西洋参袋泡茶增强小鼠免疫力功能的实验研究

石贺芹，张聪恪

(1、平顶山平煤神马医疗集团总医院，河南平顶山467000；2、河南省疾病预防控制中心，河南郑州450016)

·实验研究·

西洋参袋泡茶增强小鼠免疫力功能的实验研究

石贺芹1，张聪恪2

(1、平顶山平煤神马医疗集团总医院，河南平顶山467000；2、河南省疾病预防控制中心，河南郑州450016)

目的探讨西洋参袋泡茶对小鼠免疫功能的影响。方法将144只BALB/C雄性小鼠按体重分层随机分为4组，分别是低、中、高剂量组和对照组，前3组分别给予0．84g/kg BW、1．67g/kg BW、5．01g/kg BW西洋参袋泡茶受试液，对照组用蒸馏水，每天上午灌胃1次，30d后分组检测细胞免疫指标：脏器/体重比、脾淋巴细胞增殖能力、24h足拓肿胀度；体液免疫指标：溶血空斑数、半数溶血值（HC50）；非特异性免疫指标：鸡红细胞吞噬率与吞噬指数、NK细胞活性及碳廓清能力。结果中、高剂量西洋参袋泡茶可使小鼠24h足拓肿胀度增大，提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、脾淋巴细胞增殖能力及清除碳廓清能力，增强NK细胞活性(P＜0．05)；高剂量西洋参袋泡茶促进抗体和血清凝血素的生成(P＜0．05)；各剂量组对免疫器官/体重比均无明显影响(P＞0．05)。结论西洋参袋泡茶能不同程度提高免疫学指标，对正常小鼠免疫功能具有增强作用。

西洋参袋泡茶；BALB/C小鼠；免疫功能

西洋参为五加科植物（拉丁名Panax quinqueoliums）的干燥根，药食同源，具有补气养阴、清肺肾、凉心脾、生津止渴等功效。其功效成分为西洋参人参皂苷、多糖、挥发油、甾醇、氨基酸等化合物和微量元素[1－3]。现代药理学研究表明，西洋参活性成分总皂甙具有增强免疫力、改善心脑血管、抗疲劳等作用[4－7]。为验证其对机体是否具有免疫调节功能，作者以BALB/C小鼠为实验对象，进行了多种免疫学试验，包含非特异性吞噬功能、细胞免疫及体液免疫指标，旨在探讨西洋参袋泡茶对正常小鼠免疫功能的作用。

1 材料与方法

1．1样品及其制备西洋参袋泡茶(由天津某有限公司提供），有效成分为西洋参总皂甙，含量为697mg/100g，规格为10g/袋，每日一袋。样品提取方法：取100g西洋参袋泡茶加1000ml蒸馏水于80℃～90℃浸泡30min，提取两次，合并提取液于60℃～70℃条件下，用旋转蒸发仪浓缩至60ml，作为受试物原液，1ml相当于1．67g原样品。用蒸馏水将受试物原液分别稀释成不同剂量的受试液进行功能学试验。

1．2主要仪器与试剂ADVIA1200全自动生化仪(美国)；旋转蒸发仪（德国HEIDOLPH）；高压灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司)；二氧化碳培养箱(美国)；离心机(北京医用离心机厂)；倒置显微镜(日本OLYMPUS)；Multiskan酶标仪(芬兰)；显微镜(日本OLYMPUS)；小牛血清(HYCLONE公司产品)；RPMll640(美国Gibco公司产品)；刀豆蛋白A (ConA)、琼脂糖和MTT(美国Sigma公司产品)。

1．3动物与细胞来源144只BALB/C雄性小鼠，体质量18～22g。由军科院实验动物中心提供，许可证号SCXK（军）2012－0004。YAC－1细胞由上海市疾病预防控制中心赠送。

1．4方法将小鼠分为三批，每批48只，每批按体重分层随机分为四组，每组12只，剂量分别为低剂量组（0．84g/kg BW）、中剂量组(1．67g/kg BW)、高剂量(5．01g/kg BW)和对照组(蒸馏水)。每天灌胃一次，分别给予不同剂量的西洋参袋泡茶受试液，30d后分为3个亚组，试验方法参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版）[8]。检测以下指标：脾脏及胸腺/体重比值（小鼠称重后脱臼处死，取脾脏与胸腺，滤纸吸干表面血污称重，计算脾脏/体重比值和胸腺/体重比值），脾淋巴细胞增殖能力(ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验，MTT法)，24h足跖肿胀度(绵羊红细胞诱发小鼠DTH，足跖增厚法)[9]；半数溶血值(HC50，血清凝血素测定)，溶血空斑数(抗体生成细胞检测，Jeme改良载法)；碳廓清能力(小鼠碳廓清试验)[10]，鸡红细胞吞噬率与吞噬指数(小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验，滴片法)和NK细胞活性(酶标仪测定）[11]。

1．5统计学处理采用SPSS 16．0软件行方差分析，检测数据先经方差齐性检验，再进行方差分析，对非正态或方差不齐的数据资料进行适当的变量转化，待满足“正态或方差齐”要求后，用转换所得的数据进行统计分析。

2 结果

2．1西洋参袋泡茶对免疫器官、细胞免疫和体液免疫功能的影响试验表明各剂量组小鼠的脏器/体重比值与对照组比较差异无显著意义(P＞0．05)，中、高剂量组24h足跖肿胀度及脾淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异有显著意义(P＜0．05)，高剂量小鼠溶血空斑数和半数溶血值高于溶剂对照组，差异有显著意义（P＜0．05），见表1、表2。

2．2西洋参袋泡茶对小鼠非特异性免疫功能的影响结果显示中、高剂量组NK细胞活性、鸡红细胞吞噬率与吞噬指数及碳廓清能力与对照组比较差异有显著意义(P＜0．05)，见表3，表明在本实验条件下西洋参袋泡茶对非特异性免疫功能有促进作用。

表1 西洋参袋泡茶对脏器/体质比值和细胞免疫功能的影响

表2 西洋参袋泡茶对体液免疫功能的影响

表3 西洋参袋泡茶对非特异性免疫功能的影响

3 讨论

本实验通过对脾脏及胸腺/体重比值，24h足跖肿胀度，脾淋巴细胞增殖能力等9项指标进行了测定，内容涵盖免疫器官、细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫四方面，系统探讨了西洋参袋泡茶对小鼠免疫功能的影响。

脾脏、胸腺是机体重要的免疫器官，胸腺/体重（胸腺指数）和脾脏/体重（脾脏指数）的高低取决于其中淋巴细胞增殖的程度，在本研究中，不同剂量的西洋参袋泡茶对小鼠对其无明显影响。说明胸腺指数和脾脏指数在免疫评价中可能是一个滞后的指标[12]。然而实验结果显示中、高剂量西洋参袋泡茶均能提高碳廓清能力及巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力[13]，可促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力[14]，增强绵羊红细胞引起的小鼠迟发型超敏反应，增强NK细胞活性[15]，高剂量西洋参袋泡茶亦可促进抗体生成及提高血清凝血素水平，充分证明了西洋参袋泡茶对小鼠的免疫调节具有促进作用。

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SHI Heqing1，ZHANG Congke2.1. General Hospital of PINGMEISHENMA Medical Group，Pingdingshan Henan 467000，China；2.Henan Center for Disease Control and Prevention，Zhengzhou Henan 450016，China.

Objective To observe the impact of American ginseng teabag on immunity function in mice．Methods A total of l44 BALB/C mice were allocated into 4 groups．Three groups were given low－，mediate－，high－doses(0．84g/kg BW、1．67g/kg BW、5．01g/kg BW)of the American ginseng teabag and the control group was given distilled water in each morning for 30 days．After 30 days，the index of cellular immunity was detected included the ratio of spleen－thymus/body weight，the spleen lymphocyte proliferation and the 24h full extension swelling degree．The humoral immunity index were the hemolytic plaque of spleen and Half hemolytic value(HC50)，and the nonspecific immune index consisted of the phagocytes rate and index of chicken erythrocytes，the natural killer(NK)cell activity and the carbon clearance ability．Results The American ginseng teabag could increase the 24h full extension swelling degree，the phagocytes ability of chicken erythrocytes，the spleen lymphocyte proliferation，the carbon clearance ability and the NK cell activity in the dosage of 1．67g/kg BW and 5．01g/kg BW(P＜0．05)．The amount of antibodies and Serum coagulation factor was enhanced significantly in the dosage of 5．01g/kg BW．The significant difference was observed in the dosage of 5．01g/kg BW in the amount of hemolytic antibody(P＜0．05)．The ratio of spleen－thymus/body weight significant difference was not observed in each group(P＞0．05)．Conclusion The result showed that the American ginseng teabag can improve the different levels of immunological indexes，and enhance the role of immune function in normal mice．

American ginseng teabag；BALB/C Mice；Immunity function

R446．63，R－332

A

1674－1129(2017)02－0181－02

10．3969/j.issn.1674－1129．2017．02．013

2016-09-20；

2017-03-07)

河南省科技厅产学研合作项目(编号：152107000073)

石贺芹，女，1969年生，医学学士，主管检验师，专业：医学检验，研究方向为免疫检验。

Experimental study on American ginseng teabag of enhancing immune function to mice