山海螺的化学成分初步研究

马秉智 ，王景雁 ，，赫 军 ，李 栋 ，兰 颐 ，张迅杰 ，邱 玥 ，陆 进 ⋆，吴 清

（1.中日友好医院 药学部，北京 100029；2.北京中医药大学 中药学院，北京 100102；3.山东达因海洋生物制药股份有限公司，威海 264300）

技术与方法

山海螺的化学成分初步研究

马秉智1，王景雁1，2，赫 军1，李 栋1，兰 颐3，张迅杰2，邱 玥2，陆 进1⋆，吴 清2

（1.中日友好医院 药学部，北京 100029；2.北京中医药大学 中药学院，北京 100102；3.山东达因海洋生物制药股份有限公司，威海 264300）

山海螺为桔梗科植物羊乳的根，原植物为Condonopsis lanceolata （Sieb.et Zucc.）Tratv.[Campanumoea lanceolata Sieb.et Zucc.]，味甘、辛，性平，归脾、肺经，具有益气养阴、解毒消肿、排脓、通乳之功效。主治神疲乏力、头晕头痛、肺痈、乳痈、肠痈、疮疖肿毒、喉蛾、瘰疬、产后乳少、白带，毒蛇咬伤[1]。现代药理学研究表明，山海螺具有抗氧化、改善记忆；镇静、镇痛、抗惊厥作用；保肝、醒酒作用；抗炎，降低血脂、胆固醇，抗癌、抗突变；抗血小板凝集、抗血栓；降低血糖、调节免疫等药理作用[2]。研究发现，山海螺50%乙醇大孔树脂洗脱部位含有大量烯炔类化合物，又以党参炔苷含量最高。另外，烯炔类化合物具有抗癌、抗氧化等作用[3]。通过进行系统的分离纯化，共得到：（1）5-羟甲基-2-呋喃甲醛、（2）codonopilodiynoside A、（3）lobetyol、（4）（+）-isolariciresinol、（5）党参炔苷。其中化合物2～5为烯炔类化合物，1～4为我们首次从该植物中分得，现将结果报告如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器

INOVA-500MHz型核磁共振仪（Varian公司，美国），溶剂峰为内标；Agilent1260 series型高效液相色谱仪（Agilent公司，美国）；Aglient Eclipse plus C18 色谱柱（4.6mm×100mm，3.5μm）（Agilent公司，美国）；LC-6AD 型高效液相制备色谱仪（岛津公司，日本），YMC-Pack ODS-A色谱柱（20mm×250mm，10μm）（YMC 公司，美国）。

1.2 材料

山海螺供试品由中日友好医院中药库提供（购自北京市鹤延龄药业发展有限公司，产地：河北，批号：140941），经我院药学部中药库唐永和药师鉴定为桔梗科党参属植物羊乳的根；Sephadex LH-20（GE Healthcare Bio-Sciences AB公司，瑞典）；HP-20型大孔吸附树脂（三菱株式会社，日本）；甲醇、乙腈为色谱纯（美国Fisher公司），其他化学试剂均为分析纯，水为高纯水。

2 提取与分离

干燥山海螺25kg，用水煎煮3次，加水量分别为15、12、12 倍量，提取时间分别为 2h、1h、1h，提取液浓缩至约30kg后，加95%乙醇至含醇量为60%，放置过夜，分离上清液，减压浓缩至约3kg，再采用HP-20大孔树脂柱对浓缩液进行分离纯化。上样后分别用2倍柱体积水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、95%乙醇进行洗脱，得到50%乙醇部位180g。将此部分反复用Sephadex LH-20柱色谱和制备高效液相色谱仪进行分离纯化，得到化合物1（10mg）、2（8mg）、3（10mg）、4（20mg）、5（100mg）。

3 结构鉴定

化合物 1：浅黄色油状物，1H-NMR （DMSO-d6，400 MHz）、13C-NMR （DMSO-d6，100MHz）数据（由于是已知化合物，故略）与文献[4]报道的5-羟甲基-2-呋喃甲醛数据基本一致。

化合物 2：白色粉末，1H-NMR （DMSO-d6，400MHz）、13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）数据（由于是已知化合物，故略）与文献[6]报道的codonopilodiynoside A数据基本一致。

化合物 3：浅黄色油状物，1H-NMR （DMSO-d6，500 MHz）、13C-NMR （DMSO-d6，125MHz）数据（由于是已知化合物，故略）与文献[7]报道的lobetyol数据基本一致。

化合物 4：淡红色粉末，ESI-MS（m/z）、1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）、13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）数据（由于是已知化合物，故略）与文献[5]报道的（+）-isolariciresinol数据基本一致。

化合物 5：浅黄色油状物，1H-NMR （DMSO-d6，500 MHz）、13C-NMR （DMSO-d6，125MHz）数据（由于是已知化合物，故略）与文献[8]报道的党参炔苷数据基本一致。

4 讨论

从前期对山海螺的化学成分和药理作用研究进展概述[2]可知，山海螺主要含有三萜皂苷类、生物碱类、苯丙醇苷类等化学成分，在这几类化学成分中，烯炔类化合物紫外光谱特征性最强，呈锯齿状，而且在50%乙醇洗脱部位数量最多，其次是30%乙醇洗脱部位，再加上文献[3]报道过天然炔类化合物具有抗癌、抗炎、抗氧化等生物活性，故笔者课题组先对山海螺50%乙醇洗脱部位进行了分离纯化，由于这些烯炔类化合物结构相似、含量极低（党参炔苷除外），这给分离带来了很大的难度，因此，这部分仅得到了5个化合物。

目前，山海螺的化学成分和药效物质基础还在不断地探索和研究中，而且这也是值得深入探索的方向，因此，笔者课题组后续将对山海螺30%乙醇、10%乙醇及水洗脱部位进行分离纯化，以期在化学成分研究方面取得新的进展，从而为阐明其药效物质基础打下一定的基础。

（致谢：中国医学科学院北京协和医学院药物研究所植化室张培成教授、杨桠楠副教授、分析师王映红副教授协助完成NMR测定）。

[1]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草第7册20卷[M].上海：上海科学技术出版社，1999.601-602.

[2]张淑君，李明，王震寰，等.轮叶党参的化学成分及药理作用研究进展概述[J].中国药师，2016，19（2）：347-350.

[3]赵秀梅，胡人杰.天然炔类化合物的研究现况[J].天津药学，2007，19（1）：60-63.

[4]艾凤伟，张嵩，李艳凤，等.白附子的化学成分研究[J].中草药，2010，41（2）：201-203.

[5]曹煦，李创军，杨敬芝，等.雷公藤叶化学成分研究[J].中国中药杂志，2011，36（8）：1028-1031.

[6]Jiang YP，Liu YF，Guo QL，et al.C14-Polyacetylene glucosides from codonopsis pilosula[J].Journal of Asian Natural Products Rsearch，2015，17（6）：601-614.

[7]Yang S，Shen T，Zhao LJ，et al.Chemical constituents of lobelia chinensis[J].Fitoterapia，2014，93：168-174.

[8]贺庆，朱恩圆，王峥涛，等.党参化学成分的研究[J].中国药学杂志，2006，41（1）：10-12.

国家自然科学基金项目（81473365）；北京中医药大学自主选题项目（2016-JXS-SX095）。

1* 本文通讯作者。

2017-04-21

2017-06-22