射血分数保留的心力衰竭患者血清MMP_2,NT-proBNP与HCY的表达变化

郭建峰，朱婵虹，郑锦利，王若涛，陈宏斌

(福建医科大学附属闽东医院 检验科，福建 福安355000)

射血分数保留的心力衰竭患者血清MMP_2,NT-proBNP与HCY的表达变化

郭建峰，朱婵虹，郑锦利，王若涛，陈宏斌

(福建医科大学附属闽东医院 检验科，福建 福安355000)

目的 探讨射血分数保留的心力衰竭(HF-PEF)与血清基质金属蛋白酶2(MMP_2)、B型钠尿肽前体N端(NT-proBNP)及血清同型半胱氨酸(HCY)之间的相关性。方法 通过临床病例整体抽样选取射血分数保留的心力衰竭患者72例，作为HF-PEF组，按照纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级分为Ⅱ-Ⅳ级，同期从体检中心体检者中选取心功能正常者作为对照组，26例，两组均采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定MMP_2，同时测定血清中NT-proBNP及HCY水平，并对HF-PEF组与对照组之间三项指标进行分析比较。结果 1.与心功能正常者对照组相比，HF-PEF组中的MMP_2，NT-proBNP与HCY水平均有显著性升高(P<0.05)，且不同NYHA心功能分组中，三者水平也存在显著性差异(P<0.05)；2.HF-PEF组患者血清中MMP_2与NT-proBNP、HCY呈明显正相关，相关系数分别为0.842、0.650(P<0.01)，NT-proBNP与HCY之间呈明显正相关(r=0.592，P<0.01)。结论 HF-PEF患者血清中MMP_2,NT-proBNP与HCY水平与心功能分级与疾病的发展呈正相关，联合检测三者对HF-PEF患者的诊断和心衰程度的评估具有指导意义。

射血分数保留；心力衰竭；基质金属蛋白酶2；B型钠尿肽前体N端；同型半胱氨酸

(ChinJLabDiagn,2016,20:2052)

舒张性心力衰竭(DHF)是指由于左室松弛性不良、顺应性下降导致心室充盈压升高,肺静脉或体循环静脉淤血而收缩功能正常的一组临床综合征其射血分数正常或轻度降低，存在左室舒张功能异常，因此可称为射血分数保留的心力衰竭。有研究显示[1,2]， HF-PEF约占心力衰竭患者的50%，且发病率逐年增长、再住院率高、生存率低，预后差，近年来，国内外对此类型的心力衰竭的研究日趋重视。左心室重构是心衰的病理基础，心肌细胞外基质(ECM)成分的改变是心室重构的重要表现，而高同型半胱氨酸血症是心血管疾病的独立危险因素[3]。本文对不同心功能分级的HF-PEF患者血清中MMP_2，NT-proBNP与HCY的水平及相关性进行探讨。

1 材料与方法

1.1 材料 收集2015年1月-2015年9月期间入住我院心血管内科的射血分数保留的心力衰竭患者72例，作为HF-PEF组，其中男性39例，女性33例，平均年龄63.7±11.6岁。所有入选患者心功能按照NYHA分级：Ⅱ级22例，Ⅲ级27例，Ⅳ级23例。另同期从体检中心选取心功能正常的健康体检者26例，作为对照组，其中男性13例，女性13例，平均年龄61.2±9.8岁，排除近期有感染性疾病、恶性肿瘤、糖尿病、严重肝肾功能损伤、结缔组织类疾病、自身免疫疾病、及最近有手术史者。

1.2 诊断标准 所有HF-PEF组病例符合欧洲心脏协会2007年颁布的HF-PEF诊断标准[4]：①具有心力衰竭的症状和(或)体征或临床症状仅表现为呼吸困难；②左室收缩功能正常或轻度异常[LVEF>(45%-50%)]，左室舒张末容积指数(LVEDVI)<97 mL/m2；③具有左室舒张功能异常的证据：包括有创评价左室舒张功能不全的指标，如左心室舒张末压或平均肺毛细血管楔压等；以及相关无创性评价指标，如超声心动图等；④心电图证明的房颤；⑤排除心脏瓣膜病、限制型心肌病或肥厚型心肌病、心包炎、甲状腺疾病、慢性阻塞性肺疾患(COPD)和大量分流的先天性心脏病等相关疾病

1.3 仪器和试剂 贝克曼AU5821全自动生化分析仪、罗氏COBAS e601电化学发光仪与BIO-RAD680酶免分析仪；北京利得曼HCY体外诊断试剂盒，NT-proBNP使用的试剂为罗氏COBAS e601电化学发光仪原装配套试剂，武汉Elabscience公司购买的人基质金属蛋白酶2(MMP_2)酶联免疫吸附测定试剂盒。1.4 方法 所有研究对象空腹静脉采血，严格按照SOP与试剂说明书操作。HCY采用循环酶法测定，NT-proBNP采用电化学发光法测定，HCY与NT-proBNP在采血后当日检测，而后将标本血清分离，EP管分装后置于-80℃保存，在所有样本收集完毕，常温复溶半小后时，使用ELISA方法检测MMP_2。

2 结果

2.1HF-PEF组与对照组血清中MMP_2,NT-BNP与HCY水平比较

HF-PEF组(含NYHAⅡ级、Ⅲ级、Ⅳ级)血清中MMP_2、NT-proBNP、HCY水平均高于对照组(P<0.05)；HF-PEF组中，不同心功能NYHA分级患者血中MMP_2、NT-proBNP、HCY水平均存在差异，有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.2HF-PEF组患者血清中MMP_2、NT-proBNP、HCY相关性分析

采用Pearson相关分析，MMP_2与NT-proBNP、HCY均呈明显正相关(P<0.01),相关系数分别为0.842、0.650，NT-proBNP与HCY也呈明显正相关(P<0.01)，相关系数分别为0.592。

表1 两组血清中MMP_2,NT-BNP与HCY水平比较

注：与对照组比较aP<0.05;与NYHAⅡ级组比较bP<0.05；与NYHAⅢ级组比较cP<0.05。

3 讨论

因舒张概念障碍导致的心衰是近年临床研究的热点,过去称之为舒张性心力衰竭 (DHF),其传统定义是指由于左室松弛性不良、顺应性下降导致心室充盈压升高,肺静脉或体循环静脉淤血而收缩功能正常的一组临床综合征。随着研究的深入，人们发现DHF存在轻度收缩功能不全[5],只是程度较HF-REF轻，其射血分数(EF)不完全正常(35-50%之间)，因此称为射血分数保留的心力衰竭更符合其临床特征。有研究显示[6]，HPFEF的发病机制是左心向心性重构、舒张功能不全、左心房扩大、血管僵硬度及其和左心室的相互作用、心肌收缩功能异常等多因素作用引起，其在心力衰竭患者中所占比例大，预后差，临床表现多变，常见于妇女、肥胖患者、老年人和患有糖尿病或高血压的病人，己经越来越引起医学界的关注和研究。

心肌细胞外基质(ECM)是由纤维蛋白、弹性蛋白、蛋白多糖及基层膜蛋白组成的网络。心肌发生纤维化是心室重构的病理因素，任何改变心肌纤维化的干预措施，包括同型胶原的含量、分布、性状、超微结构、胶原纤维的破坏以及Ⅰ型和Ⅳ型胶原的比例均会导致心肌僵硬度的增加而出现舒张功能不全。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP) 是一组能特异地降解ECM成分的Zn2+依赖的酶家族,能溶解纤维胶原,在组织重构中起重要作用，其中MMP_2 是血管壁细胞表达和分泌的最主要的MMP，可以高效降解基底膜的主要成分-Ⅰ和IV型胶原，并促使EMC释放胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子等生物活性因子，介导心肌重构过程[7]，其浓度的增高与心力衰竭的发展呈相关性。本文研究结果显示，与心功能正常对照组相比，HF-PEF患者血清中的MMP_2水平显著性升高(P<0.05)，说明在HF-PEF患者中，MMP_2水平升高，对左心ECM成分降解与改变，致心肌僵硬度的增加而出现舒张功能不全与介导的左心室与左心房的重构[8]方面起重要作用。

proBNP由心室肌细胞分泌产生，该物质降解可产生脑钠肽(BNP)及无活性的NT-proBNP，NT-proBNP的产生与心室壁压力及牵张刺激有密切关系，可作为心功能损伤的血清学标志物，也是判断心衰严重程度及预后的重要指标[9-10]。HF-PEF患者因其左室舒张功能减退，心室壁压力及牵张刺激导致proBNP分泌增多。从而可在血液中检测到较高水平的NT-proBNP。同型半胱氨酸(HCY)即2-氨基-4-羟基丁酸，参与甲硫氨酸的代谢过程，是S-甲基甲硫氨酸代谢过程中的重要中间产物，高HCY血症可诱导体内的氧化应激反应，产生过氧化氢，后者对血管内皮细胞有强烈的毒性损伤作用，随着血浆HCY浓度的升高或作用时间延长，血管内皮细胞凋亡数量明显增加，细胞损伤程度也明显增强，诱导内溶能力破坏机体凝血和纤溶之间的平衡，引起血管内皮功能紊乱[11]，内皮分泌的血管舒张因子一氧化氮(CO)减少，血管收缩反应增强，血压增高，HCY在损伤内皮细胞的同时，还刺激血管平滑肌细胞生长导致血流通路受阻，使外周阻力增加，心脏射血阻力加重,致使心肌肥厚、心肌氧耗增加,左室舒张末压上升，心室僵硬程度增加，进一步加重后负荷，使心肌能量储备减少，恶化舒张功能，加重心衰的程度。因此，血浆HCY水平是心衰的预测因子，高HCY是心衰的危险因素[12]。从实验结果显示，与心功能正常对照组相比，HF-PEF患者血清中的NT-proBNP与HCY水平显著性升高(P<0.05)，说明两者在HF-PEF疾病过程中呈现高表达，提示NT-proBNP与HCY在HF-PEF疾病中具有的诊断价值。

综合上述结果，血清中MMP_2、NT-proBNP与HCY水平在HF-PEF疾病中均呈现不同程度的高表达，具有一定的诊断价值。三者在HF-PEF组患者血清中的水平相互之间呈现明显正相关(P<0.01)，且血清中MMP_2、NT-proBNP与HCY水平在不同的心功能NYHA分级患者中，各组间存在差异，有统计学意义(P<0.05)，三者水平随NYHA心功能分级呈递增趋势，提示MMP_2、NT-proBNP与HCY的升高与心力衰竭的进展及严重程度具有相关性。利用MMP_2、NT-proBNP与HCY的检测，可良好地反应射血分数保留的心力衰竭的严重程度及预后。

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Expressions of serum MMP_2,NT-proBNP and HCY in heart failure with preserved ejection fraction Patients

GUOJian-feng,ZHUChan-hong,ZHENGJin-li,etal.

(DepartmentofClinicalLaboratory,MingdongHospital,Fuan355000,China)

Objective To study the relationship between the heart failure with preserved ejection fraction and serum Matrix Metalloproteinase 2 (MMP_2),N-terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide (NT-proBNP) and homocysteine (HCY).Methods The patients (n=72) with HF-PEF were chosen as HF-PEF group by using cluster sampling method,and then HF-PEF group was divided grade Ⅱ-Ⅳ by NYHA.Meanwhile the persons having physical examination with normal heart function were chosen as control group (n=26).MMP_2 were determined by ELISA,and NT-proBNP,HCY were determined simultaneously,the results were analyzed and compared between the HF-PEF group and control group.Results 1.Compared with the control group,the levels of MMP_2,NT-proBNP and HCY rised significantly in HF-PEF group (P<0.05),and there were significant difference among grade Ⅱ-Ⅳ groups by NYHA with these three items.2.MMP_2 was positively correlated to NT-proBNP and HCY (r=0.842,r=0.650,P<0.01),NT-proBNP and HCY were positively correlated to each other(r=0.592,P<0.01).Conclusion The level of serum MMP_2,NT-proBNP and HCY were positively correlated to cardiac functional grading and disease development,The combined detection of these three items has guiding significance in the diagnosis and severity of HF-PEF.

Preserved ejection fraction;Heart failure;Matrix Metalloproteinase 2;N-terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide;homocysteine

1007-4287(2016)12-2052-03

R446.1

A

2016-02-17)