盐酸氟桂利嗪片含量的HPLC测定分析

王玥

哈药集团制药六厂 150000

盐酸氟桂利嗪片含量的HPLC测定分析

王玥

哈药集团制药六厂 150000

目的：通过科学的方式制定盐酸氟桂利嗪药物口腔崩解片相应的HPLC类型含量测定方法。方法：使用色谱分析技术，以甲醇和磷酸二氢钾为主要物质的流动相，将试验中流动相流速设定为每分钟一毫升；色谱检测波长设定为二百五十四纳米；实验柱温设定为三十摄氏度；盐酸氟桂利嗪这一药物的浓度设定为四点八到五十七点六毫克每毫升，在这一标准下，数据显示有良好的线性关系；结论：这种方法在实验过程中表现出了操作流程简便、检测灵敏度较高、重现性好的特点，通过这种检测方式的使用能有效的保证盐酸氟桂利嗪药物口腔崩解片在含量测量方面的检测效果。

盐酸氟桂利嗪；医疗药物；液相色谱法

盐酸氟桂利嗪药物口腔崩解片在对患者的治疗阶段有着突出的作用，这种药物在治疗的过程中主要通过阻断钙通道而达到治疗效果。此药物的主要成分为盐酸氟桂利嗪，这一药物能在脑梗塞病症、脑血栓病症、脑动脉硬化病症的治疗过程中发挥突出的效果，同时在脑出血病症的恢复期或者是对于脑外伤相应的后遗症治疗都有突出的效果。也正因为这种药物治疗对于各种病症都有良好的治疗效果，所以药物在生产过程中也出现了较多的形式，在这种情况下为了保证药物的检测具有良好的效果，也就需要技术人员根据实际的情况选择最为合适的检测方式，在现阶段经常会使用到的药物检测方式包括：电位滴定类型的检测方法、紫外分光类型的检测方法、色谱分析类型的检测方法。在本次研究过程中主要针对于HPLC检测方法进行了全面的研究，且最终的研究结果也表明这种分析技术具有良好的准确效果。

1.实验所用的仪器以及试药

1.1 主要仪器设备

FA-2104B电子天平（上海精密科学仪器有限公司），UV-6100S紫外分光光度计（上海普美达仪器有限公司），岛津SPD-10A高压液相色谱仪（日本岛津株式会社）；

1.2 主要实验用药

盐酸氟桂利嗪对照品，盐酸氟桂利嗪口腔崩解片（实验室制备，规格5 mg），甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为高纯水。

2 实验方法以及相应结果

2.1 实验过程中的色谱条件

色谱柱：shimadzu ODS C18柱（150.0 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-磷酸二氢钾（0.01 mol/L，pH=3.5）（68∶32）；流速：1.0 ml/min；检测波长：254 nm；柱温：30℃；进样量：20 μl。

2.2 实验所用溶液配制的关键

2.2.1 对于溶液的配制，对照品溶液需要选用高精度的仪器进行称取。盐酸对照品也需要放置于105℃的环境下进行干燥.对于药品称量的数量，研究人员需要选用60mg的质量标准，放置到50ml的容量瓶中，此时需要加入乙醇10毫升，并进行溶解。为了让药品可以完全稀释，研究人员还需要加入一些盐酸溶液。选用的盐酸质量为24ml，再加入水到1000ml的刻度，做摇匀处理，作为对照品储备液进行归置。此时研究人员需要对储备液进行精密吸取，剂量为一毫升，放置到一百毫升的容量瓶中。加入流动相稀释到刻度，摇匀，此时就可以得到得浓度为12 μg/ml对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液在与盐酸氟桂利嗪口腔崩解片进行配置时，需要选取药品的质量是20片，使用精密的仪器进行测定，为了保障结果的准确性，实验人员还需要将药品进行研碎处理，研细，使用药品取用器皿对这些细粉进行取用，放置到一个100ml的容量瓶中，此时同样需要向药品的量取瓶中加入10ml的乙醇溶液。然后再加入盐酸溶液进行稀释到标准刻度，此时，就可以进行摇匀处理，使用过滤膜对这些溶液进行过滤。再采用精密量取容器将这些过滤后的溶液进行量取，量取5ml质量的续滤液，放置到五十毫升的容量瓶中，加流动相稀释到刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3 方法学考察

2.3.1 线性关系考察精密吸取对照品储备液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml分别置于25 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；依“2.1”项下色谱条件，各取20 μl进样；以峰面积（A）和浓度（C）进行回归分析，得回归方程 A=31250.67C-1547.37，相关系数为r=0.9999；表明盐酸氟桂利嗪浓度为4.8～57.6 μg/ml呈线性关系。

2.3.2 空白试验另取按处方量配制的空白辅料适量，照“2.2.2”项配制成空白溶液，进样测定，结果在对照品主吸收峰处无干扰；取供试品溶液同法测定，主吸收峰保留时间与对照品一致，无杂峰，记录色谱图，盐酸氟桂利嗪HPLC色谱图（HPLC chromatogram of Flunarizine Hydrochloride）。

2.3.3 精密度试验取“2.2.1”项下高、中、低（38.40、28.80、19.23 μg/ml 3个浓度的溶液，在1 d内不同时间测定5次，计算日内精密度分别为0.85%、0.93%、1.06%；每天测定1次，连续测定5 d，计算日间精密度分别为1.21%、1.35%、1.59%。结果表明，方法精密度较好。

2.3.4 重现性试验精密称取同一批盐酸氟桂利嗪口腔崩解片样品约0.24 g，共6份，照“2.2.2”项分别配制供试品溶液，测定峰面积，计算盐酸氟桂利嗪平均含量为 49.48 mg/g，RSD为0.59%。

2.3.5 稳定性试验取同一批样品，按“2.2.2”项下配制供试品溶液，置室温自然放置，分别于0、1、2、4、8、12、24 h取样测定，考察其稳定性，盐酸氟桂利嗪的平均峰面积为 2.596× 106，RSD为0.92%。

2.3.6 回收率试验精密称取盐酸氟桂利嗪对照品约4、5、6 mg各3份，按处方量加入相应的辅料，分别按“2.2.2”项下配制高、中、低3个浓度的溶液，分别测定，计算回收率分别为99.26%、100.28%、101.27%，RSD分别为0.97%、1.26%、1.49%。其平均回收率为100.27%，RSD为1.00%（n=9）。

2.3.7 灵敏度试验精密吸取对照品溶液1 ml，置于25 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取适量注入高效液相色谱仪，调节进样量。结果表明：当进样量为2.6 μl时，信噪比（S/N）=3.1，确定最低检测限为 1.25 ng，当进样量为 11.2 μl时，S/N=10.5，确定最低定量限为5.38 ng。

2.4 样品测定

取样品3批，分别按“2.2.2”项下配制供试品溶液，精密吸取 20 μl注入高压液相色谱仪，记录峰面积；另取对照品溶液同法测定，按外标法以峰面积计算盐酸氟桂利嗪的含量。

3 讨论

3.1 检测波长的选择

取照品溶液，在200～400 nm范围内进行扫描；另取空白溶液，同法测定，盐酸氟桂利嗪在253.6 nm处有最大吸收，辅料的吸收度仅为0.0029，干扰较小，故检测波长选择为254 nm。

3.2 流动相的选择

调整流动相组分甲醇和磷酸盐缓冲溶液的比例，当甲醇-磷酸二氢钾（0.01 mol/L，pH=3.5）（68∶32）时，色谱峰峰形最好，不拖尾，保留时间适当，与杂质峰的分离度高；同时进行了甲醇、甲醇-乙腈等为流动相时的试验，结果均不理想。

4.实验结果讨论

采用 HPLC法，考察了供试品溶液稳定性、线性关系、回收率，并进行了重复性试验，结果表明本法适用于盐酸氟桂利嗪片的含量测定。在此次试验后又对市售的其他厂家相同规格样品进行了同法测定，结果良好。本药品对 Ca2+引起的心肌慢动作电位、对血管自发的肌原性收缩活动无影响，对血管自发的肌原性收缩活动及周围血管床的静息血流量无影响。但对内源性去甲肾上腺素、5 羟色胺及前列腺物质与实验性 K+引起的血管收缩则有明显舒张作用，故临床上多用氟桂利嗪治疗脑血管功能障碍及旋晕、耳鸣、头痛等中枢神经系统疾病，也用于由前庭功能紊乱引起的眩晕的对症治疗。

[1]郝红芬.RP-HPLC-FLD法测定盐酸氟桂利嗪片中盐酸氟桂利嗪的含量及含量均匀度[J].海峡药学.2013(12)

[2]郝红芬.RP-HPLC-FLD法测定盐酸氟桂利嗪片中盐酸氟桂利嗪的含量及含量均匀度[J].药品评价.2013(20)

R 473.5

A

1672-5018（2017）03-027-01