孕早期血清胎盘生长因子在妊娠期高血压疾病筛查中的应用

韩 瑾，张 蒙，许遵鹏，潘 敏，李东至，廖 灿

(广州市妇女儿童医疗中心，广东 广州 510623)

孕早期血清胎盘生长因子在妊娠期高血压疾病筛查中的应用

韩 瑾，张 蒙，许遵鹏，潘 敏，李东至，廖 灿

(广州市妇女儿童医疗中心，广东 广州 510623)

目的 探讨孕早期母体血清胎盘生长因子(PLGF)与妊娠期高血压疾病的关系。方法采用荧光免疫分析法检测妊娠早期590例正常孕妇及118例妊娠期高血压病孕妇PLGF血清浓度，其中重度子痫前期组45例，轻度子痫前期组37例，妊娠期高血压组36例，应用Logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线评价PLGF应用对妊娠期高血压疾病的诊断价值。结果研究显示正常孕妇血清PLGF浓度随孕周增加而上升(b=0.40，P<0.0001)。经孕周校正后的对数(Log)10PLGF中位数倍数(MoM)值分别是：正常对照组1.02(0.96～1.09)，重度子痫前期组0.86(0.77～0.93)，轻度子痫前期组0.97(0.89～1.03)，妊娠期高血压组0.98(0.90～1.05)。重度子痫前期组PLGF浓度显著降低，与正常对照组、轻度子痫前期组及妊娠期高血压组相比均有显著性差异(H=18.5，P<0.0001)；轻度子痫前期组与对照组PLGF浓度也明显降低，差异有统计学意义(H=14.6，P=0.001)，其余各组间无统计学差异。当妊娠早期孕妇血清PLGF≤31.40pg/mL时，预测重度子痫前期敏感度为82.20%，特异度79.30%。结论妊娠高血压疾病孕妇孕早期血清PLGF浓度明显降低，妊娠早期检测PLGF对该病有重要预测价值。

妊娠期高血压疾病；胎盘生长因子；孕早期；产前筛查

胎盘生长因子(maternal serum placental growth factor，PLGF)是血管生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族中成员，表达于胎盘滋养细胞，通过特异结合受体VEGFR-1/Flt-1(fms-like tyrosine kinase-1)激活其生物学功效，对滋养层细胞及内皮细胞功能有重要调节作用，从而对血管生成有产生作用。妊娠期高血压疾病是妊娠特有疾病，其发病机制及病因不十分清楚，发病率约5%～12%，严重影响母婴健康。近年来PLGF与妊娠期高血压病关系受到广泛关注，Chappell等[1]研究发现低浓度PLGF对在2周内发展为子痫前期(pre-eclampsia，PE)的孕妇有很好预测作用，Boucoiran等[2]通过对妊娠11～14周、18～22周PLGF预测子痫前期分析发现，选择早孕期筛查先兆子痫效果会明显优于孕中期筛查。但PLGF是否在我国妊娠高血压病孕妇有预测作用并未见研究报道，作为唐氏筛查的早期标记物PLGF已在国外开展临床应用，为早期筛查妊娠期高血压疾病提供了适当的临床检测时机。本研究旨在探讨早孕期PLGF浓度对中国人群先兆子痫发生、严重程度的预测价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年1月至2014年1月在广州市妇女儿童医疗中心产科住院分娩的妊娠高血压疾病孕妇118例为研究研究对象，其诊断和分类标准参照《妇产科学》[3]，依据病情严重程度分为3组，其中轻度子痫组30例，孕周(37.50±2.20)周，年龄(30.30±4.30)岁；重度子痫前期组32例，孕周(32.60±4.30)周，年龄(30.50±4.20)岁；妊娠期高血压组36例。选取符合条件的正常孕妇590例为对照组，平均孕周(39.20 ±2.10)周，平均年龄(29.50±3.50)岁。3个研究组和对照组均在孕期常规参加早期唐氏筛查，经知情同意后，孕妇血清样本贮存于-20℃的冰箱，各组孕妇均为单胎，孕前均无原发性高血压、糖尿病、慢性肾炎、甲状腺功能亢进、肝炎及结核等急慢性疾病史，无烟酒不良嗜好，孕期随访如胎儿患有染色体异常、结构畸形的孕妇均排除出组。所有患者均为汉族，自然受孕，各组孕妇年龄、孕周比较差异无显著性差异(均P>0.05)。

1.2 方法

血清中PLGF的浓度水平测定采用时间分辨荧光免疫分析法。测量所用仪器、试剂和质控品均为美国Perkin Elmer公司生产的Auto Delfial235全自动时间分辨荧光免疫分析仪和Delfia试剂，检测前1天，将样本移至4℃的冰箱初步复溶，测量当日将样本置于室温(25～26℃)进行再次复溶30min，待血清完全溶解，将血清从离心管移至取样量杯内，将样本置于AutoDELFIA 1235自动免疫系统进行浓度检测和分析，操作严格按照说明书进行。

1.3 统计学方法

将PLGF浓度经对数(Log)转换后，获得测量数据的正态分布，所有的浓度测量值均转换为中位数倍数(multiples of the median，MoM)，并用母亲体重指数、孕龄对MoM值进行校正，通过回归重新获得中位数方程，生成MoM值。采用SPSS 20.0统计软件进行统计学处理，连续型变量应用K-S法进行正态性检验；分类变量之间的差异转换为频数和百分比，用Chi-square检验进行分析比较；多组定量资料比较时，若变量为正态分布且方差齐时，应用单因素方差分析法，若为非正态分布或方差不齐时用Kruskale-Wallis检验法；行一元回归分析评估血清PLGF与孕妇体重或体重指数、预产年龄、孕周是否相关；利用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic，ROC)对生化指标诊断学价值进行分析，同时计算曲线下面积及95%置信区间，通过Logistic回归分析获得各指标联合诊断价值。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究病例的一般资料比较

本研究共有708例孕妇作为研究对象，正常孕妇590例，妊娠期高血压疾病118例，其中重度子痫前期45例，轻度子痫前期37例，妊娠期高血压36例。4组孕妇预产年龄、孕周、样本储存时间、孕产次、孕妇体重比较，显示4组间差异无统计学意义(均P>0.05)。体重指数(body mass index，BMI)在重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠期高血压组及正常对照组分别为21.0(19.2～23.4)、22.1(19.6～23.8)、21.6(18.9～25.1)、20.3(18.7～22.0)kg/m2，4组间差异有统计学意义(P=0.000)，见表1。

表1 病例组与对照组母体一般特征的比较

注：*为Kruskale-Wallis法进行比较得出的H值，**为卡方检验得出卡方值。★与正常对照组相比有统计学差异。

2.2 组间妊娠结局的比较

重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠期高血压组及正常对照组分娩孕周分别为35.60(33.90～38.00)、39.00(37.90～39.60)、39.4(38.00～40.10)、39.40(38.70～40.10)周。应用Bonferroni法比较，重度子痫前期组分娩时间明显早于其他3组(P值均为0.00)差异有统计学意义，轻度子痫前期组低于正常对照组(P=0.001)。

重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠期高血压组及正常对照组胎儿体重分别为2.17(1.45～2.83)kg、3.10(2.67～3.45)kg、3.11(2.78～3.38)kg、3.24(3.03～3.48)kg。重度子痫前期组低于正常对照组、轻度子痫前期组及妊娠期高血压组(均P=0.000)，余各组间无统计学差异，见表2。

表2 各组间妊娠结局的比较

注：统计值均为Kruskale-Wallis法进行比较得出的H值。★为与正常对照组比较差异有统计学差异，▲为与轻度子痫前期组比较差异有统计学差异，■为与妊娠期高血压组比较差异有统计学差异。

2.3 正常孕妇血清PLGF浓度的分布

经K-S检验对照组PLGF浓度呈非正态分布，将PLGF进行对数转换Log10 PLGF(pg/mL)为正态分布。采用一元线性回归探讨Log10 PLGF(pg/mL)的影响因素，从而避免混杂因素的存在导致分析数据的偏倚。孕妇血清PLGF浓度与孕周呈正相关(b=0.40，P<0.0001)，本研究中590例正常孕妇通过最佳拟合加权回归曲线获得PLGF中位数值水平，公式为：Log10 PLGF(pg/mL)=0.11+0.017×孕周，见图1。

图1 正常妊娠孕妇血清Log10 PLGF(pg/mL)在不同孕周(天)的分布

2.4 胎盘生长因子浓度在病例组与对照组的比较

正常孕妇血清PLGF浓度水平随孕周而升高(b=0.40，P<0.0001)，经孕周校正后的Log10PLGFMoM值在正常对照组为1.02(0.96～1.09)，重度子痫前期组为0.86(0.77～0.93)，轻度子痫前期组0.97(0.89～1.03)及妊娠期高血压组0.98(0.90～1.05)，重度子痫前期孕妇血清PLGF浓度与正常对照组、轻度子痫前期组及妊娠期高血压组相比显著降低(H=18.5,P<0.0001)；轻度子痫前期组较对照组显著，差异有统计学意义(H=14.6,P=0.001)，其余各组无显著性差异，见图2。

图2 PLGF浓度4组孕妇之间的比较

2.5 胎盘生长因子对重度的预测

重度子痫前期孕妇血清PLGF浓度显著低于其他3组，PLGF在诊断重度子痫前期ROC曲线下面积为0.83，95%可信区间下限大于70.00%，其Log10PLGFMoM阳性判断值为0.94，对应的PLGF(pg/mL)为31.40 pg/mL。当孕早期PLGF≤31.4pg/ml时，预测重度子痫前期的敏感度为82.20%，特异度79.30%，见图3。

图3 PLGF对重度子痫前期的诊断价值

3 讨论

妊娠期高血压疾病是全世界孕产妇和围产儿死亡的重要原因之一，对母胎危害性较大，早孕期筛查高危人群可以应用阿司匹林预防PE及降低并发症发生，选择合适的筛查指标预测高血压孕妇将对临床结局改善有重大作用[4]。PLGF为同型二聚体糖蛋白，属VEGF家族成员，通过特异性结合VEGFR-1/Flt-1受体来激活其生物学功能，对母体胎盘血管重铸有重要作用，PLGF也是胎盘血管形成的重要条件，因此PLGF浓度的变化可间接反应胎盘功能。

3.1 胎盘生长因子在正常孕妇与妊娠高血压疾病的孕妇血液中浓度

PLGF在正常孕妇血清中浓度较高，而未孕女性及男性体内PLGF极低甚至检测不到，正常孕妇中早期血清PLGF浓度较低，15周后明显上升，28～30周达到高峰后下降，而在妊娠小于30周PE孕妇，PLGF水平均呈较低水平。国外研究认为通过比较孕早期子痫前期孕妇和正常对照组母体血清中妊娠相关蛋白-A、PLGF及母体相关指标，如平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)、子宫动脉PI值等，发现PLGF浓度在子痫前期孕妇中明显下降，尤其在早发型子痫前期孕妇，联合应用这些指标可筛查出93.10%的早发型子痫前期、35.70%晚发型子痫前期及18.30%妊娠期高血压孕妇，认为妊娠早期PLGF浓度变化可预测子痫前期的发生[5]。

本研究显示妊娠11～13+6周外周血PLGF浓度随孕周上升，与国外研究相似，因此在进行PLGF计算时需考虑进行相关孕周矫正，本研究为避免混杂因素对实验结果产生偏倚，对病例组和对照组进行严格匹配，3组病例组和对照组孕妇的采样孕周、预产年龄、样本贮存时间、孕产次及体重因素间均无显著性差异，但发现体重指数(BMI)在各组间有统计学差异，通过一元线性回归分析混杂因素对PLGF的影响，发现PLGF与体重指数无显著相关，这一结论同Gullai等[6]学者研究结果相一致。重度子痫前期组分娩孕周显著早于其他3组，胎儿的出生体重也低于正常对照组、轻度子痫前期组及妊娠期高血压组。

3.2 PLGF在妊娠期高血压疾病的诊断价值

本研究显示重度PE孕妇外周血PLGF浓度较其他3组显著降低，轻度PE与妊娠期高血压组比较也低于正常孕妇组，提示妊娠早期PLGF对妊娠期高血压疾病有一定预测作用，这与我国张琳的研究结果类似[7]，尤其是对重度子痫前期预测意义较高，ROC面积为0.83，诊断灵敏度和特异度分别为82.20%和79.30%，结果显示PLGF浓度切割值为31.40pg/mL。由于重度子痫前期与围产儿病死率和母体并发症关系更为密切，因此应用PLGF预测重度子痫前期将有良好的临床应用前景。国外研究还发现低浓度PLGF对2周内发展为PE的孕妇也有很好预测作用，而且较现行的常规检查如血压、尿蛋白定量等效果更好，因此妊娠中晚期检测PLGF同样可预测PE发生，当假阳性率为5%时，检出率达93.70%[8]。

综上所述，妊娠早期孕妇血清PLGF下降对PE有重要预测价值，可以考虑常规用于临床PE的孕早期及孕中晚期的人群筛查。

[1]Chappell L C,Duckworth S,Seed P T,etal.Diagnostic accuracy of placental growth factor in women with suspected preeclampsia: a prospective multicenter study[J].Circulation,2013,128 (19):2121-2131.

[2]Boucoiran I,Suarthana E,Rey E,etal.Repeated measures of placental growth factor,placental protein 13,and a disintegrin and metalloprotease 12 at first and second trimesters for preeclampsia screening[J].Am J Perinatol,2013,30(8):681-688.

[3]谢幸,苟文丽,林仲秋,等.妇产科学[M].8版.北京:人民卫生出版社,2013:65-66.

[4]Roberge S,Villa P,Nicolaides K,etal.Early administration of low dose aspirin for the prevention of preterm and term preeclampsia:a systematic review and meta-analysis [J].Fetal Diagn Ther,2012,31(3): 141-146.

[5]Crovetto F,Fiqueras F,Triunfo S,etal.Added value of angiogenic factors for the prediction of early and late preeclampsia in the first trimester of pregnancy[J].Fetal Diagn Ther,2014,35 (4):258-266.

[6]Gullai N,Stenczer B,Molvarec A,etal.Evaluation of a rapid and simple placental growth factor test in hypertensive disorders of pregnancy[J].Hypertens Res,2013,36(5):457-462.

[7]张琳,沈树娜,王辉.HIF-1α和PlGF与子痫前期发病的关系[J].中国妇幼健康研究,2009,20(5):494-496.

[8]Nicolaides K H.Screening for fetal aneuploidies at 11 to 13 weeks[J].Prenat Diagn,2011,31(1):7-15.

[专业责任编辑：杨文方]

Application of first-trimester serum placental growth factor in the screening for gestational hypertension

HAN Jin, ZHANG Meng, XU Zun-peng, PAN Min, LI Dong-zhi, LIAO Can

(GuangzhouWomanandChildren’sMedicalCenter,GuangdongGuangzhou510623,China)

Objective To investigate the correlation between first-trimester serum placental growth factor (PLGF) and gestational hypertension. Methods A total of 590 cases of healthy pregnant women and 118 cases of pregnant women diagnosed with gestational hypertension were chosen as research objects. Their serum concentrations of PLGF were measured by fluorescence immunoassay in their first-trimester pregnancy. The 118 cases of women with gestational hypertension were divided into severe preeclampsia group (n=45), mild preeclampsia group (n=37) and gestational hypertension group (n=36). Logistic regression analysis and receiver operating characteristic curve (ROC) were used to analyze the diagnostic value of PLGF for gestational hypertension. Results Research showed that serum concentration of PLGF grew with gestational weeks in healthy pregnant women (b=0.40,P<0.0001). The value of multiples of the median (MoM) of Log10PLGF after correction for gestational weeks was 1.02 (0.96-1.09) in the control group of healthy pregnant women, 0.86 (0.77-0.93) in severe preeclampsia group, 0.97 (0.89-1.03) in mild preeclampsia group and 0.98 (0.90-1.05) in gestational hypertension group, respectively. Significant decrease was identified in serum concentration of PLGF in severe preeclampsia group and when compared with control group, mild preeclampsia group and gestational hypertension group were significantly different (H=18.5,P<0.0001). Obvious drops in PLGF concentration were also seen in mild preeclampsia group and control group, and the difference was of statistical significance (H=14.6,P=0.001). No statistical difference was noted when other intergroup comparisons were made. When patients' serum concentration of PLGF was lower than or equal to 31.40pg/mL, its sensitivity and specificity for the prediction of severe preeclampsia reached 82.20% and 79.30%, respectively. Conclusion The concentration of PLGF decreases significantly in pregnant women with hypertension at their first trimester. The detection of PLGF at the first trimester can work as a valuable marker for the prediction of gestational hypertension.

gestational hypertension; placental growth factor (PLGF); first trimester; prenatal screening

2016-05-17

广东省卫计委资助项目(A2013515)；广东省科技厅资助项目(2016A20218003)；广州市卫生局资助项目(201102A213089)

韩 瑾(1978-)，女，副主任医师，硕士，主要从事产前诊断研究。

廖 灿，主任医师。

10.3969/j.issn.1673-5293.2016.06.009

R714.2

A

1673-5293(2016)06-0698-04