邻苯二甲醛和强化戊二醛对污染乙型肝炎病毒胃镜的消毒效果比较

秦娟文，卢杰夫，郑超伟，李 生，王兴丽，梁小凤

邻苯二甲醛和强化戊二醛对污染乙型肝炎病毒胃镜的消毒效果比较

秦娟文，卢杰夫，郑超伟，李 生，王兴丽，梁小凤

[目的]观察邻苯二甲醛和强化戊二醛对乙型肝炎病毒污染的胃镜消毒效果及消毒时间比较，为临床选用合适的内镜消毒液、消毒时间提供理论依据。[方法]收集乙型病毒性肝炎病人使用后的胃镜240套，根据2004年4月国家卫生部颁布的《内镜清洗消毒技术操作规范》进行清洗后，随机分为两组，分别采用邻苯二甲醛和强化戊二醛浸泡消毒，于清洗前后及消毒后3 min、5 min、10 min进行内镜腔内采样，观察两种消毒液及其不同消毒时间的消毒效果。[结果]应用强化戊二醛和应用邻苯二甲醛清洗后、消毒3 min和10 min时胃镜内腔定性和定量PCR检测HBV-DNA平均含量差异均无统计学意义(P>0.05);消毒5 min时两组差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]应用邻苯二甲醛消毒乙型肝炎病毒病人使用后的胃镜，消毒效果优于应用强化戊二醛消毒。

胃镜；邻苯二甲醛；强化戊二醛；乙型病毒性肝炎；乙型肝炎病毒；消毒

近年来，在临床上消化内镜检查对于消化道疾病的诊断和治疗已在大中小医院普遍开展。但其在诊断和治疗过程中，不可避免地接触到病人的体液、血液而受到污染。我国经济较落后的医院内镜数量严重不足，而需检查的病人较多，内镜使用过度频繁，这些因素导致临床内镜消毒不到位，从而易引发较为严重的医源性感染[1]。而病毒性肝炎是世界上最常见的传染病之一。据报道，全世界感染乙型肝炎病毒(HBV)者约占全球人口的5%，而广西地区乙型病毒性肝炎病人数量据我国前列[2]。然而国内外对胃镜消毒液的选择尚无统一标准。因而探讨一种消毒效果好且需时较短的内镜消毒液非常重要。本研究通过观察邻苯二甲醛和强化戊二醛对污染乙型肝炎病毒的胃镜消毒效果和消毒时间比较，为临床选用合适的内镜消毒液、消毒时间，为有效预防因内镜消毒不合格而引发的医院感染提供理论依据。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 资料 2014年4月—2015年5月我院门诊及住院已确诊的乙型肝炎病毒感染[血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性]病人240例，其中男166例，女74例，年龄61.68岁±3.23岁。病例排除标准：1周内已服用相关治疗本病的药物；合并其他流行性感染或细菌、病毒感染，如丙型病毒性肝炎、艾滋病、重度肺炎等；不符合纳入标准，因资料不全影响疗效判断或根本无法判断疗者。以符合纳入标准的病人胃镜检查后的胃镜为观察对象，所有胃镜按随机数字表法随机分为观察组和对照组，每组120套。

1.2 材料及设备

1.2.1 消毒液 邻苯二甲醛(原产国英国，上海强生医疗器材有限公司经销，正-邻苯二甲醛含量0.55%，其他含量范围为0.5%～0.6%)。强化戊二醛(2%强化戊二醛，主要成分戊二醛含量为2.0%～2.2%，由茂名市消毒用品有限公司生产)。

1.2.2 仪器设备 迈尔消化内镜清洗工作站，日本Olympus260主机及胃镜，Lighteyeler荧光定量PeR仪，HeraeusBgerrese超速离心机，DNA扩增仪，FD201稳压稳流电泳仪。乙型肝炎病毒核酸阳性血清由本院胃镜室联合实验室提供，含量达到106IU/mL～107IU/mL。

1.2.3 试剂 ACON HBsAg胶体金法检测试剂，艾博生物医药(杭州)有限公司生产；PCR反应试剂(Taq酶、dNTPs、MgC12、10×Buffer)、TaqDNA聚合酶(测序级，美国Promega公司产品)、DEPC为美国Sigma公司产品。

1.3 清洗与消毒 为确保试验前的胃镜为无病毒污染，在每次检查前均按2004年4月国家卫生部颁布的《内镜清洗消毒技术操作规范》要求，先用2%强化戊二醛消毒胃镜20 min，然后采集标本并检测，结果为阴性。两组消化内镜使用后均按《内镜清洗消毒技术操作规范》(2004版)要求，严格按以下流程处理:床侧清洗→初洗→酶洗→次洗→消毒→终洗→干燥，两组酶洗均使用内镜专用RUHOF全效型多酶。观察组采用邻苯二甲醛溶液消毒，对照组采用强化戊二醛溶液浸泡消毒。对乙型肝炎病毒感染病人行胃镜检查后，对胃镜清洗后进行分组消毒，时间设置为3 min、5 min、10 min。

1.4 标本采集 分别于清洗前、清洗后及消毒后3 min、5 min、10 min进行内镜腔内采样。用5 mL生理盐水(清洗前、清洗后)或相应中和剂(消毒后)注入胃镜活检孔道，用无菌试管在胃镜前端收集内腔冲洗液，2 h内送检。

1.5 标本检测 PCR定性、定量检测由临床检验技师完成。

1.5.1 HBsAg检测 用于胃镜检查前检测。用胶体金免疫层析分析技术进行，按说明书操作。

1.5.2 乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)PCR定性检测 按HBV-DNA基因组P区基因序列，选2599bp-2877bp区域设计引物进行PCR。引物1:5’-GTGGGCCCTCTCACTG-TAAA-3’，引物2:5’-GTTTTGATGACCAACCTC-3’，扩增长度：278 bp。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，紫外线灯下观察结果，与阳性对照处同一水平有扩增带者为阳性，每次PCR检测时均设有阴性对照。

1.5.3 HBV-DNA荧光定量PCR

1.5.3.1 HBV PCR反应液 PCR Buffer 18 μL、Taq酶1U、Ung酶0.05 μL混匀。

1.5.3.2 加样 将上述配制好的反应液18 μL和已提取好的模板2 μL加入毛细反应管3 000 r/min离心5s混匀，再排入Lightcycler荧光定量 PCR仪内扩增。

1.5.3.3 检测 扩增程序为37 ℃ 3 min，使Ung充分反应，92 ℃ 1 min变性，然后60 ℃、20 s，40个循环。在60 ℃时荧光收集方式为“single”，仪器检测通道选择Fl/F2。结果由PCR仪自带分析软件确定标准曲线计算样本的HBV-DNA含量。

1.6 统计学方法 计数资料采用χ2检验分析，计量资料符合正态分布者采用t检验分析，统计结果以P<0.05为差异有统计学意义。所有数据均通过SPSS 17.0统计软件进行数据分析。

2 结果

2.1 定性PCR检测HBV-DNA平均含量(见表1)

表1 定性PCR检测胃镜内腔HBV-DNA平均含量比较 IU/mL

2.2 荧光定量PCR检测HBV-DNA平均含量(见表2)

表2 荧光定量PCR检测胃镜内腔HBV-DNA平均含量比较 IU/mL

3 讨论

近年来，消化内镜微创技术迅速发展，普通的内镜检查和诊断在临床广泛应用。由于内镜结构复杂，精密度高，材质特殊，不耐高温，使用后彻底的清洗消毒一直是临床上的一大难题，是医院感染控制部门关注的重点。同时由于内镜费用较贵，国内大部分医院不可能配置更多的内镜，故在二三线城市的医院普遍存在内镜少、需求量大，致使内镜使用频繁，导致由于消毒时间仓促导致消毒不彻底、干燥时间短等情况。2006年调查表明，我国一般人群HBsAg阳性者为7.18%，其中广西高达12%[3],严重危害病人健康。而胃镜检查的人中常出现HBsAg阳性的病人，如消毒不够彻底极可能造成交叉感染而引发肝炎传播。故加强对内镜的消毒与管理在预防控制医院感染工作中显得尤为重要[4]。

目前,国内外对胃镜消毒液的选择和消毒时间尚无统一标准。按2004年版《内镜清洗消毒技术操作规范》，如采用2%碱性戊二醛浸泡，消毒时间不少于20 min，冲洗和干燥后才可用于病人诊疗。如按上述要求医院应配备足够周转的内镜数量，方能满足良好的消毒效果。为此，寻求一种消毒效果好、需时较短的内镜消毒液以提高内镜清洗消毒效率，满足临床所需尤为关键。本研究结果显示：通过定性和定量PCR检测HBV-DNA平均含量，采用邻苯二甲醛和强化戊二醛消毒比较，清洗前和清洗后、消毒3 min和10 min时HBV-DNA平均含量差异均无统计学意义(P>0.05);而消毒5 min时两组差异有统计学意义(P<0.05)。此结果与国内外类似研究报道相一致[5]，说明采用此两种消毒液消毒效果均安全可靠，但采用邻苯二甲醛消毒时间上具有优势。若能将二者消毒液共同合理的使用将满足广大病人的需求，还能很大程度上提高消毒内镜的工作效能。

[1] 荣秋华,张莹.消化内镜清洗消毒过程中存在的问题与对策[J].中华医院感染学杂志,2012,22(16):3597 -3599.

[2] 宋向阳,李武平,马春丽,等.三种消毒剂对胃镜污染乙肝病毒去除效果的实验研究[J].中国消毒学杂志,2015,32 (3):232-234.

[3] 庄辉.病毒性肝炎流行病学研究进展[J].中国继续医学教育,2010,2(3):1-5.

[4] 周丽华,邓琼,阳云超,等.应用2%碱性戊二醛与邻苯二甲醛在消化内镜消毒中的综合研究[J].四川医学,2013,34(8)：1137-1138.

[5] 史瑜媛,郑美英,张美玲.戊二醛和邻苯二甲醛胃镜消毒效果的比较[J].当代护士,2011(12)：91-92.

(本文编辑李亚琴)

Comparison of disinfection effect of phthalaldehyde and fortified glutaraldehyde on hepatitis B virus contaminated contaminated endoscopy

Qin Juanwen,Lu Jiefu,Zheng Chaowei,etal(the First Affiliated Hospital of Guangxi University

of Traditional Chinese Medicine,Guangxi 530023 China)

广西壮族自治区教育厅高校科研项目，编号：LX2014172。

秦娟文，副主任护师，本科，单位:530023，广西中医药大学第一附属医院；卢杰夫、郑超伟、李生、王兴丽、梁小凤单位：530023，广西中医药大学第一附属医院。引用信息 秦娟文，卢杰夫，郑超伟，等.邻苯二甲醛和强化戊二醛对污染乙型肝炎病毒胃镜的消毒效果比较[J].护理研究，2017，31(1)：97-99.

R472.1

B

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.01.026

1009-6493(2017)01-0097-03

2016-03-24；

2016-12-13)