土大黄根提取物对实验性银屑病小鼠支配器官形态学的影响

艾西木江·热甫卡提，麦合素提·卡迪尔，阿不都吉力力·阿布都艾尼，再妮皮古丽·巴拉提，热比姑丽·伊斯拉木

（1.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所，新疆乌鲁木齐830049；2.新疆维吾尔医方剂学实验室，新疆乌鲁木齐830049；3.新疆喀什疏勒县巴仁乡第二中学，新疆喀什844000）

·实验研究·

土大黄根提取物对实验性银屑病小鼠支配器官形态学的影响

艾西木江·热甫卡提1，2，麦合素提·卡迪尔1，2，阿不都吉力力·阿布都艾尼1，2，再妮皮古丽·巴拉提3，热比姑丽·伊斯拉木1，2

（1.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所，新疆乌鲁木齐830049；2.新疆维吾尔医方剂学实验室，新疆乌鲁木齐830049；3.新疆喀什疏勒县巴仁乡第二中学，新疆喀什844000）

目的探讨土大黄根提取物对实验性银屑病样模型支配器官形态学变化。方法将咪喹莫特（IMQ）乳膏涂抹BALB／c小背部皮肤形成银屑病样动物模型，观察土大黄根提取物（1，2，4 g／kg）对小鼠支配器官如脑、心、肝脏器指数及其形态学的影响。结果与模型组比较，1，2，4 g／kg组均对小鼠脑、心、肝，脏器指数的影响无统计学差异（P＞0.05），同时对脑、心形态学未见明显异常，但可引起肝细胞再生、嗜酸性变性。结论土大黄根提取物对咪喹莫特诱导实验性银屑病小鼠支配器官肝脏组织病理学改变有一定保护和修复作用。

土大黄根；实验性银屑病；支配器官；形态学

土大黄Rumex L.是蓼科（Polyonaceae）酸模属(Rumex）植物，多年生草本。维吾尔药物名分别为阿提库拉克（At kulak）、欧麻孜（Hummaz）、土日谢（Turux）、塔给库斯（Tag kusi），其药用部位为全草、叶子、根茎及根，用于肾、肝及胃肠疾患，皮疹、皮肤瘙痒等[1－2]。本研究中探讨了土大黄根提取物对咪喹莫特（IMQ）诱导实验性银屑病模型小鼠支配器官（如脑、心、肝）的脏器指数及其形态学的影响，可为土大黄根提取物治疗银屑病的机制探讨提供参考依据。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试药、仪器与动物

1.1.1 药材、药品

土大黄根（新疆华安中药饮片有限责任公司，批号为12110），由新疆大学资源与环境科学学院努尔巴依·阿不都沙力克教授鉴定为土大黄根。咪喹莫特乳膏（IMQ，四川明欣药业有限责任公司，国药准字H20030128，批号为141201）；Silkee脱毛霜（美国Stella Jone′s Inc.）；醋酸地塞米松片（DXM，浙江仙琚制药股份有限公司，国药准字H33020822，批号为140670，规格为每片0.75mg）；消银颗粒(XYKL，陕西康惠制药股份有限公司，国药准字Z20000019，批号为130809）；异常黏液质成熟剂（MB，批准文号M20052633，新疆维吾尔自治区维吾尔医医院制剂室)。

1.1.2 试剂

甲醛溶液（成都市科龙化工试剂厂，批号为20130322）；三氯醋酸（国药集团化学试剂有限公司，批号为20131104）；苏木色精（CAS＃517－28－2，进口分装，批号为110405），曙红水溶（伊红，天津市福晨化学试剂厂，批号为20120612）；二甲苯（天津市永晟精细化工有限公司，批号为20140325）；无水乙醇（天津市光复科技发展有限公司，批号为20141020）；盐酸（天津市风船化学试剂科技有限公司，批号为20130218）；中性树胶（中国上海懿洋仪器有限公司，批号为20120326）；高效切片石蜡（上海华永石有限公司，批号为20130710）。

1.1.3 仪器

CPA124S型电子天平（赛多利斯科学仪器＜北京＞有限公司）；JM3100型电子天平（余姚纪铭称重检验设备有限公司）；LEICA TP1020生物组织脱水机（德国莱卡公司）；KD－BMⅢ型生物组织包埋机（浙江金华科迪仪器设备有限公司）；KZPG－1A型摊片烤片机（天津天利航空机电有限公司）；LEICA RM2235型切片机，LEICA DM4000型生物显微镜，LEICA LASV4.5型显微成像系统均由德国莱卡公司提供。

1.1.4 实验动物

BALB／c小鼠，120只，雌性，SPF级，日龄42～70 d，由新疆医科大学医学实验动物中心提供，生产许可证号为SCXK（新）2011－0004，使用许可证号为SYXK（新）2011－0005。

动物饲养条件：于新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所药物安全性评价中心SPF级动物房，自由饮水、摄食，室温20～26℃，相对湿度40%～70%，光照12 h，黑暗12 h。

动物实验经新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所药物安全性评价中心审核，符合动物伦理委员会的管理准则。实验开始前检疫，经一般行为观察，选用符合要求的112只小鼠进行试验。

1.2 方法

1.2.1 土大黄提取物的制备

土大黄根用乙醇室温密闭浸泡1 h后回流提取3次，过滤，合并滤液减压浓缩，真空干燥，得干膏粉，实验时配成所需浓度。

1.2.2 建模[3－4]

取120只BALB／c小鼠，适应性饲养，选用符合要求的112只动物，分为2组，对照组（12只）、IMQ诱导模型组（100只）。背部用Silkee脱毛霜脱毛，背部涂抹面积约为2 cm×1.5 cm。对照组小鼠背部无毛区每日涂抹凡士林，模型组小鼠背部无毛区涂以5%IMQ，60 mg／d（有效药物为3mg／d），连续6 d。

1.2.3 对银屑病样模型小鼠组织病理学的影响

造模成功后，选用符合要求的84只小鼠随机分为模型组、地塞米松组（DXM，1.02 mg／kg）、消银颗粒组（XYKL，1.577 g／kg）、异常黏液质成熟剂组（MB，2 g／kg）、土大黄根醇提物低剂量组（RE－L，1 g／kg）、土大黄根醇提物中剂量组（RE－M，2 g／kg）、土大黄根醇提物高剂量组（RE－H，4 g／kg），每组12只。各组灌胃给予相应药物，对照组灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠（0.5%CMC－Na）。各组灌胃容积均为每10 g体重0.2 m L，1次／天，连续14 d。小鼠每周测1次体质量，根据体质量变化随时调整给药剂量。实验结束时，取BALB／c小鼠脑、心脏、肝脏，称重，计算心脏、脑、肝脏脏器指数（脏体比例），公式为脏器指数＝脏器质量／体重；同时，对脑、心脏、肝脏进行组织病理学检查。

1.2.4 组织病理学检查

固定：在研究1中BALB／c小鼠，取心、肝、脑组织固定于15%中性福尔马林。

取材：脑，取脑底部，厚度0.15～0.25 cm；心脏，取心尖1块，厚度0.15～0.25 cm；肝脏，取肝大叶2块，厚度0.15～0.25 cm。

脱水、浸蜡：分别用80%乙醇（1 h），95%乙醇（1 h）、95%乙醇（1 h），无水乙醇（1 h）、无水乙醇（1 h），二甲苯1（1 h）、二甲苯2（1 h），浸蜡1（1 h）、浸蜡2（1 h）、浸蜡3（1 h）。

包埋：用液体石蜡。

切片：3μm厚度切片。

染色：在65℃恒温烤箱考片20 min，分别用二甲苯1（5min）、二甲苯2（5min），无水乙醇（5min）、无水乙醇（5 min），95%乙醇（5 min），80%乙醇（2 min），1%盐酸（20 s），过水（10min），伊红（5min），80%乙醇（20 s），95%乙醇（15 s），无水乙醇（10 s），二甲苯1（2 min）、二甲苯2（2～10min）。

封片：用中性树胶封片。

在光学显微镜下，观察各组小鼠脑、心、肝组织病理学检查。

1.3 统计学处理

采用SPSS17.0统计软件，所得数据用均数±标准差表示，One－Way ANOWA方法进行多组样品均数的比较，检验水准α＝0.05。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠脏器指数变化

与对照组比较，模型组脑、心、肝，脏器指数变化无统计学差异（P＞0.05）。与模型组比较，各给药组对小鼠脑指数、心脏指数、肝脏指数的影响均无统计学差异（P＞0.05）。结果见表1。

表1 小鼠脏器指数变化（s，mg／g，n＝12）

表1 小鼠脏器指数变化（s，mg／g，n＝12）

组别CON Model DXM XYKL MB RE－L RE－M RE－H剂量（g／kg）－0.001 1.577 2124脑指数20.490 0±2.021 0 21.680 0±1.233 9 21.072 2±1.699 1 21.287 2±2.227 6 21.118 5±1.139 0 21.840 6±1.129 9 20.953 3±1.843 5 20.590 9±1.233 1心指数6.330 0±1.042 0 6.334 0±0.870 7 6.863 6±0.944 6 6.564 5±0.609 0 5.685 3±0.646 7 6.270 5±1.157 7 6.164 2±0.774 3 6.100 2±0.874 5肝指数52.710 8±8.539 3 53.402 0±4.651 3 53.586 7±4.254 1 51.734 3±5.081 9 50.127 4±5.637 9 50.386 4±4.040 7 51.892 4±4.624 8 50.868 0±4.163 7

2.2 脑组织病理学变化

对照组、模型组、阳性对照组、土大黄根提取物组小鼠脑蛛网膜下腔及脑软膜血管结构正常、脑皮质区及髓质区结构清晰，层次分明，均未见明显异常。结果见图1。

2.3 心脏组织病理学变化

对照组、模型组、阳性对照组、土大黄根提取物组小鼠心内膜、心肌、心外膜3层结构清楚、完整，心肌纤维结构清楚、横纹清晰，均未见明显异常。结果见图2。

图1 各组小鼠脑组织HE染色结果（×200）

图2 各组小鼠心脏HE染色结果（×200）

图3 各组小鼠肝脏HE染色结果

2.4 肝脏组织病理学变化

对照组肝小叶结构完整。肝细胞排列呈索状，以小叶中央静脉为中心呈放射状排列。肝细胞胞浆红染，细胞核多位于中央。与对照组比较，模型组小鼠肝细胞中度水肿，嗜酸性变性。DXM组小鼠肝细胞重度水肿，XYKL组和MB组肝细胞轻度水肿，土大黄提取物组肝细胞再生、嗜酸性变性。结果见图3。

3 讨论

银屑病是一种常见的慢性复发性炎症性疾病。据全球流行病学调研，自然人群的银屑病患病率可达到8.5%（如挪威），距离赤道越近国家或地区（如埃及、坦桑尼亚、斯里兰卡、台湾）人群银屑病患病率比距离赤道越远国家或地区（如欧洲、澳大利亚）人群患病率低，无明显性别差异[5]。由于本病发病率较高，易复发，病程较长，尤以青壮年发病为主，故对患者的身体健康和精神影响甚大，因此银屑病是当前皮肤科领域内重点研究的疾病之一。国内外对本病的病因和发病机理都进行了不少研究，虽然取得了一些成绩，但至今尚未得出肯定的结论。对本病发生和发展的主要原因或诱因有以下学说[6]：1）遗传因素，临床研究已证明，本病常有家族性发病，并有遗传倾向，一般约为30%；2）免疫因素，近年来多已被认为银屑病是免疫或炎症介导的疾病；3）感染因素，细菌感染、真菌感染、病毒感染；4）内分泌因素；5）精神因素，皮肤是人体内部心理活动的表达器官之一，从某种意义讲，银屑病属于皮肤心身疾病的一种；6）生活习惯、药物因素、环境因素，饮酒、吸烟、精神紧张等，β1受体阻断药、非甾体类抗炎药、钙通道阻滞剂等。

维吾尔医学认为[7－9]，体内外环境因素的影响使机体的自然力下降而产生的异常体液沉积在皮肤组织，沉淀物刺激皮肤组织，破坏皮肤的气质，同时影响皮肤的排泄力、改造力、形成力等，导致银屑病，即异常体液、机体的自然力和免疫力下降是银屑病的发生和发展的主要原因。维吾尔医将银屑病分为异常黏液质型、异常胆液质型、异常黑胆液质型和异常血液质型等4种辨证分型。自治区维吾尔医院等对全疆5家医院764例银屑病患者异常体液分析，其中异常黏液质477例（62.43%）、异常胆液质106例（13.87%）、异常黑胆质103例（13.49%）、异常血液质78例（10.21%），以异常黏液质为主要。长期临床实践表明[10－14]，维吾尔医治疗银屑病等皮肤病有独到之处和特色，积累了丰富的实践经验和成果，形成了较成熟的综合治疗方法及技术。

维吾尔医[15－16]解剖学与现代医学解剖学基本相同，但是对其生理学的描述有所不同，主要区别是，维吾尔医学认为各器官均有与自己功能相应的特有气质等。维吾尔医学根据器官各自的功能和作用，将他分为支配器官（艾杂衣热依色）和被支配器官（艾杂衣买日欧色）两大类。支配器官（艾杂衣热依色）系指脑、心、肝3个主要器官，不但是保存着人体的三大力，即精神力、生命力和自然力，也是这三大力的始发原点。在保持人的生存、繁殖和管理其智力、体力活动中，不但起着重要的作用，而且通过被支配器官的间接作用，全方位地调整、充实和控制机体的一切生命活动，从而维持全身的整体性。本研究中探讨土大黄根提取物对咪喹莫特诱导实验性银屑病模型小鼠支配器官如脑、心、肝，脏器指数及其形态学的影响，为维吾尔医学角度阐明土大黄根提取物治疗银屑病机制提供一定的科学依据。

本研究结果表明，与对照组比较，模型组小鼠肝细胞中度水肿，嗜酸性变性。提示实验性银屑病模型小鼠支配器官肝脏受损。与模型组比较，1，2，4 g／kg组均对小鼠脑、心、肝脏器指数的影响均无统计学差异（P＞0.05），同时对脑、心形态学未见明显异常，但引起肝细胞再生、嗜酸性变性土大黄根提取物对咪喹莫特诱导实验性银屑病小鼠支配器官肝脏组织病理学改变有一定保护和修复作用，这与维吾尔医治疗银屑病经验，银屑病除系统治疗外，还有营养支配器官功能相似[17]，但仍有待于深入研究。

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Effect of Rumex L.Root Extract on M orphology of Dom inant O rgans in M ice w ith Experim ental Psoriasis

Haxim jan Rapkat1,2,Mahsutjan Kadir1,2,Abdujilil Abdugheny1,2,Zaynapgul Barat3,Rabigul Islam1,2

(1.Inistitute of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049;2.Xinjiang Laboratory of Traditional Uyghur Medicine Prescription,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049;3.The Second Middle School of Barin Township of Kashgar Shule Country,Kashi,Xinjiang,China 844000)

Ob jective To investigate the effects of Rumex L.root extract on the morphology of dominant organs in mice with experimental psoriasis.M ethods The experimental psoriasis model was established in BALB／c mice by applying Imiquimod(IMQ)cream,then to observe the effects of Rumex L.root extract(1,2,4 g／kg)on mice′s dominating organs such as brain,heart,liver,organ index and morphology.Results Compared with the model group,the effects of 1,2,4 g／kg groups on the brain,heart,liver and organ index of mice had no statistically different(P＞0.05),at the same time,there was no obvious abnormality in brain and heart morphology,but it could cause liver cell regeneration,acidophilic degeneration.Conclusion Rumex L.root extract can protect and repair the morphological damage of dominating organ of liver on experimental psoriasis mice by induced IMQ.

Rumex L.root;experimental psoriasis;dominating organ;morphology

R285.5

A

1006－4931(2017)11－0004－05

2017－03－10；

2017－03－21)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.11.002

新疆维吾尔自治区卫生计生委青年科技人才专项科研项目[2015Y40]。

艾西木江·热甫卡提，男，哈萨克族，大学本科，实验师，主要从事维药药理毒理学研究，（电话）0991－2565663（电子信箱）736383511＠qq.com。

热比姑丽·伊斯拉木，女，维吾尔族，博士研究生，副研究员，主要从事维药药理毒理学研究，（电话）0991－2565663（电子信箱）rabiya272＠126.com。