大黄药材的成分检测方法研究

孙磊

哈药集团世一堂饮片有限责任公司 150000

大黄药材的成分检测方法研究

孙磊

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大黄是一种多年生的植物的统称，不仅可以当作药材来使用，还可以当做食材来食用，为了保证大黄药品的纯度更高，药品行业的技术人员借助现代科技技术，研究出了多种测定大黄药材的成分的方法，本文借助相关的理论资料以及数据对几种测定大黄成分的方法进行研究，希望可以提升大黄的药用价值。

大黄药材；成分检测；研究方法

大黄是一种比较常用的中药材，其药用历史已经达到 2000多年，即使是在现代社会，其使用仍旧比较普遍，大黄也被称为“将军”“火参”“牛舌大黄”。大黄的药用价值虽然很高，但其分布范围也比较广泛，包括四川、西藏、甘肃等地。虽然大黄的种类有很多，多达 45个品种，但是能够当成药材使用的仅有 3种，唐古特大黄、掌叶大黄以及药用大黄。大黄炮制品的种类也比较多，根据中国药典的记载，可以了解到大黄炭、熟大黄、酒大黄以及大黄，不同的大黄炮制品的炮制方法也存在差异。我国当前检测大黄成分的方法主要有以下几种：

1.PLC检测法

以甲醇-1.0%冰醋酸为流动相，430nm 下检测，图谱中共标定了 23 个共有峰，12个不同产地、不同采收时间样品之间的相似度在 90%以上，可作为大黄药材的具有专属性的指纹图谱。采用微乳电动毛细管色谱法(MEEKC)建立不同来源掌叶大黄的指纹图谱,使用未涂层石英毛细管柱，缓冲液为 SDS、正丁醇、正辛烷及硼砂溶液，并通过添加 10%的乙腈组成的 O/W 型微乳体系,分离电压 18 k V,检测波长 280 nm。结果通过聚类分析和相似度分析处理, 将 14 个掌叶大黄样品初步分为三类:道地药材,市售一般品和次品。后确立大黄指纹图谱共有模式的方法，筛选出建立指纹图谱共有模式的 10 批大黄的药材。以 HPLC 法研究掌叶大黄不同炮制品水提取物的指纹图谱，利用灰关联度分析方法研究其止血谱效关系。说明大黄经炮制后，其鞣质类成分与蒽醌类成分含量的相对变化情况对大黄的止血药效有较大影响。以乙腈-水-1%冰醋酸为流动相,梯度洗脱;254 nm 下探讨能全面地反映大黄中所含化学成分的指纹图谱的最适进样量。确定此条件下大黄指纹图谱的最佳进样量为61.35μg。

2 薄层扫描色谱法

采用超临界流体萃取薄层色谱扫描法测定大黄中大黄素的含量，超临界流体萃取提取物比较纯净，可直接进行点样分析，展开效果好。采用薄层层析法对黄中游离型和结合型蒽醌类成分进行分离，并用薄层扫描法测定其含量。在硅胶G薄层上用正己烷-乙酸乙酷-甲酸(15:5:0.25)展开剂对生大黄、熟大黄及其配方颗粒中的大黄素，并使用双波长薄层扫描仪测定其含量。为研究大黄中蒽醌衍生物含量变化规律，采用薄层扫描法测定其含量。

3 毛细管电泳法

这种检测大黄成分的方法，可以对大黄中的大黄素、芦荟大黄素等成分进行检测，不少研究者都通过这种方法，成功地对大黄中的毒性成分进行了检测，通过这个方法将几种毒性成分分离出来，此方法操作过程相对简单，具有较好的重现性以及极高的分辨率，不仅能够由于大黄成分检测中，还可以用于检测中药中的多糖组成。

4 紫外线分光光度法

用紫外谱线组法测试 4 种大黄炮制品在不同极性溶剂中的紫外谱线图谱,根据它们的紫外谱线图谱峰位置的差异,对其加以区分鉴别。在改进了大黄药材中总蒽醌的含量测定方法，方法为1，8-二羟基蒽醌与碱显色后，2h 内隔时扫描光谱图;对照品和样品同样处理后绘制标准曲线。采用甲醇冷浸法提取，比色法测定大黄中蒽酮的含量。用双波长分光光度法测定大黄中大黄酚的含量。通过测定了 Tween80(NH4):s 氏液固萃取体系萃取大黄中大黄素的含量。还有研究人员用 UV 法测定大黄提取物中总蒽醌含量。通过建立了PH 梯度法萃取大黄中游离葱醒，并用比色法分别进行含量测定。

5 二维红外线光谱法

用红外光谱与高木关野模糊系统相结合鉴别 52 种大黄样品。并对神经网络的隐含层个数和动量因子的影响作了讨论。用高木关野模糊系统得到的结果比通常用的BP网络要好。将向基函数网络与红外光谱分析技术相结合，可用于正品和非正品大黄的分类判别。通过小波变换对原始数据进行压缩，测定和鉴别了45 个样品，正确率达97.78%。采用红外光谱法并结合二维相关光谱分析技术，对药用西宁大黄和伪品华北大黄进行了无损快速鉴别研究。可有效区分真伪大黄。

6 LC-MS

根据大黄中游离蒽醌的基本结构和取代基的排列组合，建立了系统的分子量筛选表，运用 LC-MS 对大黄水提组分进行研究，在 ESI(-)的质谱数据中以目标分子量提取方式快速鉴定了12 种游离葱醒类化合物。采用 HPLC/μV/MS 对生大黄和制大黄的小分子化合物进行定性鉴定，以比色法测定生、制大黄中鞣质及多糖的含量，考察了炮制过程大黄有效组分的变化。采用液相色谱-串联四级杆质谱联方法，建立检测中成药麻仁丸中使用伪品大黄充当正品大黄的专属方法。

7 荧光光谱法

利用三维荧光图谱解析及活性成分测定方法研究中药大黄。建立了测定唐古特大黄水提液中土大黄普含量的荧光分析方法，拟定了溶液荧光法测定芦荟大黄素含量的分析方法。采用荧光光谱分析法对青海大黄不同浓度水浸液进行荧光扫描，结果发现，水浸液浓度与荧光强度呈线性关系。在大黄水浸液三维荧光等高线光谱中发现一个明显的荧光峰(401.8nm)，可作为大黄定性鉴别的依据。

在 HPLC 指纹图谱的基础上，可进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于大黄作用机理。薄层色谱扫描法具有学习快，易掌握、便宜、灵活等特点。可以随时改变展开剂、展开方向，显色、观察、检测都很方便，且其灵敏度及分辨率较高、样品处理简便、设备易操作等特点。使薄层色谱扫描法在中药化学成分含量研究中占有很重的作用。毛细管电泳法分离效率高、分析速度快、样品用量少，适用于药味较多、化学成分复杂的中药复方成分的分析。LC-MS 联用几乎可以检测所有的所有的化合物，比较容易解决分析热不稳定的化合物难题。

8 结语

大黄成分的检测方法比较多，本文列举的几种只是比较常见的检测方法，在对不同的检测方法进行分析时，发现不同的检测成分的方法一般既有优势，同时也存在劣势，HPLC法对大黄成分测定时，准确度比较高，但是检测需要的时间比较长，虽然紫外光度法的检测速度快，但是检测的准确度稍差。大黄的成分中并不都是有价值的药用成分其中的大黄素就是一种比较典型的毒性成分，可能会致癌，当患者长期食用大黄，在停药后，一般会出现便秘的情况，这也降低了大黄的药用价值，为了能够准确地检测出大黄的各成分的含量，检测人员要对现有的检测方法进行研究。

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