血清分泌型卷曲相关蛋白5水平与2型糖尿病肾病的相关性

许 娜，郭淑芹，张云良，马竞轩，王 翯，白广芹，提素芳，黄一茜，杜亚涛

（保定市第一中心医院a.内分泌科；b.体检科；c.检验科，河北保定071000）

血清分泌型卷曲相关蛋白5水平与2型糖尿病肾病的相关性

许 娜a，郭淑芹a，张云良a，马竞轩a，王 翯a，白广芹a，提素芳a，黄一茜b，杜亚涛c

（保定市第一中心医院a.内分泌科；b.体检科；c.检验科，河北保定071000）

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者血清分泌型卷曲相关蛋白5（SFRP-5）水平与糖尿病肾病（DN）的相关性。方法选择T2DM住院患者137例，根据尿白蛋白排泄率（UAER）分为3组：正常白蛋白尿组（A组）47例；微量白蛋白尿组（B组）45例；大量白蛋白尿组（C组）45例。选择50例健康体检者作为对照组。ELISA法检测血清SFRP-5，同时测定空腹静脉血糖（FBG）、血脂、肝肾功能、UAER。比较各组间的指标差异。结果4组SFRP-5比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。T2DM患者血清SFRP-5的水平低于对照组，B组、C组血清SFRP-5水平高于A组，C组血清SFRP-5水平高于B组（均P＜0.05）。血清SFRP-5水平与舒张压（DBP）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、FBG、空腹血清胰岛素（Fins）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、尿素氮（BUN）、肌酐（CR）、UAER呈正相关，与高密度脂蛋白（HDL）、肾小球滤过率（GFR）、总胆红素呈负相关。多元线性回归分析显示，UAER、HOMA-IR、空腹血糖（FBG）、空腹血糖（FBG）、尿酸（UA）、收缩压（SBP）、TG是SFRP-5的独立影响因素。结论T2DM患者血清SFRP-5水平随着UAER的增加而升高，两者可能参与糖尿病肾病的发生，并可能成为糖尿病肾病发生及发展过程中的新的标记物。

糖尿病，2型；糖尿病肾病；分泌型卷曲相关蛋白5

分泌型卷曲相关蛋白5（secreted frizzled-relatedprotein-5，SFRP-5）是分泌型卷曲相关蛋白家族中的一员，被证实是继脂联素后的又一抗炎脂肪因子，其可能通过炎症反应参与肥胖及糖尿病等代谢性疾病的发生［1］。目前，关于SFRP-5与糖尿病微血管病变的研究少见报道。本研究通过测定2型糖尿病（T2DM）患者血清SFRP-5水平变化，探讨T2DM患者血清SFRP-5与尿微量白蛋白排泄率（UAER）的相关性及血清SFRP-5是否可以作为糖尿病肾病（DN）早期预测指标。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2015年12月至2016年5月保定市第一中心医院内分泌科住院治疗的T2DM患者137例。根据UAER水平将患者分为3组：正常白蛋白尿（UAER＜20μg／min）；微量白蛋白尿（20μg／min≤UAER＜200μg／min）；大量白蛋白尿（UAER≥200μg／min），其中正常白蛋白尿组（A组）男25例，女22例，平均年龄（55.04±8.52）岁，微量白蛋白尿组（B组）男21例，女24例，平均年龄（57.56±9.58）岁，大量白蛋白尿组（C组）男28例，女17例，平均年龄（56.27±9.94）岁。所有研究对象均符合1999年美国食品药品管理局（WHO）T2DM的诊断标准；排除标准：①有心脏、肝脏、其他肾脏疾病以及各种感染性疾病者；②1型糖尿病患者；3个月内发生酮症酸中毒或高渗性昏迷者；③近2周服用血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素受体阻断剂、胰岛素增敏剂及其他影响尿蛋白药物者。同时，选取同期于我院体检科50例正常体检者作为对照组，其中，男25例，女25例，平均年龄（53.96±10.33）岁。

1.2 研究方法 记录研究对象的性别、年龄、病程，测量其身高、体质量、血压，均禁食10小时于次日清晨采集空腹静脉血5 ml。采用日立全自动7600生化仪器检测空腹血糖（FBG）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、尿酸（UA）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）等生化指标，电化学发光法（德国罗氏电化学发光仪Cobas6000-E601）测定空腹胰岛素（FIns），利用稳态模式评估法（HOMA model）计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）＝（FBG×FIns）／22.5。根据Cockcroft-Gault公式计算肾小球滤过率（eGFR）＝（140-年龄）×体质量（kg）×K／血浆Cr（μmol／L）。K：男性1.25，女性1.03。抽血后留取24小时尿测定UAER（免疫散射法，重庆博士泰生物技术有限公司提供的全自动特定蛋白分析仪）。ELISA法测定SFRP-5（上海酶联生物科技有限公司提供试剂盒，批内差异＜6%，批间差异＜10%）。

1.3 统计学方法 应用SPSS 19.0统计软件进行统计分析处理，正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，非正态分布计量资料用中位数（四分位间距）表示。多组间比较用方差分析，组间差异比较采用t检验，计数资料用百分率表示，组间比较采用χ2检验。对于非正态分布用非参数检验进行比较。相关性分析使用Pearson方法。通过多元线性回归分析SFRP-5的相关影响因素。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 一般资料及生化指标 4组性别、年龄、BMI、ALT、AST差异均无统计学意义。4组SFRP-5比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。T2DM患者血清SFRP-5的水平显著低于对照组（P＜0.05），B组、C组血清SFRP-5水平显著高于A组（P＜0.05），C组血清SFRP-5水平显著高于B组（P＜0.05）。4组DBP、CHO、TG、FBG逐渐升高，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 各组一般资料及生化指标比较

注：A组：正常白蛋尿组；B组：微量白蛋尿组；C组：大量蛋白尿组。与对照组比较，*P＜0.05；与A组比较，＃P＜0.05；与B组比较，▲P＜0.05；1 mm Hg＝0.133 kPa

2.2 SFRP-5与相关指标的相关性分析 T2DM患者血清SFRP-5水平与DBP、CHO、TG、FBG、Fins、HOMA-IR、BUN、Cr、UAER呈正相关（P＜0.05），与HDL-C、eGFR、总胆红素呈负相关（P＜0.05）。见表2。

表2 SFRP-5与相关指标的相关性分析

2.3 SFRP-5的相关影响因素分析 以SFRP-5为因变量Y，以DBP、CHO、TG、HDL-C、总胆红素、FBG、Fins、HOMA-IR、BUN、Cr、UAER、eGFR为自变量，进行多元线性回归分析，结果显示，UAER、HOMA-IR、FBG、FBG、UA、SBP、FBG、TG是SFRP-5的独立影响因素。见表3。

表3 SFRP-5与各相关指标的多元线性回归结果

3 讨 论

糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病。我国20岁以上人群中，糖尿病的患病率为9.7%［2］。DN是糖尿病特异性微血管并发症，也是糖尿病患者常见的慢性并发症之一。DN已成为欧美国家终末期肾病（end-stage renal disease，ESRD）的首位原因，在我国ESRD的病因中也高居第2位［3］。DN发展隐匿，早期不易发现，患者一旦出现大量蛋白尿，缺乏有效的治疗措施，很快进展为ESRD。因此，对DN早期筛查及治疗方法的探索显的尤为重要。目前认为DN是肾脏血流动力学改变、糖脂代谢紊乱、氧化应激、多种细胞因子、胰岛素抵抗和遗传因素共同作用的结果［4］。研究认为，慢性、低水平炎性反应在DN的发生及发展中起重要作用［5］。

目前研究证实SFRP-5是一种新发现的抗炎脂肪因子。Ouchi等［6］研究表明SFRP-5可能通过抗炎机制实现增强胰岛素敏感性及改善糖代谢异常。其具体机制为SFRP-5与脂肪细胞分泌的Wnt5a结合，阻止非经典的Wnt信号通路下游的c-Jun氨基端激酶磷酸化，抑制巨噬细胞激活，减少肿瘤坏死因子、白细胞介素6等炎症因子释放，最后减弱炎症对胰岛素信号通路的抑制作用，拮抗胰岛素受体底物1丝氨酸磷酸化，从而增加胰岛素敏感性，改善胰岛素抵抗。但是，Mori等［7］研究发现，沉默SFRP-5并不影响胰岛素信号通路中胰岛素受体底物1丝氨酸及c-Jun氨基端激酶磷酸化，因此提出了，Wnt5a或SFRP-5可能不参与调控脂肪细胞胰岛素敏感性。本研究发现，A组血清SFRP-5较对照组水平降低，这与Hu等［8］及尹经霞等［9］研究结果一致，但与Mori等［7］，Canivell等［10］研究结果相反。考虑可能与实验设计，Elise实验操作过程差异，人与实验动物的差异，或者地域与种族区别有关。

刘云涛等［11］研究认为SFRP-5在单纯糖尿病组及早期肾病组表达水平逐渐降低，考虑可能有胰岛素或TNF-α水平升高抑制SFRP-5分泌有关。本研究发现SFRP-5在糖尿病各组表达水平随着肾脏病变程度加重而增加。患者单纯患糖尿病的情况下，SFRP-5表达水平下降［12］，合并肾脏病变后表达水平逐渐升高，推测可能机制是：①肾脏病变刺激机体分泌更多地SFRP-5以对抗炎症反应；②肾脏病变导致肾脏滤过功能减低，SFRP-5排泄减少导致SFRP-5升高。目前具体机制尚不明确，有待进一步研究。本研究与刘云涛等［11］研究结果不一致，考虑原因可能与入选研究对象存在差异有关，刘云涛研究中所纳入病例病程较短，均小于3年，且UAER等指标数值偏低或血糖控制情况不相等。本样本为小样本试验存在混杂因素较多，有待大样本流行病学调查进一步研究SFRP-5在糖尿病中的表达。

本研究发现，T2DM患者SFRP-5与FBG、CHO、TG、HDL-C、HOMA-IR有关，说明SFRP-5可能通过糖脂代谢、胰岛素抵抗共同作用于DN的发生发展。SFRP-5与BUN、CR、UAER、eGFR有相关性，推测SFRP-5可能参与了DN的发生发展。多元线性回归分析显示UAER、HOMA-IR、FBG、TG是SFRP-5的独立影响因素。进一步证实了SFRP-5可能通过糖脂代谢、胰岛素抵抗参与DN的发生。

另外，本研究发现血清SFRP-5水平与总胆红素水平相关。胆红素作为机体内的一种天然内源性抗氧化剂，能够清除自由基、抑制脂质过氧化、减轻氧化损伤［13］。张晓凡等［14］研究发现血清胆红素是早期DN的观察指标。目前许多研究均证实，每1 mmol／L胆红素可以清除2 mmol／L过氧化自由基［15］。也就是说血清胆红素水平在一定程度上可以反映机体抗氧化的能力。本研究还发现UA是SFRP-5的独立影响因素，多项研究已证明UA是一种强大的抗氧化剂，且与DN有关［16-17］。Carstensen等［18］研究发现SFRP-5与氧化应激标记物8-Isoprostane、Nitrotyrosine相关，也证明SFRP-5与氧化应激有关。因此，SFRP-5或可通过氧化应激作用于DN的发生发展。

综上所述，糖尿病患者血清SFRP-5水平随UAER增加而升高，说明其可能参与DN发生发展，为T2DM早期诊断及病情评估中提供新思路。但SFRP-5在DN发病中的具体机制还需要更深入的研究证明。

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ReIationship study between serum secreted frizzIed-reIated protein 5 IeveI and diabetic nephropathy

Xu Naa，Guo Shuqina，Zhang Yunlianga，Ma Jingxuana，Wang Hea，
Bai Guangqina，Ti Sufanga，Huang Yiqianb，Du Yataoca.Department of En docrinology；b.Department of Physical Examination；c.Department of Laboratory Medicine，Baoding No.1 Central Hospital，Baoding 071000，China Correspon din g author：Guo Shuqin，Email：977516748＠qq.com

ObjectiveTo investigate relationship between serum secreted frizzled-related protein 5（SFRP-5）and diabetic nephropathy.MethodsA total of 137 patients with type 2 diabetes mellitus were enrolled.According to urinary albumin excretion rate，all patients with type 2 diabetes mellitus were divided into three groups：normal albuminuria group（group A，n＝47），microalbuminuria group（group B，n＝45）and macroalbuminuria group（group C，n＝45）.The control group included 50 healthy individuals.Serum SFRP-5 was determinated with ELISA method.Fasting venous blood samples were collected for glucose and lipid.Twenty-four hour urine was also collected for UAER.Differences of indexes were compared between groups.ResuItsThe level of serum SFRP-5 between groups was statistically significant（P＜0.05）；The level of serum SFRP-5 in T2DM group was significantly lower than that of the normal control group（P＜0.05）；The levels of serum SFRP-5 in the microalbuminuria group and macroalbuminruia group were significantly higher than that of normal albuminuria group（P＜0.05），and the level of serum SFRP-5 in the macroalbuminuria group was significantly higher than that of the microalbuminuria group（P＜0.05）.Correlation analysis showed that the levels of SFRP-5 were positively correlated with DBP，CHO，TG，FBG，Fins，HOMA-IR，BUN，CR and UAER，and negatively correlated with HDL，eGFR and total bilirubin.Multiple linear regression analysis showed that the levels of UAER，HOMA-IR，FBG，UA，SBP and TG were independent influencing factors for SFRP-5.ConcIusionSerum SFRP-5 gradually increases as the urinary albumin excretion rate becomes higher in patients with type 2 diabetes mellitus，both may be involved in the occurrence and development of diabetic nephropathy（DN），and may Serum SFRP-5 become a new marker of diabetic nephropathy.

secreted frizzled-related protein 5；type 2 diabetes mellitus；diabetic nephropathy

R587.2

：A

：1004-583X（2017）03-0233-04

10.3969／j.issn.1004-583X.2017.03.013

2016-11-03 编辑：王秋红

郭淑芹，Email：977516748＠qq.com