泽泻汤加味方对高盐条件下Dahl大鼠高血压调节及肾功能的保护作用

2017-06-05张婷婷蒋希成吴鑫宇陆雪健滕尧张树峰

中医药信息 2017年3期

关键词：泽泻汤加缬沙坦

张婷婷，蒋希成，吴鑫宇，陆雪健，滕尧，张树峰

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040；2.宁波大榭开发区医院，浙江宁波 315800；3.承德医学院，河北承德 067000)

泽泻汤加味方对高盐条件下Dahl大鼠高血压调节及肾功能的保护作用

张婷婷1，蒋希成1，吴鑫宇1，陆雪健1，滕尧2，张树峰3*

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040；2.宁波大榭开发区医院，浙江宁波 315800；3.承德医学院，河北承德 067000)

目的：探讨泽泻汤加味方对高盐条件喂养下Dahl大鼠血压调节及肾保护作用研究。方法：60只Dahl大鼠随机分为空白对照组、模型组、缬沙坦组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组，每组10只。采用8%NaCl高盐饲料自然喂养盐敏感性大鼠(Dahl salt-sensitive rat)，给予高盐饮食4周，正常组给予常规饲料。测定血压，药物干预4 周后，全自动生化仪检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)的变化。结果：用药4周后，与模型组相比较，其余各组血压均有明显下降，有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与空白对照组相比，模型组、中药中剂量、中药高剂量组的BUN升高(P<0.01或P<0.05)；同空白对照组比较，中药中剂量组Scr降低(P<0.05),其余组无显著性差异(P>0.05)。结论:泽泻汤加味方对高盐条件喂养下的Dahl大鼠具有一定的降压作用，且对其肾功能有间接保护作用。

Dahl大鼠;高盐条件喂养;盐敏感性高血压;泽泻汤加味方

高血压是一种全球性的常见病、多发病，严重威胁着人类健康，世界各国的高血压患病率高达10%～20%。《中国高血压防治指南》(第3版)提出食盐摄入量与高血压发生密切相关，盐敏感性高血压高达60%[1]。泽泻汤加味方由汉代·张仲景《金匮要略》泽泻汤加泽兰、石菖蒲组成，具有利水泄浊、健脾化痰、活血化瘀之功效。前期临床研究证实，泽泻汤加味方在临床上治疗盐敏感性高血压作用效果显著[2]。本文通过研究具有盐敏感的高血压遗传性的Dahl大鼠作为动物模型，探讨泽泻汤加味方的调节血压及对血清中BUN、Scr的作用，进而阐述其降压及肾保护的作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 药物

泽泻汤加味方购自黑龙江中医药大学附属第一医院，处方由泽泻、白术、泽兰、石菖蒲四味药物组成。上四味加8倍量水浸泡4 h，加热煎煮0.5 h，过滤，药渣再加4倍水，煎煮0.5 h，过滤，2次过滤药液合并，浓缩制成浓度为1∶1(即1 ml水煎剂含1 g生药)的水煎剂备用。置于-40℃冻室中冰冻保存。代文(缬沙坦)片，诺华制药有限公司，实验时研成细粉用含5%的羧甲基纤维素钠蒸馏水配置成所需浓度的混悬液。含5%的羧甲基纤维素钠蒸馏水溶液。

1.1.2 实验动物

3周龄Dahl雄性大鼠，体质量80～100 g，SPF级，实验动物由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，实验动物合格证号：SCXK(津)2012-0001。饲养于黑龙江中医药大学药物安全评价中心的屏障系统中。

1.1.3 主要实验仪器

BP-6动物无创血压测试仪(成都泰盟科技有限公司)。

1.1.4 动物饲料

8% NaCl高盐纯化饲料购于开源动物饲料(常州)有限公司，批号16030601(A2)。正常饲料购于北京科奥协力饲料有限公司，SPF级。

1.2 实验方法

1.2.1 分组及造模

60只Dahl大鼠随机分为6组，每组10只。即空白对照组、模型组、缬沙坦组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。除空白对照组给予正常饲料外，其余五组均给予8% NaCl高盐纯化饲料，喂养4周。第5周开始，分别给于药物干预，并全部给予正常饲料直至第8周。

1.2.2 给药方法

造模4周后给药干预，空白对照组及模型组给予等体积的含5%羧甲基纤维素钠蒸馏水灌胃，缬沙坦组给予缬沙坦7.2 mg/(kg·d)灌胃(研磨，含5%羧甲基纤维素钠的蒸馏水溶解)，中药低剂量组5.4 g/(kg·d)灌胃，中药中剂量组10.8 g/(kg·d)灌胃，中药高剂量组21.6 g/(kg·d)灌胃。

1.2.3 血压测量

采用无创尾套法测定清醒大鼠收缩压(SBP)，每次测量时记录3次取平均值。给药前、给药2周、给药4周末各测定一次血压，每次服药后2 h开始测量。

1.2.4 BUN、Scr的检测

给药4周后，用10%水合氯醛腹腔内给药麻醉，腹主动脉取血，离心4 000 r/min，5 min，取血浆，用日立7180全自动生化分析仪器检测BUN、Scr。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 各组Dahl大鼠不同时间检测尾动脉收缩压的变化情况比较

如表1所示，给药前，模型组、缬沙坦组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组大鼠的收缩压明显高于空白对照组(P<0.01)，提示模型成功。用药2周时与模型组相比，各用药组血压有所下降，缬沙坦组(P<0.05)有统计学意义，各中药组无统计学意义(P>0.05)。用药4周时与模型组比较，各用药组与模型组比较血压下降明显，有显著性差异(P<0.01)。

表1 各组Dahl大鼠不同时间收缩压的变化

注：与空白照组比较，△P<0.01；与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01。

2.2 各组Dahl大鼠干预4周后BUN、Scr的变化情况比较

如表2所示，与空白对照组比较，用药4周后，模型组、中药中剂量组、中药高剂量组血清中BUN升高(P<0.01或P<0.05)，有统计学意义。与空白对照组比较，中药中剂量组Scr降低(P<0.05)，有统计学意义，其他组无显著性差异。

表2 各组Dahl大鼠药物干预4周后BUN、Scr水平比较

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

在日常饲养中我们发现，通过对Dahl大鼠的喂养，高盐喂养的大鼠饮水量明显高于空白对照组，且随着血压的升高，除空白对照组正常饮食外，其余各组高盐饮食大鼠呈现易激惹状态。

3 讨论

泽泻汤见于《金匮要略》痰饮咳嗽病脉证并治第十二篇，用于治疗痰饮停聚，清阳不升之头目昏眩。泽泻汤加味方在泽泻汤原有药物泽泻、白术的基础上加泽兰、石菖蒲。分析以上四味药物的性、味、归经及化学成分和现代药理研究进展，发现四味药物均有一定的利水、降压效果。泽泻：甘、寒，归肾、膀胱经，能利水渗湿、泄热。泽泻的化学成分主要为三萜类化合物、倍半萜类化合物、二萜类化合物、类脂和糖分等。现代药理研究表明泽泻醇提物、水提物均具有利尿作用，24-乙酰泽泻醇A为泽泻的主要利尿成分[3]。白术：甘、苦、温，归脾、胃经，能益气健脾、燥湿利水、止汗、安胎。白术的主要化学成分为挥发油、内酯类化合物、多糖、苷类成分、氨基酸及其他类化合物。对白术及其分离出来的单体进行药理研究，发现其具有肾保护、扩张血管等作用[4]。泽兰：苦、辛、微温，归肝、脾经，能活血调经、利水消肿。其主要化学成分为挥发油、黄酮苷、皂苷、酚类、糖类及鞣质等。现代药理研究表明泽兰具有活血化瘀，行水消肿的功效，临床用于治疗月经不调、经闭、痛经、产后瘀血腹痛、水肿等[5]。石菖蒲：辛、苦、温，归心、胃经，能开窍醒神、化湿和胃、宁神益志。其主要化学成分为挥发性成分和非挥发性成分，现代药理研究表明，菖蒲挥发油有短暂的降低血压作用及抑制单胺氧化酶作用[6]。高血压病程中普遍存在水浊内结、痰湿阻滞、瘀血阻络病因病机[7-10]，基于以上病因病机同上述四味药物的性味归经及功效，泽泻汤加味方可共奏利水泄浊、祛痰开窍之功效。现代药理研究表明利尿剂为治疗高血压的重要药物，泽泻汤加味方的降压作用可能与其利水泄浊之功效密切相关。

Dahl大鼠是一种具有高血压遗传特性的近交系大鼠，这种品系的大鼠对盐负荷敏感，随着喂养时给盐浓度的增加、随时间增长血压升高。此类动物模型能复制出临床上对盐敏感的患者的情况，临床上因遗传和环境因素的影响，部分患者对盐的摄入敏感，随着盐摄入量这一环境因素的增加，高血压的值可呈现上升趋势。通过动物实验模型的复制，在本实验结果中显示，缬沙坦与中药泽泻汤加味方对具有盐敏感性的Dahl 动大鼠均具有降压作用，疗效相当，随着用药时间的持续而效果明显。现代医学研究表明，肾的水钠代谢是盐敏感性高血压发生的主要机制[11]，盐中的氯化钠是主要的“环境因素”。盐负荷后细胞内钠含量增加，体内水钠潴留，尿排钠反应延迟，堆积可造成高血压的发病。高血压可累及身体多个脏器的损伤，对于肾功能的影响是明显的，高血压可以引起肾功能损伤，尿素氮和血肌酐是反映肾功能的重要的指标，高血压肾损害早期出现肾小动脉硬化，因此有效的抑制血压可以保护肾功能。本实验显示，与空白对照组相比较模型组、泽泻汤加味方高剂量组可见BUN的升高，可见高盐饮食可对肾功能有一定的影响。因此控制盐的摄入量对治疗盐敏感性高血压具有重要的意义，并且血压的降低对肾功能亦有一定的保护作用。

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河北省科技支撑计划项目(No.09276101D-20)；黑龙江中医药大学科研基金面上项目(No.201512)