蛋白质精氨酸甲基转移酶1-非对称性二甲基精氨酸-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1路径在肝纤维化、肾小管间质纤维化大鼠组织中的作用及意义

马雪丰，张景耀，毛 庆，陈 果，秦德萍，李 傲,3*

·论著·

蛋白质精氨酸甲基转移酶1-非对称性二甲基精氨酸-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1路径在肝纤维化、肾小管间质纤维化大鼠组织中的作用及意义

马雪丰1，张景耀2，毛 庆1，陈 果1，秦德萍1，李 傲2,3*

目的 观察蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)-非对称性二甲基精氨酸(ADMA)-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)代谢轴在肝纤维化、肾小管间质纤维化大鼠模型体内的变化情况，并探讨血清ADMA水平与肝纤维化、肾小管间质纤维化程度间的相关性。方法 2015年9—12月，从40只SPF级Sprague-Dawley雄性大鼠中随机抽取20只，将其平均分为溶剂对照组(A组)和肝纤维化模型组(B组)；再将剩余的20只Sprague-Dawley大鼠平均分为假手术组(C组)和模型组(D组)，各10只。采用四氯化碳(CCl4)慢性染毒和单侧输尿管结扎的方法分别建立大鼠肝纤维化模型(B组)和肾小管间质纤维化模型(D组)。采用皮下注射等量花生油和单侧输尿管只分离不结扎的方法分别建立溶剂对照模型(A组)和假手术模型(C组)。A、B组大鼠分别于干预8周后，C、D组大鼠分别于干预2周后，采用Masson三色染色后计算肝、肾胶原纤维面积百分比；采用化学比色法检测肝、肾组织羟脯氨酸(Hyp)水平；采用改良的高效液相色谱法检测血清ADMA水平；采用蛋白质免疫印迹法检测肝、肾组织PRMT1、DDAH1表达水平。结果 A组、B组、C组、D组大鼠血清ADMA水平分别为(0.43±0.07)、(1.10±0.21)、(0.45±0.03)、(1.26±0.21)μmol/L。B组大鼠血清ADMA水平高于A组(t=6.32，P<0.05)；D组血清ADMA水平高于C组(t=6.96，P<0.05)。血清ADMA水平与肝、肾胶原纤维面积百分比均呈正相关(r值分别为0.913、0.934，P<0.05)。血清ADMA水平与肝、肾组织Hyp水平均呈正相关(r值分别为0.856、0.878，P<0.05)。B组大鼠肝组织PRMT1表达水平高于A组，DDAH1表达水平低于A组(P<0.05)。D组大鼠肾组织PRMT1表达水平高于C组，DDAH1表达水平低于C组(P<0.05)。结论 在肝纤维化、肾小管间质纤维化状态下，PRMT1-ADMA-DDAH1代谢轴中PRMT1表达增高，而DDAH1表达减低，可导致血清ADMA水平升高，引起肝血窦和肾小管周围毛细血管内皮细胞的损伤，从而参与纤维化进程的启动和病理改变的发生。

纤维化；模型，动物；蛋白质精氨酸N-甲基转移酶；非对称性二甲基精氨酸

马雪丰，张景耀，毛庆，等.蛋白质精氨酸甲基转移酶1-非对称性二甲基精氨酸-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1路径在肝纤维化、肾小管间质纤维化大鼠组织中的作用及意义[J].中国全科医学，2017，20(12)：1474-1479.[www.chinagp.net]

MA X F,ZHANG J Y,MAO Q，et al.Role and significance of PRMT1-ADMA-DDAH1 pathway in rats with hepatic and renal tubulointerstitial fibrosis[J].Chinese General Practice，2017，20(12)：1474-1479.

1.ChonggingInstituteforFoodandDrugControl,Chongqing401121,China

2.CollegeofPharmacyandBioengineering,ChongqingUniversityofTechnology,Chongqing400054,China

3.StateKeyLaboratoryofQualityResearchinChineseMedicine,InstituteofChineseMedicalSciences,UniversityofMacau,Macau999078,China

*Correspondingauthor:LIAo，Associateprofessor;E-mail:ao_livip@sina.com

纤维化是一种组织病理学概念,几乎所有的组织器官，包括心、肺、肝、肾、皮肤等均可发生纤维化[1]。器官纤维化进程的持续发展可进一步破坏器官结构，最终引起器官衰竭[2-3]。在不同的组织器官中，虽然纤维化的发病机制和过程存在差别，但现在仍无有效的措施延缓纤维化的发生、发展[4]。因此，寻找并鉴定出纤维化相关的生物学标志物不仅可以提高人们对纤维化发病机制的认识，还能为抗纤维化治疗药物提供新的靶点。非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)作为内源性一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制物，已在心血管疾病和肾脏疾病中受到广泛关注[5-6]。ADMA在体内的生成主要通过蛋白质精氨酸甲基转移酶1(protein arginine methyltransferase,PRMT1)催化生成。体内ADMA的最终清除通过二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(dimethylamino hydrolase,DDAH1)完成，其催化ADMA转变为瓜氨酸和二甲胺[7]。已有多项证据表明，ADMA在预示慢性肾病及心血管并发症的发生乃至死亡方面具有重要意义[6-7]。同时，在乙型肝炎肝纤维化患者体内，也出现了DDAH1活性的降低和ADMA水平的升高[8]。然而，在纤维化实验动物模型中，尚未有动物血清中ADMA水平及其相关代谢酶表达水平的相关报道。因此，本研究构建了四氯化碳(CCl4)慢性染毒的大鼠肝纤维化模型和单侧输尿管结扎的大鼠肾小管间质纤维化模型，拟通过经典的肝纤维化、肾小管间质纤维化模型，考察其是否也存在与临床相似的PRMT1-ADMA-DDAH1代谢轴紊乱，并进一步探讨纤维化模型动物血清中ADMA水平与纤维化程度间的相关性，旨在为纤维化性疾病的诊断及鉴别提供帮助。

1 材料与方法

1.1 实验材料及时间

1.1.1 实验动物 成年SPF级Sprague-Dawley大鼠40只，均为雄性，6～7周龄，体质量180～220 g，由中国人民解放军第三军医大学第三附属医院实验动物中心提供〔SCXK(渝)2012-0005〕。动物饲养及实验操作在第三军医大学实验动物中心进行〔SYXK(军)2007-0037〕，并按实验动物使用的3R原则给予Sprague-Dawley大鼠人道关怀。饲养条件：温度20～24 ℃，相对湿度55%，自由进食及饮水，12 h明/12 h暗交替，适应性饲养7 d 后开始实验。

1.1.2 实验试剂 邻苯二甲醛、三巯基丙酸(美国Sigma公司)，ADMA标准品(美国Cayman公司),色谱级乙腈、甲醇(美国Fisher公司)，固相萃取阳离子交换柱Waters Oasis MCX (60 mg/3 ml),兔抗大鼠PRMT1多克隆抗体、HRP标记羊抗兔或小鼠IgG(武汉博士德生物工程有限公司)，小鼠抗大鼠DDAH1单克隆抗体(美国Santa Cruz公司)，Masson染液、羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)，其余试剂均为国产分析纯试剂。

1.1.3 仪器 Waters e2695高效液相色谱仪，配荧光检测器(美国Waters公司)；高速冷冻离心机(德国Sartorius公司)；氮吹仪(瑞典Biotage公司)；色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm，美国Agilent公司)；041BR88778型蛋白电泳和电转移装置、ChemiDoc XRS+型化学发光成像系统(美国BIO-RAD公司)；T10B型电动组织匀浆机(德国IKA公司)；BX53正置显微镜(日本Olympus公司)。

1.1.4 实验时间 2015年9—12月。

1.2 方法

1.2.1 动物模型建立

1.2.1.1 肝纤维化模型建立 大鼠肝纤维化模型建立参照文献[9]。从40只Sprague-Dawley大鼠中随机抽取20只，再将20只Sprague-Dawley大鼠平均分为溶剂对照组(A组)和肝纤维化模型组(B组)，各10只。B组大鼠在造模第1周饮用0.03%苯巴比妥(苯巴比妥30 mg溶于100 ml纯净水)以诱导混合功能氧化酶活性，增加CCl4代谢产物的产生，提高造模成功率，减少造模时间。造模大鼠首次皮下注射含40% CCl4的花生油混合液，5 ml/kg皮下注射，以后每次皮下注射2 ml/kg，每周2次，连续注射8周诱导肝纤维化模型。A组大鼠按相同方法和剂量皮下注射等量花生油。

1.2.1.2 肾小管间质纤维化模型建立 采用单侧输尿管结扎方法建立大鼠肾间质纤维化模型[10]。将剩余的20只Sprague-Dawley大鼠平均分为假手术组(C组)和模型组(D组)，各10只。Sprague-Dawley大鼠以水合氯醛(350 mg/kg)腹腔注射麻醉后，D组大鼠右侧卧位固定于手术台，用眼科镊分离左侧输尿管，距肾门5～7 mm处用4号丝线上下结扎两处，从中剪断输尿管，最后逐层缝合皮下组织及皮肤。C组大鼠在暴露肾脏后，只分离左侧输尿管不结扎，直接分层缝合皮肤。

1.2.2 标本采集 A、B组大鼠分别于干预8周后，C、D组大鼠分别于干预2周后，腹腔注射l%戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉，收集腹主动脉血，检测血清ADMA水平。同时暴露腹腔，分别切取纤维化肝左外叶以及结扎侧肾组织，制作5 μm石蜡切片，用于组织病理学检查。

1.2.3 肝、肾组织病理检查及半定量组织学评分 石蜡切片常规脱蜡，经HE染色后于200倍光镜下观察组织切片的病理变化。

半定量组织学评分：将肝纤维化分为5个等级，0级(计1分)：无肝纤维化；1级(计2分)：胶原纤维从中央静脉或汇管区向外延伸；2级(计3分)：胶原纤维延伸明显，纤维间隔开始形成；3级(计4分)：胶原纤维不全分隔包绕肝小叶；4级(计5分)：纤维结缔组织在全小叶多处弥漫性增生，胶原纤维包绕分隔肝小叶，假小叶形成。观察大鼠肾组织内炎性细胞浸润情况，肾小管上皮细胞水肿、变性、坏死情况，肾间质增宽等病变程度，并按病变程度分为5个等级，0级(计1分):正常；1级(计2分)：病变范围为1%～24%；2级(计3分)：病变范围为25%～50%；3级(计4分)：病变范围为51%～75%；4级(计5分)，病变范围>75%。

Masson三色染色后，在200倍光镜下观察组织切片，采用Image Pro plus 6.0图像分析系统，分析胶原纤维面积百分比，计算方法为(胶原纤维面积/肝、肾组织面积)×100%。

1.2.4 肝、肾组织Hyp水平测定 采用化学比色法检测肝、肾组织Hyp水平。精确称取大鼠肝左外叶、肾组织各100 mg，严格按照Hyp测定试剂盒说明进行操作；将Hyp标准品配成标准液，蒸馏水为空白对照，做标准曲线，通过标准曲线计算肝、肾组织Hyp水平。

1.2.5 血清ADMA水平测定 采用改良的高效液相色谱法[11-12]检测血清ADMA水平。色谱条件为：流动相采用磷酸盐缓冲溶液(25 mmol/L，pH=6.5)：乙腈(90∶10)；流速：1.0 ml/min；柱温：30 ℃；进样量：10 μl；激发波长：340 nm，检测波长：455 nm；将ADMA标准品溶于10 mmol/L HCl中，配制成浓度为1.0 mmol/L的存储溶液。然后将存储溶液稀释成浓度为0.05 μmol/L、0.50 μmol/L、2.50 μmol/L、5.00 μmol/L、10.00 μmol/L的标准工作溶液进行测定。以ADMA标准品的保留时间对血清中ADMA水平进行定性检测，采用外标峰面积法对血清中ADMA水平进行定量检测。

1.2.6 肝、肾组织PRMT1、DDAH1表达水平检测 采用蛋白质免疫印迹法检测肝、肾组织PRMT1、DDAH1表达水平。分别称取大鼠肝左外叶、肾组织各100 mg，采用BCA比色法测定蛋白表达水平。将蛋白样品进行12%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离，电转移至PVDF膜上，5%脱脂牛奶封闭1 h，4 ℃下与一抗孵育过夜，加入辣根过氧化物酶标记的二抗，37 ℃孵育1 h，经ECL底物化学发光显影，结果采用Quantity One软件定量分析各条带的积分吸光度(IA)值。将检测到的PRMT1、DDAH1与各自内参β条带IA值比值作为衡量参数，分析肝、肾组织中PRMT1、DDAH1表达水平。

2 结果

2.1 各组大鼠肝、肾组织病理学改变 HE染色后200倍光镜下显示，A组大鼠肝小叶结构清晰，肝小叶内肝细胞索由中央静脉向四周整齐排列，肝细胞大小均匀，无变性和坏死(见图1A，本文图1彩图见本刊官网www.chinagp.net电子期刊相应文章)；B组大鼠肝细胞发生大面积脂肪变性和坏死，大量的纤维组织在肝小叶内伸展，并与邻近汇管区及中央静脉相连，纤维间隔较厚，分割包绕肝实质，形成大小不一的假小叶(见图1B)。半定量组织学评分结果显示，B组大鼠半定量组织学评分〔(3.40±0.23)分〕高于A组〔(0.28±0.14)分〕，差异有统计学意义(t=29.96，P<0.05)。Masson三色染色法结果显示，A组大鼠仅在肝组织汇管区和中央静脉区血管壁附着蓝色，无明显胶原增生(见图1C)；B组大鼠肝小叶结构被破坏，肝组织汇管区和肝小叶间胶原纤维明显增生，形成薄厚不一的纤维间隔，分割包绕肝实质(见图1D)。B组大鼠肝胶原纤维面积百分比〔(34.9±1.7)%〕大于A组〔(2.4±0.8)%〕，差异有统计学意义(t=55.98，P<0.05)。同时，B组大鼠肝组织中Hyp水平〔(820±29)μg/g〕高于A组〔(493±84)μg/g〕，差异有统计学意义(t=11.59，P<0.05)。以上结果提示肝纤维化模型成功建立。

HE染色后200倍光镜下显示，C组大鼠肾小球结构完整，未见肾小管扩张、小管上皮细胞坏死和间质炎性细胞浸润(见图1E)；D组大鼠肾脏组织中肾小球结构基本正常，但出现不同程度的肾小管扩张，小管间质中出现大量的炎性细胞浸润，纤维组织增生，小管上皮细胞部分脱落、坏死等情况(见图1F)。半定量组织学评分结果提示，D组大鼠半定量组织学评分〔(3.70±0.17)分〕高于C组〔(0.31±0.20)分〕，差异有统计学意义(t=40.81，P<0.05)。Masson三色染色法结果显示，C组大鼠肾小球基底膜、肾小管基底膜、系膜基质染成蓝色，肾间质无明显胶原纤维(见图1G)；D组大鼠肾间质部位明显增宽，存在大量的胶原沉积(见图1H)。D组大鼠肾胶原纤维面积百分比〔(34.8±2.2)%〕大于C组〔(0.9±0.8)%〕，差异有统计学意义(t=45.79，P<0.05)。同时，D组大鼠肾组织Hyp水平〔(372±60)μg/g〕高于C组〔(145±26)μg/g〕，差异有统计学意义(t=11.01，P<0.05)。以上结果提示肾间质纤维化模型成功建立。

2.2 各组大鼠血清ADMA水平比较 A组、B组、C组、D组大鼠血清ADMA水平分别为(0.43±0.07)、(1.10±0.21)、(0.45±0.03)、(1.26±0.21)μmol/L。B组大鼠血清ADMA水平高于A组，差异有统计学意义(t=6.32，P<0.05)；D组血清ADMA水平高于C组，差异有统计学意义(t=6.96，P<0.05)。

2.3 血清ADMA水平与肝、肾胶原纤维面积百分比及肝、肾组织Hyp水平的相关性分析 血清ADMA水平与肝、肾胶原纤维面积百分比均呈正相关(r值分别为0.913、0.934，P<0.05，见图2A～B)。血清ADMA水平与肝、肾组织Hyp水平均呈正相关(r值分别为0.856、0.878，P<0.05,见图2C～D)。

注：A、B、E、F为HE染色，C、D、G、H为Masson三色染色；A和C为溶剂对照组(A组)，B和D为肝纤维模型组(B组)，E和G为假手术组(C组)，F和H为模型组(D组)

图1 肝、肾组织病理检查(×200)

Figure 1 Histopathological examination of hepatic and renal tissue

注：ADMA=非对称性二甲基精氨酸

图2 血清ADMA水平与肝、肾胶原纤维面积百分比及肝、肾组织Hyp水平的相关性分析

Figure 2 Correlation analysis of serum ADMA levels with the percentages of areas of hepatic and renal collagen fibers,and with the level of Hyp in hepatic and renal tissue

2.4 各组大鼠肝、肾组织PRMT1、DDAH1表达水平比较 B组大鼠肝组织PRMT1表达水平(0.39±0.04)高于A组(0.19±0.05)，DDAH1表达水平(0.42±0.10)低于A组(1.20±0.17)，差异有统计学意义(t值分别为10.55、12.69，P<0.05)。D组大鼠肾组织PRMT1表达水平(1.80±0.12)高于C组(0.92±0.14)，DDAH1表达水平(0.46±0.04)低于C组(1.05±0.26)，差异有统计学意义(t值分别为15.23、7.17，P<0.05，见图3)。

注：PRMT1=蛋白质精氨酸甲基转移酶1，DDAH1=二甲基精氨酸二甲胺水解酶1

图3 各组大鼠肝、肾组织PRMT1、DDAH1表达情况

Figure 3 Expression levels of PRMT1 and DDAH1 in hepatic and renal tissues of rats

3 讨论

目前，纤维化的诊断治疗主要依赖于组织穿刺病理检查，但易受患者病情、依从性以及活检取样的误差性和创伤性等限制。迄今为止，尚未发现一个真正意义上明确诊断纤维化的标准指标。近年来大量文献表明，作为内源性NOS的抑制剂，ADMA通过竞争性抑制NOS，减少NO的合成，不仅可收缩血管平滑肌，引发内皮细胞损伤和凋亡，还可以通过诱导单核/巨噬细胞趋化和浸润，参与炎性反应[13-14]。在CCl4或胆管结扎诱导的肝纤维化模型中发现NOS合成NO的能力下降，从而使阻力血管的紧张性增加，介导肝硬化门脉高压症形成[15]。同时，肝血窦内皮细胞的损伤常会引发窦壁结构改变，窦壁血管改变一方面阻碍了血氧弥散进入窦状隙(Disse腔)，引起肝星状细胞(HSCs)的缺氧和激活，诱发肝纤维化的发生；另一方面妨碍肝细胞从Disse腔摄取营养和氧气，加重肝细胞损伤或引起其凋亡，此时正常肝细胞膜对HSCs的接触性抑制作用丧失，从而间接引起HSCs增殖[16]。另有研究显示，当肾小管周围毛细血管内皮细胞受损时，同样可以引起细胞和组织缺氧，引发炎性反应[17]。通过基因敲除或特异性抑制诱生型NOS(iNOS)活性的方式，可导致单侧输尿管结扎肾小管间质纤维化大鼠肾组织中L-精氨酸(NO合成的前体)水平上调，加速模型大鼠的肾脏纤维化进程。此项研究同时还发现，NO水平越低，纤维化的程度越显著[16]。本实验结果提示，在CCl4诱导和单侧输尿管结扎的大鼠肝纤维化、肾小管间质纤维化模型中，ADMA在大鼠血清中的水平均高于各自的对照大鼠；同时，本研究还发现血清ADMA水平与肝、肾胶原纤维面积百分比及Hyp水平呈正相关性，提示在肝纤维化、肾小管间质纤维化疾病中，ADMA可通过抑制NO的生成，引起肝血窦和肾小管周围毛细血管收缩和微循环障碍，加重血管内皮细胞的损伤，这可能是纤维化疾病共有的始动因素和病理变化。

体内ADMA水平主要由PRMT1、DDAH1表达和活性来调节，从而形成一条PRMT1-ADMA-DDAH1代谢轴。通过研究PRMT1-ADMA-DDAH1代谢轴在脏器纤维化发生过程中的作用，可为纤维化疾病的诊断及研发有效的治疗手段提供实验依据。本实验结果发现，在CCl4诱导和单侧输尿管结扎的纤维化模型大鼠中，ADMA水平升高同时受到PRMT1表达上调和DDAH1表达降低的调控。因此，通过下调PRMT1和/或上调DDAH1活性或表达水平，降低血清中ADMA水平，可能是预防或逆转纤维化进程的有效途径。

综上所述，肝纤维化、肾小管间质纤维化大鼠体内存在有紊乱的ADMA-PRMT1-DDAH1代谢轴，尤其是血清中ADMA水平的升高，与纤维化恶性程度存在明显的正相关性。针对现有的肝纤维化、肾小管间质纤维化血清学指标，普遍存在阳性检出率不高，更不能替代组织活检这一金标准的现实，本课题组拟进一步开展临床患者血清ADMA水平的检测，并通过评价该指标的各项诊断效能(灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阴性似然比、阳性似然比、诊断准确率、约登指数等)，为其成为纤维化疾病的治疗和预后判定指标提供有效的实验依据。

作者贡献：马雪丰进行实验实施、撰写论文、资料收集整理；张景耀、毛庆、陈果、秦德萍进行实验实施；李傲进行实验设计、质量控制并对文章负责。

本文无利益冲突。

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(本文编辑：毛亚敏)

Role and Significance of PRMT1-ADMA-DDAH1 Pathway in Rats with Hepatic and Renal Tubulointerstitial Fibrosis

MAXue-feng1,ZHANGJing-yao2,MAOQing1,CHENGuo1,QINDe-ping1,LIAo2,3*

Objective To study the changes of protein-arginine N-methyltransferases 1(PRMT1)-asymmetrical dimethylarginine(ADMA)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 1(DDAH1) axis in rat models of hepatic and renal tubulointerstitial fibrosis,and discuss the correlation between serum ADMA levels and degree of fibrosis.Methods From September to December 2015,20 Sprague-Dawley rats were randomly selected from 40 male SPF Sprague-Dawley rats,and equally divided into control group of solvent(group A) and model group of hepatic fibrosis(group B);the remaining 20 Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation group(group C) and model group(group D),each had 10 rats.The rat models of hepatic fibrosis(group B) and tubulointerstitial fibrosis(group D) were established by chronic exposure to carbon tetrachloride(CCl4) and unilateral ureteral obstruction.The solvent control model(group A) and sham operation model(group C) were established by subcutaneous injection of the same amount of peanut oil and unilateral ureteral separation without ligation respectively.After 8-week and 2-week intervention for rats in group A and B,group C and D respectively,Masson trichrome staining method was calculated percentages of areas of hepatic and renal collagen fibers;the levels of hydroxyproline(Hyp) in hepatic and renal were detected by chemical colorimetry.Serum ADMA levels were measured by the modified HPLC method.The expression levels of PRMT1 and DDAH1 in hepatic and renal tissues were detected by Western blotting.Results The serum ADMA levels of group A,group B,group C and group D were(0.43±0.07)(1.10±0.21)(0.45±0.03)(1.26±0.21) μmol/L respectively.The serum ADMA level of group B was higher than that of group A(t=6.32,P<0.05).The serum ADMA level of group D was higher than that of group C(t=6.96，P<0.05).There was a positive correlation between the ADMA level in serum and the percentage of areas of hepatic and renal collagen fibers(r=0.913,0.934 respectively,P<0.05).There was a positive correlation between the ADMA level in serum and the level of Hyp in hepatic and renal tissues(r=0.856,0.878 respectively,P<0.05).The expression level of PRMT1 in hepatic tissues of group B was higher than that of group A,while its expression level of DDAH1 was lower than that of group A(P<0.05).The expression level of PRMT1 in renal tissues of group D was higher than that of group C,while its expression level of DDAH1 was lower than that of group C(P<0.05).Conclusion Under the condition of hepatic and renal fibrosis,increased expression of PRMT1 and decreased expression of DDAH1 in PRMT1-ADMA-DDAH1 can lead to elevated levels of serum ADMA,cause damages of capillary endothelial cells around hepatic sinusoids and renal tubules,and thus involve in the initiation of and pathological changes of the fibrosis process.

Fibrosis;Models，animal;Protein-arginine N-methyltransferases;Asymmetrical dimethylarginine

国家自然科学基金资助项目(81001675)；重庆市科委前沿与应用基础研究(一般)项目(cstc2014jcyjA10030)

R 364.24

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.12.013

2016-09-12；

2017-01-02)

1.401121重庆市，重庆市食品药品检验检测研究院

2.400054重庆市，重庆理工大学药学与生物工程学院

3.999078澳门，澳门大学中华医药研究院，中药质量研究国家重点实验室

*通信作者：李傲，副教授；E-mail:ao_livip@sina.com