清热抗毒口服液稳定性研究*

河北省石家庄市第五医院

杨 静 冯 莉△ 张 娟 冯彩霞 杜 婧△△(石家庄 050021)

清热抗毒口服液稳定性研究*

河北省石家庄市第五医院

杨 静 冯 莉△张 娟 冯彩霞 杜 婧△△(石家庄 050021)

目的：研究考察清热抗毒口服液的稳定性。方法：依据《药物制剂稳定性实验指导原则》，观察清热抗毒口服液的性状、pH值、相对密度、鉴别、盐酸小檗碱含量的变化。结果：在影响因素试验、加速试验和长期稳定性试验中，清热抗毒口服液的性状、pH、相对密度、薄层鉴别均未发生明显变化。制剂中的药效成分盐酸小檗碱的含量随存放时间的延长有所降低。结论：高温和强光对本制剂的稳定性有一定的影响。故采用深棕色玻璃瓶存放口服液，置于阴凉干燥处保存。本品在室温下是稳定的。

清热抗毒口服液；稳定性；影响因素；加速试验；长期试验；高温；强光；深棕色

清热抗毒口服液是石家庄市第五医院名中医精心研制的中药复方制剂，处方由白茅根、钩藤、生石膏、板蓝根、藿香、黄连等十味中药组成(本制剂处方已申请专利)。本制剂清肝经热，祛湿解毒、平肝止痛，可用于治疗疱疹、抽搐、发热等急性感染症状。临床上用于手足口病的治疗。制剂的稳定性不仅是评价制剂质量的重要指标，而且是临床用药安全的重要保证。因此，制剂稳定性的考察就显得尤为重要。笔者根据《中华人民共和国药典》2010年版《药物制剂稳定性实验指导原则》，[1]以清热抗毒口服液的性状、pH、相对密度、鉴别、有效成分含量为指标进行考察，分别进行影响因素试验、加速试验和长期试验，通过观察各指标的变化评价制剂的稳定性，[2]以期为该制剂的生产、质量控制、储藏条件等后续研究提供科学的参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液相色谱仪(Agilent1260)；微电脑光照箱( 型号:SPX-2501-G，上海博讯实业有限公司)；十万分之一天平(BS124Ssartorius)；电热恒温水浴锅(HHS型，上海东星建材试验设备有限公司)；超声清洗仪(KQ-100E型，昆山市超声仪器有限公司)；隔水式电热恒温培养箱。

1.2 试药 对照品：白茅根对照药材(中国药品生物制品检定所，121145-201003)；钩藤对照药材(中国药品生物制品检定所，121190-201204)；黄连对照药材(石家庄市第五医院制剂室提供)；盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定所，批号为110713-201212)。清热抗毒口服液(石家庄市第五医院制剂室提供，规格：10mL/支，批号为140306，140409，140508)。

所用试剂均为分析纯；乙腈(德国CNW生产公司)为色谱纯；水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 测定方法

2.1.1 性状、pH、相对密度、鉴别:制剂的性状测定采取在自然光条件下白色背景中通过肉眼进行直接观察；口服液的pH值使用酸度计测量；口服液的相对密度采用比重瓶法测定；采用薄层色谱法对口服液中白茅根、钩藤、黄连进行鉴别。

2.1.2 含量测定: 本制剂中盐酸小檗碱的含量采用高效液相色谱法进行测定。通过实验确定的色谱条件：色谱柱为岛津C18(4.6×150mm，5μm)；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(25∶75)为流动相；检测波长为265nm；流速为1.0mL/min；柱温为30℃；进样体积为10μL。按盐酸小檗碱峰计算，理论塔板数应不低于3 000。在此实验条件下分别进行了线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验等方法学研究。

在本制剂质量标准的建立中，对此方法进行了详细的描述，在此不再赘述。

2.2 影响因素试验

2.2.1 方法:按照《药物制剂稳定性实验指导原则》中对口服液稳定性的考察要求，重点考察的项目包括性状、pH、相对密度、鉴别以及含量，分别进行高温试验与强光试验。

2.2.1.1 高温试验:取供试品20支除去包装后开口置于洁净容器中，在(60±2)℃恒温箱中放置10d，分别于第0、5、10d各取5支进行检测。结果见表1。

2.2.1.2 强光试验：取供试品20支除去包装后开口置于光照箱内，在光照强度4 500Lx条件下放置10d，分别于第0、5、10d各取5支进行检测。结果见表2。

2.2.2 结果：在高温和强光的影响下，清热抗毒口服液的性状、pH、相对密度、鉴别未发生明显变化，而盐酸小檗碱的含量有所降低。

表1 高温实验结果

表2 强光实验结果

2.3 加速试验

2.3.1 方法:取清热抗毒口服液3批样品，在40℃±2℃、相对温度75%±5%条件下放置6个月，并对真实温度与湿度进行监测。在试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样1次，按稳定性重点考察项目进行检测。

2.3.2 结果：在该试验条件下，3批口服液的性状、pH、相对密度、鉴别均未发生明显变化。制剂中有效成分的含量随存放时间的延长有所降低。详见表3。

表3 加速实验结果

续表3 加速实验结果

2.4 长期试验

2.4.1 试验方法：清热抗毒口服液3批样品，在30℃±2℃、相对湿度65%±5%的条件下放置12个月，每3个月取样1次，分别于0、3、6、9、12个月取样，按稳定性重点考察项目并检测。

2.4.2 试验结果：在30℃±2℃、相对湿度65%±5%的条件下放置12个月，3批口服液的性状、pH、相对密度、鉴别均未发生明显变化。制剂中有效成分的含量随存放时间的延长有所降低。详见表4。

表4 长期实验结果

3 讨论

清热解毒类抗病毒复方中药大多有抗病毒、抗炎双重作用。[3]根据中医辨证施治的原则，在不同类型的抗病毒治疗中，发挥着自己独特的作用。清热抗毒口服液中白茅根具有利尿与抗菌作用以及增强肌体的非特异性免疫作用。[4]黄连味苦性寒，具有清热燥湿，泻火解毒之功，同时具有抗炎、抗病毒、解热等多重功效，黄连中的盐酸小檗碱为含小檗碱中药中主要抑菌成分，其抗菌谱广，对革兰氏阳性、阴性菌均有抑制作用。[5]升麻有发表透疹，清热解毒，升阳举陷的功效。本制剂内外兼治，从根本上针对手足口病的各证加以治疗，达到标本兼治的目的。近年来研究发现手足口病患儿体内的Treg/Th17较正常值明显降低，存在Treg/Th17平衡紊乱。而Treg/Th17平衡在肌体免疫中发挥着不可忽视的作用。这可能是手足口病的发病机制之一。中药对免疫系统的调节作用逐渐为人们所认可。通过研究发现[6]清热抗毒口服液可通过抑制Th17细胞及其相关的细胞因子的产生，调整患儿体内Treg/Th17平衡紊乱，从而抑制体内炎症的进一步扩展，这可能是本制剂治疗手足口病的作用机制之一。

清热抗毒口服液采用加权评分法优化水提制备工艺，祛除传统煎剂的弊端，选取最佳制备工艺，真正发挥药物的最大作用。中药制剂剂型选择遵循首选口服，后选注射的治疗原则。[7]本制剂采取口服液剂型，是由于患者多为婴幼儿，口服液较煎剂用量小，服用方便，以便增强患儿用药的依从性。清热抗毒口服液为棕褐色的液体，通过白茅根、钩藤、黄连的薄层鉴别和盐酸小檗碱的含量测定以控制制剂的质量。稳定性试验的目的是考察药物制剂在温度、光线等因素的影响下随时间变化的规律，通过加速实验及长期实验的观察，对制剂稳定性进行进一步考察，为制剂的生产、包装、贮藏条件的合理性提供参考依据，并通过试验数据分析进一步确定药品的有效期。[8-9]在影响因素试验中本应考察高温、强光和高湿因素对制剂稳定性的影响，由于本制剂为口服液剂型，含水量较大，故高湿不作为考察因素。

在本课题中，分别选取不同厂家的药材，采用相同的工艺对清热抗毒口服液进行提取浓缩，并对制剂中盐酸小檗碱的含量进行测定。以此来判断不同厂家的药材对制剂中盐酸小檗碱含量的影响。同时也为本课题中清热抗毒口服液的质量控制提供参考依据。测定结果表明，不同厂家药材提取的制剂中盐酸小檗碱的含量存在不同程度的差异。其中选自乐仁堂药材厂家提取的制剂中盐酸小檗碱的含量最高，表明质量较好；选自其它厂家的药材提取的制剂中盐酸小檗碱含量均低于乐仁堂厂家，故本实验采用选自乐仁堂药材厂家的药材作为实验原料。通过该制剂3批样品含量测定的结果以及稳定性试验研究，暂定制剂中盐酸小檗碱的含量不低于2 mg/10 mL。

通过稳定性试验的各项研究，结果表明清热抗毒口服液的性状、pH值(4.4～4.6)、相对密度(1.06～1.08)未发生明显变化，说明在高温、强光条件下，口服液的性状、pH、相对密度、薄层鉴别的变化不明显，比较稳定。但影响因素试验中盐酸小檗碱的含量呈下降趋势，并且下降趋势较明显，说明盐酸小檗碱在高温[10]和强光条件下容易分解。在加速实验中，第1个月口服液中盐酸小檗碱的含量下降明显，而后仍呈下降趋势，但是下降较缓慢。说明在一定实验温度下，有效成分含量会随存放时间的延长而降低，而且温度越高有效成分含量下降得越快。说明高温和强光是影响本制剂稳定性的主要因素。因此，在工艺生产过程中应注意对温度和时间的控制，以及储存运输中应注意避高温、避强光保存。结合实验结果，拟采用深棕色玻璃瓶存放口服液，存放于阴凉干燥处。本品在室温下是稳定的。故暂定清热抗毒口服液的有效期为12个月。

[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典(二部) [S]．北京:中国医药科技出版社，2010.附录

[2]刘泽干,黄良永,朱海涛,等.金茵清热口服液稳定性考察[J].医药导报,2014,33(11) : 1 502-1 505

[3]王英燕,王海.抗病毒中药的研究进展[J].中医药学报,2006,34(1):25-26

[4]全红,周涛,方东海,等.白茅根的研究概况[J].中医药学报,1999(1):60-61

[5]金建玲,栾永娜,华国强,等.含小檗碱中药的抑菌活性与小檗碱含量的关系[J].中医药学报, 2005, 33(5):19-21

[6]闫纳新,许尊贵,杨莉,等.清热抗毒煎剂对普通型手足口病患儿外周血Treg、Th17平衡的调节作用[J].河北中医药学报,2015,30(3):40-43

[7]史秀玲,郭士丛.中药及其制剂的安全、合理使用刍议[J].河北中医药学报,2011,26(1):38-40

[8]杨颖.改善药物稳定性的方法综述[J].中国药师,2007,10(2):138

[9]张星一.化学药物稳定性研究的设计和评价[J].中国新药杂志,2010,19(14):1 209

[10]彭宗玢,朱天明.温度对盐酸小檗碱质量的影响[J].时针国医国药,2001,13(10):583

(2016-11-08 收稿)

*河北省石家庄市科技局科技支撑计划项目：No.151461523

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1007-5615(2017)02-0040-04

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