全自动粪便分析仪临床应用评价

刘 辉，王 萍，王立伟

（中日友好医院 临床检验中心，北京 100029）

技术与方法

全自动粪便分析仪临床应用评价

刘 辉，王 萍，王立伟

（中日友好医院 临床检验中心，北京 100029）

粪便检查是临床常规检查项目之一，一般包括理学检查、有形成分检验和隐血试验[1]。粪便常规检验目前仍大多采用原始的手工涂片镜检法。随着医院检验科自动化、标准化进程的不断深入，粪便检验自动化分析也不断在发展。我们通过对爱威AVE-562全自动粪便分析仪（以下简称分析仪）进行性能验证，并将其检测结果与传统镜检方法进行对比，以评估其临床应用价值[2-4]。

1 材料

1.1 样本的来源

中日友好医院2015年11月～2016年11月的住院患者，其中男 632例、女 537例；年龄 7d～92岁，平均 58.58岁，进行粪便常规检验的残余标本。

1.2 仪器与试剂

爱威AVE-562全自动粪便分析仪；全自动粪便分析仪用稀释液及清洗液；显微镜（型号：Olympus CX41）；血红蛋白标准液购自中科执信生物技术有限公司（日本Sysmex公司，批号：62842101）；红细胞悬液（浓度为 8、500、800、5000、10000 个/μl），生理盐水，便隐血试纸购自中新科炬生物技术有限公司（批号：201505041）。

2 方法

2.1 隐血试纸条检出限验证

检出上限验证：取生理盐水将血红蛋白标准液分别配制成浓 度为 4000、3000、2000、1000μg/ml的血红蛋白 溶液，进行便隐血实验，每个浓度重复1次。5min内反应线与质控线同时出现一条色带结果判读为阳性，质控线出现一条色带，反应线无色带出现结果判读为阴性。出现阳性结果的最大浓度值为其检出上限。

检出下限验证：取生理盐水将血红蛋白标准液分别配制成浓度0.4、0.2、0.1μg/ml的血红蛋白溶液，进行便隐血实验，每个浓度重复1次，阳性判定同上。出现阳性结果的最小浓度值为其检出下限。

2.2 形态学镜检检出率

将8个/μl浓度的红细胞悬液使用分析仪检测10次，记录结果。检出率=检出次数/总检测次数×100％。

2.3 回收率

取2份正常粪便标本（3g）各加入浓度为800个/μl和5000个/μl的红细胞悬液10ml，充分搅拌均匀后使用分析仪检测10次，计算回收率。

2.4 精密度

将浓度为500个/μl的红细胞悬液使用分析仪检测10次，计算均值、变异系数CV。

2.5 携带污染

分别将红细胞悬液 1（5000个/μl），红细胞悬液 2（10000个/μl）和阴性参照（生理盐水）交叉置于试管架中使用分析仪上机检测10次，记录结果。

2.6 比对试验

有经验的检验技师对同一份标本进行手工法和仪器法检测。手工法严格按照全国临床检验操作规程（第4版）的要求执行[1]，即在洁净玻片上加等渗盐水1～2滴，选择粪便不正常部分或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。涂片厚度以能透过印刷物字迹为度。至少观察10个视野。仪器法具体操作详见仪器操作说明书。使用统计软件SPSS19.0进行统计分析。

3 结果

3.1 隐血试验检出限验证结果

当血红蛋白浓度为2000μg/ml时，隐血试验结果为阳性，为 3000μg/ml与 4000μg/ml时，由于带现象隐血试验结果出现弱阳性[5]，符合厂家提出的检出上限为2000μg/ml的声明。当血红蛋白浓度为0.1μg/ml时，隐血结果为弱阳性，为0.2及0.4μg/ml时，隐血结果阳性程度增强，符合厂家提出的检出下限为0.1μg/ml的声明。

3.2 形态学镜检结果

10 次检测结果分别为 7、2、7、7、4、1、2、5、4，2/HPF，共检出次数为10次，检出率：100％。

3.3 回收率结果

正常粪便标本3g添加10ml 800个/μl的红细胞悬液混匀10次检测结果均值783.6/HPF，回收率为98％，正常粪便标本3g添加10ml 5000个/μl的红细胞悬液混匀检测结果均值为4618.7/HPF，回收率为92.4％。

3.4 精密度结果

500个/μl的红细胞悬液 10次检测结果均值为486.60/HPF，CV=8.3％。

3.5 携带污染结果

将5份5000个/μl的红细胞悬液与5份阴性参照标本交叉放置进行自动检测，阴性参照标本检测结果均为0。将5份10000个/μl的红细胞悬液与5份阴性参照标本交叉放置进行自动检测，阴性参照标本检测结果均为0，仪器检测避免了携带污染。

3.6 比对试验结果在进行检测的1169份粪便标本中，分析仪检测红细胞的灵敏度为85.5％，特异度为96.5％，与手工镜检结果的符合率为95％；分析仪检测白细胞的灵敏度为77.6％，特异度为98.0％，与手工镜检结果的符合率为96％。具体结果见表 1、2。

表1 分析仪与手工镜检检测粪便标本中RBC结果（份数）

表2 分析仪与手工镜检检测粪便标本中WBC结果（份数）

4 讨论

粪便检查由于其方便、标本易得、无创等特点，成为临床三大常规检查之一，对肠道传染病防治、消化道出血诊断、消化道肿瘤筛查等方面有着重要作用。目前，国内已有仪器自动化检测粪便的相关研究出现，马飞等[6]分别使用来源于2个厂家的粪便自动化分析仪对2252例中国人民解放军总医院住院患者的粪便标本进行粪便常规检测，以人工镜检作为金标准，对2台仪器的检测结果进行分析，认为粪便分析仪与手工镜检的检测结果有较好的一致性。AVE-562粪便分析仪实现了粪便检查的全自动化，仪器自动加入稀释液、自动混匀过滤、自动加样至一次性计数板，并将其传送至显微镜下进行采图，图片传输至电脑后，由电脑进行初步识别，再进行人工审核。有助于提高粪便检查的标准化，避免了交叉污染，保证了生物安全。智能视域调节技术和多层面自动聚焦技术的应用提高了检测的阳性率。本研究对分析仪进行了性能验证，符合厂家声明的性能指标。并对临床标本同时使用仪器和人工进行检测，将得到的结果比对分析，发现分析仪在检测WBC、RBC方面有较好的一致性。但粪便常规其他有形成分检测数据不足，无法评估其一致性。分析仪在很大程度上解决了粪便标本前处理的问题，有助于实现粪便常规检查的标准化、规范化，从而提高粪便检查的阳性率。但是无论任何原理的粪便自动化设备，其阳性有形成分的发现均应对仪器拍摄的实景图像进行人工审核通过确认后方可发出阳性报告[7]。因此如果将全自动粪便分析仪投入临床使用，仍需不断提高仪器的检验和识别技术，同时必须要制订复检规则，进行人工审核来保证检测结果的真实性和准确性。

[1] 尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程（第四版）[M].北京：人民卫生出版社，2015.177.

[2] 陈先荣，李智，刘一平．NCCLS9-A文件在全自动生化分析仪评价中的应用[J]．实验与检验医学，2010，4（28）：407-408.

[3] 李永毅.尿液分析仪和镜检法在尿液检测中的相关性分析[J].中国实用医药，2013，8（11）：121-122.

[4] 刘保廷．UF-100尿沉渣分析仪测定尿液有形成分与显微镜检查结果的比对分析[J].当代医学，2010，16（22）：2-3.

[5] 陈晓红，朱学涛.化学法和免疫法检测消化道出血的价值和互补关系[J].实验与检验医学，2015，33（5）：643-645.

[6] 马飞，车洪智，向代军，等.粪便自动检测分析仪的临床应用评价[J].检验医学与临床，2015，12（9）：1231-1232.

[7] 丛玉隆.尿液和粪便有形成分自动化分析专家共识[J].临床检验装备杂志，2016，2（3）：29.

2017-01-13

2017-02-27