高效液相色谱法测定羧甲基淀粉钠中氯乙酸残留量

顾 林，李新旺，李 静，汪 莉

（扬子江药业集团南京海陵药业有限公司，江苏 南京 210049）

高效液相色谱法测定羧甲基淀粉钠中氯乙酸残留量

顾 林，李新旺，李 静，汪 莉

（扬子江药业集团南京海陵药业有限公司，江苏 南京 210049）

目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定羧甲基淀粉钠中氯乙酸残留量。方法 采用Agilent SBC8柱（250 mm×4.6 mm，5 µm），以水-乙腈（90.5:9.5）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长214 nm，柱温30℃，进样20µL。结论 氯乙酸结果在0.9860 ng/mL～19.7208 ng/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为y=580.94x+0.0509（r=1.000，n=5），重复性RSD为2.0%，平均回收率为90.9%（n=9），溶 液在10小时之内稳定，该方法的定量限浓度为1.97208 μg/mL。该方法简便、经济、快速、专属性好、重复性好，测定羧甲基淀粉钠中氯乙酸残留。

高效液相色谱法（HPLC）；外标法；氯乙酸残留物

羧甲基淀粉钠是一种用羧甲基醚化的变性淀粉，无味、无毒、不易霉变、易溶于水。它广泛应用于不溶性药物及可溶性药物片剂的高效崩解剂、赋形剂。羧甲基淀粉钠常用制备工艺是由淀粉与氯乙酸反应制备[1]，若生产过程中残留氯乙酸，将与某些原料药发生反应，导致制剂有关物质不合格。羧甲基淀粉钠收录于《中国药典》2015年版二部第608页[2]，但无氯乙酸残留量标准，目前国内仅有离子色谱法测定其氯乙酸残留量[3-4]。因此，本文首次采用高效液相色谱法测定羧甲基淀粉钠中氯乙酸残留量，方法较为简便、快速、准确。

1 仪器设备与试药

1.1 仪器设备仪器

Agilent1260高效液相色谱仪（安捷伦科技：含在线脱气机、自动进样器、四元泵、柱温箱、温控模块及VWD检测器）、XS-205电子天平（梅特勒-托利多）。

1.2 试剂与试药

羧甲基淀粉钠（湖州展望药业有限公司，批号：20160502），氯乙酸（国药集团化学试剂有限公司，批号20170214，纯度99%），乙腈为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

硅烷键合硅胶色谱柱（Agilent SB C8，250 mm×4.6 mm 5 μm）；检测器：VWD检测器，检测波长214 nm，柱温：30℃，进样量：20 µL，流速：1.0 mL/min，以水-水乙腈（90.5:9.5）为流动相。

2.2 供试品溶液的制备

精密称取羧甲基淀粉钠0.625 g置50 mL容量瓶中，加水适量，充分震荡使溶解，加水定容，过滤，即得供试品溶液。

2.3 梯度标准溶液的制备

精密称取氯乙酸0.1 g置100 mL量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀作为标准贮备液，分别移去0.1 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL标准贮备液于5个100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为梯度标准溶液（梯度标准溶液临用新配，不能贮存）。

2.4 测定方法

按照2.1项下的色谱条件，精密量取梯度标准溶液及供试品溶液各20 µL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积计算羧甲基淀粉钠中氯乙酸的含量。

2.5 专属性

取溶剂空白溶剂、流动相、供试品溶液及最高浓度的梯度标准溶液各20 µL注入液相色谱仪，记录色谱图，结果表明空白溶剂及流动相记录的色谱图中各成分峰均不干扰主成分色谱峰的测定，供试品溶液中主峰相邻杂质峰与主成分峰的分离度R＞1.5，表明该试验方法的专属性良好。

2.6 溶液稳定性按

2.2项下所述操作，制备供试品溶液，室温避光放置，分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时，精密量取20 µL注入高效液相色谱仪，以其峰面积计算相对标准偏差RSD（%），各时间点的RSD均小于2.0%，，表明供试品溶液在11小时内具有良好的稳定性。

2.7 精密度

2.7.1 重复性

取本品，按2.2项下配制方法配制供试品溶液6份，按2.3项下梯度标准溶液制备的配制方法制备梯度标准溶液，照2.1及2.4项下的色谱条件及测定方法进行检测，计算得依帕司他胶囊-颗粒的平均含量为0.062%，RSD=2.0%（n=6），说明该方法的重复性良好。

2.7.2 中间精密度

取同一批羧甲基淀粉钠，在不同的日期，由不同的操作人员使用的不同仪器，照2.1、2.2、2.3及2.4所述色谱条件和测定方法对其进行检验，计算得氯乙酸的平均含量为0.061%，RSD为2.8%，表明该方法的中间精密度良好。

2.8 线性关系考察

精密称取氯乙酸适量，用水分别配制成每1 mL中含氯乙酸为0.00098604 mg、0.0049302 mg、0.0098604 mg、0.0147906 mg和0.0197208 mg的溶液，在214 nm波长下测定的峰面积为0.691304、2.82073、5.85289、8.52245和11.58158。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，进行线性回归，求得回归方程为：y=580.94x+0.0509（r=1.000，n=5）。结果表明氯乙酸在0.9860 µg/mL～19.7208 µg/mL浓度范围内线性关系良好。

2.9 准确度

精密称取氯乙酸0.08 g、0.1 g、0.12 g各三份分别置200 mL量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，得准确度测定三个浓度梯度母液共九份，再精密称取羧甲淀粉钠0.250 g、0.312 g、0.375 g各三份，分别置50 mL量瓶中，依次量取准确度梯度母液各0.5 mL置上述9份样品中，加水适量，充分震荡使溶解，加水定容，过滤，即得准确度梯度考察溶液，取三个浓度梯度考察溶液各20 µL注入液相色谱仪，记录色谱图，计算氯乙酸的回收率。氯乙酸的平均回收率为90.9%，RSD=0.1%（n=9）。

2.10 定量限

取氯乙酸约99.6 mg，置200 mL量瓶中，加水稀释至适至刻度，摇匀。 再精密量取1 mL，置250 mL量瓶中，加水稀释至适至刻度，摇匀，精密量取20 µL注入液相色谱仪，此时溶液浓度为1.97208 µg/mL，精密量取20 µL注入液相色谱仪，其信噪比为11.1，符合规定，即该方法的定量限浓度为1.97208 µg/mL。

3 讨 论

首次以高效液相色谱法测定羧甲基淀粉钠中氯乙酸的残留量，准确度高，精密度高，且线性、回收率、稳定性等结果均符合要求。

[1]江雄知,崔丽丽,李和平,羧甲基淀粉钠的合成与应用研究进展[J].精细与专用化学品,2008,17:23-27.

[2]张锦梅,张苗苗,郑秀瑾,商荣宁,张习志,离子色谱法测定羧甲基淀粉钠中羟基乙酸根、氯乙酸根、氯离子、磷酸根和硫酸根的含量[J].理化检验(化学分册),2017,53:611-614.

Determination of chloroacetic acid residue in sodium carboxymethyl starch by high performance liquid chromatography

GU Lin, LI Xin-wang, LI Jing, WANG Li
(Yangtze River Pharmaceutical Group Nanjing Hailing Pharmaceutical Co., Ltd.,Jiangsu Nanjing 210049, China)

ObjectiveTo establish a method for the determination of thechloroacetic acidresidueofSodium Carboxymethylstarch. Methods the determination was performed on AgilentSB C8column,withmoboile phasewater:aceticacid(90.5:9.5).The flow rateis 1.0mL/min.The detection wavelength was set at 214 nm and the injection volum was 20µL. Results The liner range was 0.9860µg/mL～19.7208µg/mL(R2=0.9974),the RSD of repeatability is 2.0pecent. Conclusion The method is simple and accurate,and suitable for quality control of the chloroacetic acid residue of Sodium Carboxymethyl starch.

High Performance Liquid Chromatography; Chloroacetic acid; Residue

R927

A

ISSN.2095-8242.2017.40.7726.02

本文编辑：王雨辰