孕妇B群无乳链球菌筛查及药敏对比分析

吉彤珍，刘 晶

(首都医科大学附属北京妇产医院 检验科,北京100026)

孕妇B群无乳链球菌筛查及药敏对比分析

吉彤珍，刘 晶*

(首都医科大学附属北京妇产医院 检验科,北京100026)

B群无乳链球菌(GBS)是孕妇围产期和新生儿感染的重要病原菌。该菌可寄居于妇女阴道和直肠，可引起妇女生殖道感染，尤其妇女在围产期感染可导致胎膜早破、早产、流产及宫内感染等一系列妊娠并发症；在分娩时新生儿经过产道可引起肺炎、脑膜炎、败血症等感染，严重者可造成新生儿死亡。因此如何合理选用抗生素治疗显得尤为重要。为此我们对来我院做妊娠检查的妇女在35-37周时进行B群无乳链球菌筛查，并将药敏结果做了对比性分析，希望能对临床用药起到很好的指导作用。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 2014年3月-2015年4月来我院就诊孕妇，孕期在35-37周，标本为阴道直肠联合取分泌物。

1.2 仪器与试剂 采用法国梅里埃公司VITEK2compact全自动细菌鉴定药敏仪器及配套鉴定卡。5%哥伦比亚羊血琼脂平板、MH血平板均使用Oxoid公司产品。B-群链球菌显色平板使用安图生物工程股份有限公司产品。

1.3 实验方法 将临床送检标本按《全国临床检验操作规程》规定的方法进行分离培养[1]，选取可疑菌落做初步鉴定(在血平板上的革兰氏阳性球菌，β溶血，触酶阴性，CAMP试验阳性菌落)。CAMP试验用金黄色葡萄球菌ATCC25923。

1.4 细菌鉴定 取初步鉴定的菌落在VITEK2compact全自动细菌鉴定药敏仪器上做鉴定，试验过程严格按操作说明进行。质控菌株为ATCC700327铅黄肠球菌，购于卫生部临检中心。

1.5 药敏试验 用纸片扩散法(Kirby-Bauer,KB法)，挑取37°C培养18-24 h生长良好菌落配成浓度0.5麦氏单位的菌悬液，接种于MH血平板，将药敏纸片贴于平皿上，37°培养18-24 h后测量抑菌环直径，结果按2010年美国临床和实验室标准协会(CLSI)药物敏感性判定标准判定药敏结果。对红霉素耐药、克林霉素敏感或中介株做D试验，按上述方法进行细菌接种，将红霉素、克林霉素贴在间隔12 mm相邻位置，培养18-24 h。红霉素耐药，红霉素相邻侧的克林霉素抑菌环出现”截平”现象，报告D试验阳性，提示克林霉素存在诱导型耐药。质控菌株为ATCC25923。

2 结果

2.1 在2014年3月-2015年4月间我院做GBS筛查标本共3095份，分离出B群无乳链球菌119株，分离率3.8%。药敏结果显示119株无乳链球菌对青霉素、氨苄西林、万古霉素、利奈唑胺敏感性均为100%，对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星耐药率分别为77.3%、61.3%、44.5%。药敏结果见表1。

2.2 D试验结果 119株无乳链球菌中对红霉素耐药、克林霉素敏感或中介共24株，D试验阳性9株,阳性率47.4%。结果见表2。

表1 119株无乳链球菌对7种抗菌药物敏感性结果

表2 D试验结果

S：敏感、I：中介、R：耐药

3 讨论

无乳链球菌常寄居于女性生殖道，几乎是围产期感染的首要致病菌[2]。本次分析中无乳链球菌的分离率为3.8%，低于我院以往感染率[3]。原因可能为针对人群不同，培养方法差异且GBS为间歇性带菌造成。GBS可通过产道上行引起宫内感染，也可通过垂直传播引起新生儿肺炎、脑膜炎、败血症等严重感染。因此实验室及时报告无乳链球菌的检出及药敏结果可为临床提供产时治疗和用药依据。通过对119株无乳链球菌的药敏分析，GBS对青霉素、氨苄西林敏感率为100%，对比我院刘晶2013年的报道[4]青霉素、氨苄西林均未出现耐药株。根据CLSI指南无乳链球菌对青霉素、氨苄西林敏感可判定对头孢唑啉，头孢曲松，头孢噻肟，头孢吡肟，阿莫西林/克拉维酸，亚胺培南及美洛培南敏感。青霉素由于副作用小，依然是孕妇及新生儿治疗无乳链球菌感染的首选药物。对青霉素轻度过敏患者建议使用第一、第二代头孢菌素。第三、四代头孢菌素长期使用容易引起菌群失调，造成细菌耐药性增加，同时增加患者的经济负担，建议慎重选用。对青霉素严重过敏患者建议使用红霉素或克林霉素。本次药敏结果GBS对红霉素耐药率已高达77.3%，对克林霉素耐药为61.3%，均高于我院以往的报道[4]。可能与长期经验用药有关。GBS有两种耐药机制，一种是erm基因编码的靶位修饰引起的大环内酯类，林可霉素类，链阳霉素B耐药(MLS型耐药)，另一种是mefA基因编码外排蛋白使细菌仅对大环内酯类耐药(MS型耐药)[5]。MLS型耐药分为诱导型耐药(iMLS)和组合型(cMLS)。iMLS型耐药表型对红霉素耐药对克林霉素敏感，cMLS型耐药表型对红霉素、克林霉素均耐药。本实验测得红霉素诱导克林霉素耐药占47.4%，提示临床医生当孕妇有GBS感染且对青霉素严重过敏时，应先对红霉素和克林霉素进行药敏试验，根据药敏结果选用抗菌药物。切实达到及时、有效的治疗结果。无乳链球菌对万古霉素、利奈唑胺敏感率也为100%，但是万古霉素有肾毒性，还可以导致耳聋，新生儿要慎用。左氧氟沙星耐药率为44.5%与以往的45.3%的耐药率相近。由于左氧氟沙星对孕妇及新生儿都有较大的副作用，因此治疗GBS时不宜选用。

综上所述，加强孕妇GBS的筛查工作，及时准确的报告药敏结果有助于GBS的早发现、早治疗，从而减少新生儿GBS感染，提高新生儿的出生质量。

[1]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程．第3版.南京：东南大学出版社，2006:737-753.

[2]Baker CJ,Byington CL,polin RA.Policy statement - Recommendations for the prevention of perinatal group B streptococcal (GBS) disease[J].Pediatrics,2011,128(3):611.

[3]马延敏，吴连方，黄醒华，等．孕妇B组溶血性链球菌带菌与母婴预后的探讨[J].北京医学，2005,27(9)：516.

[4]刘 晶，吉彤珍，赵 娟．孕妇感染B群无乳链球菌的耐药性分析[J]．中国卫生检验杂志，2013,23(16)：3298.

[5]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing (S).Sixteenth informational supplement M100-S16.Wayne,Pennsylivania,2006,26(3).

首都医科大学附属北京妇产医院中青年学科骨干培养专项(课题编号fcyy201505)

1007-4287(2016)12-2072-02

2015-10-11)

*通讯作者