药用卤化丁基胶塞中两种抗氧剂的测定

赵曼陕西能源职业技术学院

药用卤化丁基胶塞中两种抗氧剂的测定

赵曼
陕西能源职业技术学院

目的建立高效液相色谱法同时测定药用卤化丁基胶塞中的抗氧剂1010和抗氧剂330。方法Agilent C18（250×4.6mm, 5μm）柱为色谱柱，以乙腈：四氢呋喃：水（55∶35∶10）作为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为275nm。结果抗氧剂1010在0.003286～0.2103mg/ml范围内线性关系良好，抗氧剂330在0.003138～0.2008mg/ml范围内线性关系良好，两种抗氧剂的回收率均大于85%，RSD均小于5.0%。结论本研究建立的高效液相色谱方法可满足对抗氧剂1010和抗氧剂330的检测需要，目前药用卤化丁基胶塞生产工艺中使用的抗氧剂种类较多，对于各种类型的抗氧剂的控制十分必要。

药品包装；卤化丁基胶塞；抗氧剂；HPLC；检测

药品包装影响药品质量安全，与药品直接接触的包装材料和药品质量关系更为密切[1-2]。其中药用卤化丁基胶塞作为直接接触药品的包装材料，因其具有耐化学腐蚀性好、耐酸碱和极性溶剂等诸多优越性能在临床上得到广泛使用。目前临床上注射液及注射剂品种众多，很大部分药品包装使用的是卤化丁基胶塞[3-6]。卤化丁基胶塞是一种高分子材料，其在许多方面因素的影响下会发生老化，因此在卤化丁基胶塞的工艺生产过程中会加入抗氧剂改善其性能，抑制延缓其老化进程[7-9]。抗氧剂按结构可分为酚类、亚磷酸酯类、硫酯类、金属离子类、天然抗氧剂等，由于其结构，可与药物产生相互作用，影响药物稳定性，另外抗氧剂还可能从包装材料迁移到药液中，影响患者用药安全[10]。因此本研究建立了抗氧剂330、抗氧剂1010的检测方法，考察药用卤化丁基胶塞中抗氧剂的添加情况，为药用卤化丁基胶塞的质量控制提供依据。

1.仪器与试剂

图1 混合对照溶液图谱

1.1 仪器液相色谱仪（LC-20A型，日本岛津）紫外检测器（SPD-20A型，日本岛津）；紫外分光光度计（UV-1700型，日本岛津）Agilent C18色谱柱（250×4.6mm,5μm）；柱温箱（AT-330型，日本岛津）；电子天平（AUY220型，日本岛津）。

1.2 试剂四[β-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）丙酸]季戊四醇酯，简称为抗氧剂1010；1,3,5-三甲基-2,4,6-三（3,5-二叔丁基-4-羟基苄基）苯，简称为抗氧剂330；两种抗氧剂均购于EKEAR公司；本研究收集了6批药用卤化丁基橡胶塞包装（购自某医药公司，两种输液瓶：0.9%氯化钠输液瓶，批号分别为20170101、20170102、20170103，葡萄糖输液瓶，批号分别为20161228、20161229、20161230，各三批）；其余试剂均为分析纯或者色谱纯。

2.方法

2.1 检测波长的选择分别称取两种抗氧剂适量，加溶剂配制成对照品溶液，使用紫外分光光度计进行全波长扫面，选择275nm作为检测波长。

2.2 色谱条件的选择经过多次调试，对流动相进行筛选，选择流动相为乙腈：四氢呋喃：水=55∶35∶10，检测波长为275nm，柱温为35℃，流速为1.0ml/min，进样量为20μl。

2.3 溶液制备

2.3.1 对照品溶液的制备

精密称定抗氧剂1010、330适量，加流动相溶解稀释，制备含抗氧剂1010、330含量分别约为1.0mg/ml的对照品溶液，作为对照品储备溶液。

2.3.2 供试品溶液的制备

输液包装上药用卤化丁基橡胶塞取下，洗净，常温晾干，剪碎成颗粒。精密称取胶塞颗粒1.0g,的包装放入烧瓶中，加甲苯40ml，摇匀，加热回流2小时，冷却至50～60℃，搅拌加入甲醇40ml，过滤，用甲苯和甲醇的等比例混合液10ml清洗烧瓶和滤渣，合并后再加等比例混合液稀释至100ml。取上述溶液50ml，水浴蒸干，用流动相溶解并定容至10ml，即为供试品溶液。同时，按照方法制备空白溶液。

图2 空白溶液图谱

3.结果

3.1 专属性取对照品溶液和空白溶液，分别注入液相色谱仪中，记录液相色谱图，溶剂对三种抗氧剂的主峰没有干扰，抗氧剂1010的出峰时间为10.900，抗氧剂330的出峰时间为13.700，见图1-2。

3.2 线性精密量取“2.3.1”项下制备的对照品储备溶液，依次加流动相稀释并定容至刻度，得到线性系列对照溶液①-⑦，抗氧剂1010的浓度分别为0.2103、0.1052、0.05258、0.02629、0.013144、0.006572、0.003286mg/ml，抗氧剂330的浓度分别为0.2008、0.1004、0.0502、0.0251、0.01255、0.006275、0.003138 mg/ml。注入液相色谱仪，记录色谱图。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，计算线性回归方程。抗氧剂1010的线性回归方程为y= 5E+06x+25379，r=0.9995；抗氧剂330的线性回归方程为y=6E+ 06x+34570，r=0.9996；两种抗氧剂的相关系数均大于0.999，表明抗氧剂1010在0.003286～0.2103mg/ml范围内线性关系良好，抗氧剂330在0.003138～0.2008mg/ml范围内线性关系良好。

3.3 检出限与定量限

取“3.2”项下制备的系列线性溶液⑦，使用流动相进行逐步稀释测定，检出限信噪比S/N=3，定量限信噪比S/N=10，抗氧剂1010的检出限为0.548ng，定量限为1.096ng，抗氧剂330的检出限为0.552ng，定量限为1.095ng。

3.4 精密度

取“3.2”线性试验项下对照溶液③对照品溶液，连续进样6次，注入液相色谱仪，记录色谱图。连续进样6次，抗氧剂1010的峰面积RSD为1.5%，抗氧剂1010的峰面积RSD为0.8%，均小于2.0%，表明在该条件下两种抗氧剂精密度良好。

3.5 稳定性试验

取“3.2”线性试验项下对照溶液③对照品溶液，分别在室温放置0h和24h后，注入色谱仪。抗氧剂1010的峰面积RSD为1.7%，抗氧剂330的峰面积RSD为1.3%，均小于2.0%，表明在本实验条件下，两种抗氧剂在24h内稳定。

3.6 回收率试验

取“2.3.1”项下制备的对照品储备溶液，0.1、0.5、2.0ml分别加入样品中，按照“2.3.2”项下供试品溶液的制备方法操作，每个浓度平行制备3份。注入色谱仪，记录色谱图。抗氧剂1010和抗氧剂330的平均回收率均大于85%，RSD小于5.0%，表明在本实验条件下，两种抗氧剂的提取回收率良好。结果见表1。

表1 两种抗氧剂的回收率试验结果

3.7 样品测定

按照“2.3.2”项下供试品溶液的制备方法对6批药用卤化丁基胶塞进行处理，制备样品供试液，按照上述色谱条件进样，记录色谱图，样品中两种抗氧剂的含量测定结果见下表2。6批药用卤化丁基胶塞中两种抗氧剂的含量均未检出（小于检出限）。

表2 药用卤化丁基胶塞中两种抗氧剂的含量测定结果

4.讨论

目前药用卤化丁基胶塞生产工艺中使用的抗氧剂种类较多，本实验对抗氧剂1010和抗氧剂330进行初步研究，实验中购买的市售0.9%氯化钠注射液和葡萄糖注射液包装所用的药用卤化丁基胶塞中抗氧剂1010和抗氧剂330的含量低于实验方法的检出限。另外，研究中也发现提取出其他未知物质，需要进行下一步的确证。市场上生产药用输液包装的厂家众多，并且质量参差不齐，对于各种类型的抗氧剂的控制十分必要。

[1]孙会敏,杨锐,张朝阳,等.2015年版《中国药典》提升药用辅料科学标准体系强化我国药品质量[J].中国药学杂志,2015,50（15）∶1353-1358.

[2]武瑞平.浅析药品包装[J].疾病监测与控制杂志,2016（9）∶772-772.

[3]李立根,张毅兰.药用胶塞及其与药品的相容性简述[J].中国医药工业杂志,2015,46（12）∶1366-1371.

[4]张宇.药用丁基胶塞与药物相容性研究现状和展望[J].天津药学,2010,22（1）∶72-74.

[5]郭志鑫,姜典财,黄志禄,等.药用卤化丁基胶塞质量状况分析[J].药物分析杂志,2011,31（2）∶399-401.

[6]郑芳如,黄瑜,周兰贞,等.丁基胶塞在注射剂领域中的选用策略[J].中国药事,2016（2）∶137-140.

[7]浦雨伟,崔萍,吴娟,等.药用丁基胶塞中抗氧剂264、1010、5057迁移研究[J].药物分析杂志,2016,36（12）∶2231-2240.

[8]张芦燕,王曼泽,王翔宇,等.聚丙烯瓶装氯化钠注射液中抗氧剂迁移量的测定[J].西北药学杂志,2013,28（6）∶583-587.

[9]陈健,张桂云,梁进杰.聚丙烯中抗氧剂168含量的定量分析[J].塑料科技,2014,42（3）∶103-106.

[10]张磊,黄葆华.5%葡萄糖注射液中外源性抗氧剂的测定[J].安徽医药,2010（12）∶1400-1402.

赵曼（1989-），女，陕西西安人，本科，助教，研究方向为生物技术及应用。