尿NGAL、KIM-1和IL-18联合检测对儿童急性肾损伤早期诊断的价值

祁洁，王钊华，赵鸿斌，董自杰

（1.石家庄市第一医院检验科，河北石家庄050000；2.石家庄市第四医院检验科，河北石家庄050011；3.石家庄市第三医院检验科，河北石家庄050011）

尿NGAL、KIM-1和IL-18联合检测对儿童急性肾损伤早期诊断的价值

祁洁1，王钊华2，赵鸿斌1，董自杰3

（1.石家庄市第一医院检验科，河北石家庄050000；2.石家庄市第四医院检验科，河北石家庄050011；3.石家庄市第三医院检验科，河北石家庄050011）

目的探讨尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)及白细胞介素-18(IL-18)联合检测在儿童急性肾损伤(AKI)早期诊断中的价值。方法选择2015年1月至2016年8月期间石家庄市第一医院儿科诊治的32例AKI患儿为研究对象，检测不同时间及不同分期AKI患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18和血肌酐的变化。结果AKI患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18在诊断前3 d分别为(1.23±0.28)μg/mL、(37.58± 5.88)ng/mL、(30.35±6.21)ng/mL，在诊断前2 d分别为(1.77±0.39)μg/mL、(43.29±6.32)ng/mL、(36.49±9.35)ng/mL，及诊断前1 d水平(2.28±0.71)μg/mL、(60.38±12.83)ng/mL、(58.32±20.12)ng/mL，均明显依次升高，差异均有统计学意义(P˂0.05)；但是血肌酐在诊断前1 d与诊断前2 d、3 d比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平在AKI 1期为(2.68±0.48)μg/mL、(69.23±5.31)ng/mL、(65.84±6.43)ng/mL，2期为(3.19±0.41)μg/mL、(60.38±12.83)ng/mL、(73.29±6.68)ng/mL，3期为(3.81±0.42)μg/mL、(89.67±6.22)ng/mL、(81.31±7.42)ng/mL，均依次升高，差异均有统计学意义(P˂0.05)。结论尿NGAL、KIM-1、IL-18在儿童AKI早期即可明显升高，三者联合检测对早期诊断儿童AKI具有重要意义。

急性肾损伤；中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；肾损伤分子-1；白细胞介素-18

急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)目前在我国的发病率呈逐年升高的趋势，是肾内科、重症医学科临床常见急重症之一[1]。AKI也是严重影响重症患儿预后的常见疾病，国际肾脏病和急救医学界提出AKI的概念代替既往急性肾功能概念的出发点就是希望在患儿已经发生肾功能异常但尚未进入肾衰竭阶段时予以及时诊断、干预[2]。目前认为AKI患儿预后不佳的最重要的原因是缺乏早期诊断的可靠指标，无法及时发现AKI并采取治疗措施。因此，寻找准确、可靠的无创标志物对儿童AKI进行早期诊断具有重要意义。本研究旨在探讨尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)及白细胞介素-18(IL-18)和其在儿童AKI早期诊断中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料采用临床前瞻性研究，选择2015年1月至2016年8月期间我院儿科诊治的200例肾脏病患儿为研究对象，其中有32例患儿合并AKI，男性20例，女性12例；年龄5～14岁，平均(9.2±6.1)岁；过敏性紫癜10例、药物中毒8例、肾病综合征6例及心肺搭桥术后6例，其他2例。排除标准：存在慢性肾脏病基础、急进性肾小球肾炎、梗塞性肾病及正在服用激素或免疫抑制剂治疗的患儿。

1.2 AKI诊断及分期标准[3]肾功能在48 h内迅速降低，血肌酐升高在26.4 mol/L及以上，或者其水平相对于基础值升高在50%及以上；或者尿量˂ 0.50 mL/(kg·h)≥6 h，并将其分为1期、2期、3期。

1.3 血肌酐及尿NGAL、尿KIM-1及尿IL-18的测定患儿入院后每天对尿NGAL、尿KIM-1及尿IL-18进行测定。方法如下：收集患儿晨尿8 mL，以3 000 r/min的速度离心10 min，将上清液收集待测。尿NGAL、KIM-1及IL-18的测定采用酶联免疫吸附法(ELISA)，严格按照按照试剂盒说明书进行操作。血肌酐的检测采用全自动生化仪进行检测。

1.4 统计学方法应用SPSS19.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，多组样本均数比较采用方差分析，两样本均数比较采用t检验，均以P˂0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AKI患儿不同时间尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比较AKI患儿诊断当天尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平均明显高于诊断前(1 d、2 d及3 d)，差异均有统计学意义(P˂0.05)；患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18在诊断前3 d、诊断前2 d及诊断前1 d水平均明显依次升高,差异均有统计学意义(P˂0.05)；但是血肌酐在诊断前1 d与诊断前2 d、3 d比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

表1 AKI患儿不同时间尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比较(x-±s，n=32)

2.2 不同分期AKI患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比较32例AKI患儿中有10例患儿为1期，13例患儿为2期，9例患儿为3期；尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平在AKI 1期、2期及3期患儿水平均依次升高，差异均有统计学意义(P˂0.05)，见表2。

表2 不同分期AKI患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比较(x-±s)

3 讨论

儿童急性肾损伤发病率近年来呈逐年上升趋势，Duzova等[4]研究认为引起儿童AKI最常见的病因包括缺氧缺血性肾病、脓毒症、肾病综合征、肾前性因素及药物因素等等。血肌酐等传统肾功能指标可以反映肾小球滤过率(GFR)的改变，但其应用于早期AKI的诊断具有较差的敏感性，首先因为血肌酐水平可受到多种因素的影响如年龄、性别、营养状况及肌肉代谢情况等；其次，肾脏具有强大的储备、代偿能力，血肌酐只有在GFR下降到正常值的一半左右时才会明显上升，因此难以及时、准确地对肾功能的改变做出反应。本研究中AKI患儿血肌酐在诊断前1 d与诊断前2 d、3 d比较差异无统计学意义(P＞0.05)，进一步说明了血肌酐对AKI早期诊断的敏感性较差。因此，进一步探索可以早期诊断AKI的可靠标志物，以早期识别、干预儿童AKI，对改善患儿预后具有重要的临床意义。

目前研究较多的AKI生物学标志物主要包括胱抑素-C、尿N-乙酰βD氨基葡萄糖苷酶、尿微量白蛋白、NGAL、KIM-1、血管内皮生长因子、IL-18等等[5]。本研究针对尿NGAL、KIM-1、IL-18联合检测对儿童AKI的早期诊断价值进行了探索。其中NGAL是一种急性期反应蛋白，目前被较多的临床研究证实AKI患者早期血清和尿中NGAL水平即可明显增高。NGAL的生物学功能可能包括参与趋化、免疫应答、减轻氧化应激损伤；当机体发生炎症反应或上皮细胞受到损伤性刺激时，NGAL才被诱导并且在受损的肾小管高表达[6]。研究证实NGAL诊断AKI的敏感度和特异度分别高达90%和99.5%[7]。KIM-1作为一种新的Ⅰ型跨膜糖蛋白可高表达于损伤后的肾近曲小管上皮细胞，可以参与其早期损伤和修复以及肾间质的纤维化过程。何楠等[8]研究发现尿中KIM-1在AKI患者明显升高，其原因可能与氧化应激反应有关，并且指出检测尿中KIM-1水平有助于AKI的早期临床诊断。IL-18是一种具有促炎症反应作用的、主要是由单核巨噬细胞产生的一种细胞因子，其可在AKI发生后在近端肾小管上皮细胞内参与炎症和免疫反应[9]。研究证实尿IL-18水平与AKI的严重程度呈正相关[10]。我们对AKI患儿不同时间尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平进行了比较，发现AKI患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18在诊断前2 d即开始显著升高，且临近诊断当天其升高水平越来越明显，并且对于已经诊断后的AKI患儿，其尿NGAL、KIM-1、IL-18水平随着AKI分期的增高而增高，说明尿NGAL、KIM-1、IL-18水平不仅在AKI早期升高明显，并且与AKI的严重程度密切相关。

综上所述，早期对AKI进行识别、诊断是改善患儿预后的关键，尿NGAL、KIM-1、IL-18在儿童AKI早期即可明显升高，三者联合检测对早期诊断儿童AKI具有重要意义。

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Value of combined detection of urinary NGAL,KIM-1 and IL-18 in early diagnosis of children with acute kidney injury.

QI Jie1,WANG Zhao-hua2,ZHAO Hong-bin1,DONG Zi-jie3.
1.Department of Clinical Laboratory,the First Hospital of Shijiazhuang,Shijiazhuang 050000,Heibei,CHINA;2.Department of Clinical Laboratory,the Fourth Hospital of Shijiazhuang,Shijiazhuang 050011,Heibei,CHINA;3.Department of Clinical Laboratory,the Third Hospital of Shijiazhuang,Shijiazhuang 050011,Heibei,CHINA

ObjectiveTo investigate the value of combined detection of urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL),renal injury molecule-1(KIM-1)and interleukin-18(IL-18)in early diagnosis of children with acute kidney injury(AKI).MethodsThirty-two cases of children with AKI who diagnosed and treated in Department of Pediatrics in the First Hospital of Shijiazhuang from January 2015 to August 2016 were enrolled in this study.The changes of urinary NGAL,KIM-1,IL-18 and serum creatinine(Scr)in children with AKI at different time and different stages were compared.ResultsThe levels of urinary NGAL,KIM-1 and IL-18 in the children with AKI were signifi-cantly increased at 3 d,2 d,1 d before diagnosis in turn：at 3 d before diagnosis(1.23±0.28)μg/mL,(37.58±5.88)ng/mL, (30.35±6.21)ng/mL,2 days before diagnosis(1.77±0.39)μg/mL,(43.29±6.32)ng/mL,(36.49±9.35)ng/mL,and 1 day before diagnosis(2.28±0.71)μg/mL,(60.38±12.83)ng/mL,(58.32±20.12)ng/mL,with statistically significant difference(P˂0.05);However,there was no significant difference in Scr between at 1 d and the 2 d,3 d before diagnosis(P＞0.05).Urinary NGAL,KIM-1,IL-18 and Scr levels were significantly increased in AKIⅠ,Ⅱ,Ⅲstages in turn：AKIⅠstage(2.68±0.48)μg/mL,(69.23±5.31)ng/mL,(65.84±6.43)ng/mL,Ⅱstage(3.19±0.41)μg/mL,(60.38±12.83)ng/mL, (73.29±6.68)ng/mL,andⅢstage(3.81±0.42)μg/mL,(89.67±6.22)ng/mL,(81.31±7.42)ng/mL,with statistically significant difference(P˂0.05).ConclusionUrinary NGAL,KIM-1 and IL-18 were significantly elevated in children with earlyAKI,and the combined detection of them have great significance in the early diagnosis ofAKI in children.

Acute renal injury(AKI);Neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL);Renal injury molecule-1(KIM-1);Interleukin-18(IL-18)

R726.9

A

1003—6350（2017）11—1779—03

2016-12-09)

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.11.020

董自杰。E-mail：wanghuangrx@163.com