彦，李灯林，李军德

(1.道地药材国家重点实验室培育基地，中国中医科学院 中药资源中心，北京，100700；2.安徽华润金蟾药业股份有限公司，安徽 淮北 235000；3.皖西学院，安徽 六安 237012)

·中药农业·

中华蟾蜍仿生态养殖技术△

杨艳1,2，赵群1,3，高波2，康彦2，李灯林2，李军德1*

(1.道地药材国家重点实验室培育基地，中国中医科学院 中药资源中心，北京，100700；2.安徽华润金蟾药业股份有限公司，安徽 淮北 235000；3.皖西学院，安徽 六安 237012)

本文主要介绍中华蟾蜍BufogargarizansCantor在安徽淮北地区的人工养殖技术，通过在实验室玻璃饲养缸中的养殖实验，确定对养殖条件的控制和人工管理技术。实验主要通过人工干预管理，模拟蟾蜍野外水陆环境，监控水质、温度、湿度等，引入增氧系统的设计和天敌防护措施；在食性驯化方面，保证食物的多样化，设计并优化饲喂条件，确定合理配方，为下一步野外人工放养奠定了一定基础。

中华蟾蜍；仿生态；养殖技术

中华蟾蜍BufogargarizansCantor隶属于两栖纲、无尾目、蟾蜍科、蟾蜍属，俗称“癞蛤蟆”[1-2]。中华蟾蜍的药用价值很高[3-4]，常以蟾酥、蟾衣、干蟾、蟾皮作为药用。蟾酥是蟾蜍耳后的大毒腺和背部疙瘩所分泌的有毒物质，具有解毒、消肿、强心止痛等功效。蟾衣是蟾蜍每隔一段时间所蜕下的角质膜，具有清热、解毒、消肿止痛、抗病毒的功效，并对肝腹水、癌症等有明显的效果。干蟾是把蟾蜍整体进行干燥后所得来的，蟾蜍的腺体含有华蟾素。蟾皮是蟾蜍的一层表皮，主要用来开发药品，

蟾皮的需求量比较大，其抗肿瘤有效成分蟾蜍噻咛的含量也较高[5-8]。中华蟾蜍是目前国内蟾皮药材和华蟾素制剂的主要来源，目前的需求也比较大。

近年来由于环境的严重污染，导致中华蟾蜍的生态环境遭到了破坏，使野生蟾蜍栖息地大大受到限制，资源不断的减少[1]。为了保护野生资源和满足临床及生产需要，大力开展规模化、规范化的人工养殖是保证中华蟾蜍来源的重要途径。

中华蟾蜍为水陆两栖性，喜静怕惊扰，由于自身体温调节能力弱，故为冷血变温动物。合适的饲养密度与食物的营养组成对蝌蚪期的成活率和质量影响很大[9]，蝌蚪期和变态期的水中含氧量对蝌蚪的生存至关重要。

本文主要介绍中华蟾蜍B.gargarizans在安徽淮北地区的人工养殖技术，通过在实验室玻璃饲养缸中的养殖实验，寻求合理的饲养密度与理想的食物营养组成，以及养殖过程中环境条件的控制和严格的人工管理，以提高幼蟾成活率，为建立规范化的中华蟾蜍人工养殖技术体系及其应用推广打下一定的基础。

1 安徽淮北地区环境气侯

1.1气候情况

淮北地区位于安徽省北部，东经116.80，北纬33.95，地处我国南北气候过渡带，属温带季风气候区，海拔14～46m，是华北大平原的一部分。该地区气候温和，年平均气温14～15℃，年平均无霜期203d。雨量适中，年平均降雨量830mm左右，年平均空气相对湿度71%，日照充足，四季分明。由于气候的过渡性，也常常出现各种气象灾害，夏秋旱涝几率大，气候不是很稳定。

通过在淮北地区中华蟾蜍养殖基地中安装的八要素(气温、相对湿度、地温、地湿、光照强度、雨量、气压、风向、风速等)自动气象站，对当地环境进行监控，并对数据进行记录。其温度和湿度随时间的变化如图1和图2所示。

图1 温度因素随日期的变化曲线(引种至越冬阶段)

图2 湿度因素随时间变化曲线(引种至越冬阶段)

1.2水质条件

中华蟾蜍养殖水质依据《渔业水质标准(GB11607-1989)》的规定，对水中氨氮，溶氧量，硫化氢等指标进行监测。

2 种蟾引种

2.1引种

在安徽省淮北地区实验基地进行养殖实验，11月份底到12月份初分别从江苏、河南、河北和山东四个地方进行种蟾的引种。

本实验基地的蟾蜍养殖池根据用途分为种蟾池、孵化池、蝌蚪池和幼蟾池，并在池中进行仿生态养殖。从以上四个产地引种过来的种蟾放入种蟾池种等待来年的产卵孵化。

2.2种蟾标准

2.2.1种性特征 种用蟾蜍的特征要明显。雄性有明显的婚垫，雌性腹部膨大、柔软，卵巢轮廓可见而富有弹性。

2.2.2个体特征 个体大、体质健壮、皮肤光泽、无病无伤。

2.2.3亲缘关系 选择亲缘关系较远的雌雄蟾蜍作种用。血缘关系太近(同胞、亲子)的雌雄种蟾配对，受精率、孵化率均较低，且孵出蝌蚪成活率也低，生长发育也不好。

2.2.4成熟度 应选用2～5龄青壮年蟾蜍。不宜选用5龄以上和2龄以下蟾蜍作为种用。成熟度要尽量一致，便于产卵时间集中。

2.2.5雌雄比例 雌：雄比例为1～2∶1。

2.3雌雄鉴别

2.3.1繁殖季节 (1)鸣叫 雄蟾会鸣叫。在雄蟾咽喉腹面或下颌腹面有1～2个内声囊，为皮肤所掩盖，是由肌肉皱褶向外突出所形成的双壁结构，能发生共鸣作用而扩大喉部发出声音。

(2)婚垫 雄蟾有婚垫。春末夏初，雄蟾前肢内侧第一、二指基部局部隆起形成黑色婚垫，也有在第三指上出现婚垫的。

(3)颜色 雄蟾背部颜色比雌性要深呈黑绿色。

2.3.2非繁殖季节

(1)大小 雄蟾个体较雌蟾小。

(2)前臂 两前臂粗壮而有力。在爬行时，前肢肘关节向外侧扩展而前肢直立起来。

3 饲养期

3.1抱对

蟾蜍大多在春季进行交配产卵，选择体格健壮，体表无病无损伤和腹部膨大卵巢发育明显的蟾蜍。将选择好的种蟾放入种蟾池内，当环境气温在14℃左右时，雄蟾蜍会用前肢紧紧抱住雌性蟾蜍以促使其性腺发育成熟并产卵(图3)。

图3 抱对、产卵

3.2产卵及孵化

种蟾在淮北地区第二年的2月16号前后开始产卵，产卵时环境气温在10℃左右。卵的受精在水中完成，受精卵外面有一层卵胶膜包裹。此时，在种蟾池中放入捆状的金银花干枝(一捆4kg左右)，种蟾产出的卵带附着在上面，避免粘结成团在一起，影响蝌蚪的孵化。

受精卵孵化时的环境气温在10～15℃左右，从卵带开始断裂到蝌蚪完全分离大概所需的时间为一周左右(图4)。

图4 卵粒分离

刚从卵膜中孵化出来的蝌蚪不需要进行喂食，依靠吸收剩余卵黄来维持生活。当蝌蚪成形后的2～3d可以用蛋黄喂食，其方法是将煮熟的蛋黄捏碎用水搅拌后撒入水中供蝌蚪取食(图5)。

图5 蝌蚪孵化

3.3蝌蚪期饲养管理

孵化出的蝌蚪在孵化池喂养15d左右后，部分蝌蚪被转移到室内实验室中进行饲养，在饲养过程对水质进行控制。余下的蝌蚪被转移到室外蝌蚪池进行养殖。

实验室中的蝌蚪在饲养过程中，进行食性实验和密度实验以确定蝌蚪的最适宜的饲料和最适人工饲养密度。蝌蚪被饲养在若干玻璃饲养缸中，每个玻璃饲养缸的长×宽×高为150cm×100cm×60cm，缸内水深为玻璃缸的三分之一高度。

玻璃饲养缸放在通风和光照条件良好的室内环境中。实验室中的顶棚可自动开启和关闭，并安装了加氧系统，每个玻璃缸内都放置一个加氧孔，根据需要随时给玻璃缸内的水中加氧。蝌蚪来自于同一天受精的卵团，并在分组前随机混合。根据食性实验和密度实验的要求进行实验分组。定期进行检测主要水质指标，保证其符合《渔业水质标准(GB11607-1989)》的规定。

每天定时定量喂食。每天喂食2次，分别为上午8∶30和下午2∶30各1次；每次投食量为饲养缸中蝌蚪总重量的10%左右，每隔7天根据蝌蚪的实际重量调整投食量。每隔7d测量和记录5个样本，主要测量其体重、头体长、尾长和死亡个数，直到蝌蚪全部变态完毕。正常的情况下每缸每天换水一次。

如果水中硫化氢及氨氮含量较高，会导致水环境恶化，使蝌蚪大量死亡。因此，在饲养管理中，勤换水和持续增氧非常重要。

3.4变态期饲养管理

用沙子和砖块瓦片在缸内铺建三分之一面积的陆地，陆地和水接触的一面边缘要有一定的缓坡，便于蝌蚪在变态期间幼体随时登陆和下水，能够顺利完成水陆两栖的过渡阶段。

刚处于变态时的蝌蚪不吃不动，能量消耗大，若幼蟾体质不健壮，死亡率增大，故前期饲养很重要。

蝌蚪变态期间，身体结构发生很大转变，由腮呼吸变成肺呼吸，口开始裂开张大，体内各系统不断变化，蝌蚪仍然都处于水中的生活环境，若增氧机不能每24小时持续增氧，间断供氧的话，会造成蝌蚪大量死亡，后期会作相关规范，增氧机每天24小时持续增氧，水也要常换。

在淮北地区的蝌蚪从孵化到完全变态完成整个历程为当年的2月16日到5月20日经历了3个多月的时间。期间蝌蚪在生长到30d左右出现了后肢芽，60d左右开始有退尾。但由于蝌蚪的变态是不同步的，即使是同一日龄的蝌蚪，早变态的已长出四肢，而迟变态的仍是长尾一条(图6、图7)，因此，就整体而言，应继续投喂，只是投喂量要逐渐减少，直至全部变态成幼蟾。

图6 变态期

图7 退尾

中华蟾蜍B.gargarizans在蝌蚪饲养密度和饲料营养组成研究实验中表明：(1)饲养密度实验和饲料种类实验中，中华蟾蜍蝌蚪临近变态时(变态前)和变态后的成活率分别为68.7%～96.3%和5.7%～36.0%；(2)中华蟾蜍蝌蚪的最适养殖密度为1000只/m2，II(28%玉米粉、19%豆饼粉、16%肉骨粉、17%鱼粉、10%酵母、3%多维和6%新鲜蔬菜)，IV(43%玉米粉、13%豆饼粉、0%肉骨粉、6%鱼粉、10%酵母、4%多维和24%新鲜蔬菜)和V(牛蛙饲料)等3种饲料均为中华蟾蜍蝌蚪较为适宜的饲料[10]。

4 实验室幼蟾饲养

4.1饲养环境

用沙子和砖块瓦片在缸内铺建2/3面积的陆地，陆地和水接触的一面边缘要有一定的缓坡，便于幼蟾随时登陆和下水。

4.2水质监测

保证实验室内环境内有良好的光照与通风。检测主要水质指标，保证其符合《渔业水质标准(GB11607-1989)》的规定。

幼蟾期大部分的栖息地都在陆地，相对于水质的要求要比蝌蚪期低，所以在水质监测上可以一周一次，根据检测结果来确定是否需要换水。

4.3投食

定时定量喂食。每天喂食2次，分别为上午8∶30和下午6∶30各1次；每次投食量为饲养缸中幼蟾总重量的10%左右，每隔7d根幼蟾的实际重量调整投食量。

图8 幼蟾摄食蝇蛆

图9 幼蟾摄食黄粉虫

投入的饵料以蝇蛆和黄粉虫为主(图8、图9)，刚变态的幼蟾比较弱小，蝇蛆的体质比黄粉虫更小、更软，且活动能力较强，可作为幼蟾的开口饵料，并拌入适量的钙粉和多维素保证幼蟾时期的营养和促进肠道的蠕动。在后期成蟾过程中，逐渐掺入黄粉虫混合饲喂，使饵料多样化达到营养均衡的目的(图10)。

图10 蝇蛆、黄粉虫混合饲喂

4.4观测记录

每隔7d测量和记录1次数据，每个重复组至少测量10个样本，主要测量幼蟾的体重、头体长、头长、四肢长和死亡个数。

细心观察幼蟾的摄食情况，以确定每次的投食量。如投入饵料后，幼蟾集中在饵料上取食，且完全吃完，表明投食量不足；如在投食后当天饵料有剩余，表明投食量充足，应适当减少投食量。投入的饵料以不剩或少剩为宜。

4.5注意事项

由于幼蟾数量多，如果只在一点投食，则可能导致很多幼蟾不能及时找到食物。因此，在饲养幼蟾时采用多点投食，即在饲养缸的四周分多点投放饵料。每天剩余的饵料要及时取出，避免剩余的饵料对水质造成污染。

在幼蟾期间根据需要每天要对玻璃缸的陆地进行人工喷水，让陆地部分保持着湿润状态，根据环境温度来适当的对顶棚进行开启或关闭，防止温度在过高的情况下对幼蟾造成一定伤害。在室内温度过高的情况下也可采取人工地面洒水来进行室内降温。

中华蟾蜍B.gargarizans在幼蟾饲养研究实验中表明：(1)中华蟾蜍在第一次冬眠前的成活率为7.9%～30.0%；(2)中华蟾蜍幼蟾的最适养殖密度为80只/m2。

4.6天敌防护

在幼蟾实验期间实验室内有遭到天敌侵害的现象(黄鼠狼、鸟类、鼠类、蛇类等)，网格有破损，死亡的幼蟾大部分都有破肚的现象(图11)。

图11 中华蟾蜍遭遇天敌后所受伤害

发现有天敌侵害后，随即对实验室的玻璃缸进行了安全防护，由于天敌的问题比较严重，就防护问题不断改进，期间用了绳网，塑料网，直到用钢网才使得天敌侵害的问题得以解决。

5 冬眠期饲养管理

中华蟾蜍为变温动物，当环境温度低于10℃时，就要进入冬眠状态。本次淮北地区仿生态养殖的幼蟾在当年的10月29号左右进入第一次冬眠。整个冬眠期持续到来年的2月份。

冬眠的场所一般在水底或陆地的泥土中，因此在冬眠前要保证池中水量和把蟾蜍在陆地上活动区域的土翻松，或在陆地的部分覆盖稻草可以对冬眠的蟾蜍起到保温的效果。

冬眠期间，蟾蜍不吃不动，而冬眠期要持续很长一段时间，所以在蟾蜍冬眠前必须加强喂食、增加营养，使其冬前健壮，以便顺利度过冬眠期。

在越冬期间，每天要定时巡视养殖池，观察冬眠蟾蜍有无异常情况，如发现有死亡个体或即将死亡个体，应及时从养殖池中清除，以免污染水质或对健康的蟾蜍造成危害。

定期检测水质，水溶解氧低于8mg·L-1升或水变差时，应及时换水，必要时开增氧机增氧。

当翌年环境温度升到10℃以上时，冬眠结束，蟾蜍开始醒眠，随后便开始抱对、产卵。

6 讨论

6.1环境因素

在实验室养殖的过程中，在室内增加了加氧系统，在蟾蜍的蝌蚪期与蝌蚪变态期必须要24h供氧，特别是蝌蚪处于变态期的时候，若氧气不足会导致蝌蚪的大量死亡。

在高温季节，实验室内温度过高，进行人工地面洒水降温，保证室内空气流通，在蝌蚪变态期及幼蟾期，由于已经变态的幼蟾主要活动于陆地，除了陆地部分要做好遮阴措施以外，每天还要进行人工喷洒水使陆地部分保持湿润。

实验室中的顶棚自动化设计可以很好的避雨水，预防大气中的一些有害物质进入玻璃饲养缸污染水质，导致玻璃饲养缸内的水中氨氮、硫化氢等检测指标超标影响水质，给蟾蜍带来危害。实验室中玻璃饲养缸内的水源都是地下水，不建议使用河流引水，因周边有农作物种植，水中不排除有农药的残留，以免对蟾蜍造成大量的死亡。

6.2关键技术

提高蝌蚪和幼蟾的成活率与质量是中华蟾蜍规范化养殖的关键。通过在淮北地区的仿生态养殖实验，蟾蜍的人工养殖技术有了一定的突破。根据蟾蜍的生活习性，通过实验模拟蟾蜍野外生存环境，设计并优化饲养条件，在食性实验与密度实验中都得到了一定的数据支持，为后期的规模化养殖提供了经验和支持。

[1] 童水明，颜冬，龚守贺.中华大蟾蜍繁殖及蝌蚪培养技术[J].江西水产科技，2013(4)：27.

[2] 乔淑芬.中华大蟾蜍生活习性及人工养殖场地选择[J].通化师范学院学报，2008，29(4)：39.

[3] 崔松元.特种药用动物养殖学[M].北京：北京农业大学出版社，1990.

[4] 乔淑芬，王红蕾，赵玉敏，等.中华大蟾蜍生物学特征及实际应用价值[J].通化师范学院学报，2007，28(12)：38-40.

[5] 李维熙，孙辉，李茜，等.中华大蟾蜍皮化学成分的研究[J].中草药，2007，38(2)：183.

[6] 曾洋，张爱军，文筱.干蟾皮的研究进展[J].中国医药科学，2011，1(15)：9.

[7] 左小东，崔永安，秦叔逵，等.华蟾素抗肿瘤作用的临床研究进展[J].临床肿瘤学杂志，2003，8(3)：232.

[8] 李淑萍，侯家珠.华蟾素实验研究及临床应用概况[J].医学理论与实践，1996，9(9)：393.

[9] 李新红，邹兴淮，谢晓瑀.不同营养结构的饲料对中国林蛙蝌蚪生长发育的影响[J].经济动物学报，2001，5(2)：47-51.

[10]李军德，赵群，康彦，等.密度与饲料对中华蟾蜍蝌蚪生长发育的影响.中国中药杂志，2016，41(6)：1001-1007.

The Bionic Breeding Technology ofBufogargarizans

YANG Yan1,2，ZHAO Qun1,3，GAO Bo2，KANG Yan2，LI Denglin2，LI JunDe1*

(1.State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs，National Resource Center for Chinese Materia Medica，China Academy of Chinese Medicinal Sciences，Beijing 100700，China；2.Anhui China Resources Jinchan Pharmaceutical Co.，Ltd.，Huaibei 235000，China；3.West Anhui University，Liu’an 237012，China)

This paper mainly introduces the artificial breeding technology of toad(BufogargarizansCantor)in Huaibei region of Anhui province.Through the cultivation experiment in the glass cylinder of laboratory，the control of the farming conditions and artificial management technology were established.The experiment simulated the imitations of the toads' natural habitat by manual intervention，including the control of water quality，temperature，humidity，adding oxygen and the protection measures from predators.To ensure the food diversity，we designed experiments to find the best feeding condition and reasonable formula.The study laid a foundation for the next step in the field of artificial stocking.

Bufogargarizans；bionic；breeding technology；

中央本级重大增减支项目(2060302)；蟾蜍规范化养殖技术研究(3-YFB2014005)

] 李军德，研究员，研究方向：药用动物资源与动物药材鉴定研究；E-mail：jundeli99@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.1.016

2016-09-02)

*[