自制肿瘤标志物室内质控血清的应用评价

张 辉,郭 瑛

(1.北京优联耳鼻喉医院 检验科，北京100122；2.北京市朝阳区三环肿瘤医院 检验科，北京100122)

自制肿瘤标志物室内质控血清的应用评价

张 辉1,郭 瑛2

(1.北京优联耳鼻喉医院 检验科，北京100122；2.北京市朝阳区三环肿瘤医院 检验科，北京100122)

目的 探讨患者血清作为化学发光法检测肿瘤标志物室内质控品的可行性。方法 收集日常工作中无传染性的剩余血清，自制甲胎蛋白等8个肿瘤标志物项目的高值、低值室内质控品，每日随日常标本一同在Cobas8000分析仪上进行检测，对其精密度及稳定性等参数进行分析。并用伯乐公司(BIO-RAD)质控品进行跟踪比较。结果 在Cobas8000分析仪上，实验室自制质控品各项指标与BIO-RAD质控品无统计学差别(P>0.05)。结论 自制质控品具有制备过程简便、稳定性好、成本低等优点，可以满足室内质量控制的要求。

自制质控血清；肿瘤标志物；室内质量控制

(ChinJLabDiagn,2016,20:2027)

血清肿瘤标志物(TM)的检测在肿瘤辅助诊断、疗效观察及评估预后中都具有重要的临床意义。要获得可靠的检测结果，必须建立一个全面的质量控制体系，做好实验室内质量控制是其中一个重要环节[1]。目前国内实验室使用的质控品多是国外生产的冻干品，订货周期长且成本较高。近年来已有国内外学者开始进行自制质控品的应用及稳定性研究[2-4]。本实验利用日常检测剩余血清，自制肿瘤标志物室内质控品，并对其精密度及稳定性等参数进行分析，评估其临床应用的可行性。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂 Cobas8000全自动罗氏电化学发光分析系统，校准品、试剂及耗材均为原装配套产品。Thermo 905零下80℃超低温冰箱。BIO-RAD Tumor Marker Plus Control质控物，批号分别为54561、54562。

1.2 质控血清制备 包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原CA199、CA153、CA125、CA724、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA211)共8个项目。收集日常检测中感染组合(乙肝五项、丙肝、艾滋、梅毒)均呈阴性，无溶血、乳糜、黄疸的剩余血清，用已知的高浓度病人血清调整TM浓度。使各项标志物的浓度至两个水平：一水平接近相应TM的参考范围上限，作为低值质控物；另一水平和BIO-RAD Level2浓度相近，作为高值质控物，-80℃冷冻保存。两周后，置于4℃冰箱缓慢解冻，混匀，过滤去除血清中胶冻状的聚集物，再行感染组合检测后，每支0.5 ml密闭分装，-80℃冰箱保存待用。

1.4 统计学处理 采用SPSS17.0软件包进行数据统计处理。多组间比较用F检验，两组间比较用T检验。P<0.05为有统计学差异。

2 结果

2.2 与BIO-RAD定值质控品比较 自制质控品与BIO-RAD质控品120天累积实测值对比见表2、表3。对高、低浓度水平120天各项TM检测的累积变异系数与BIO-RAD质控品的累积变异系数进行T检验，P值分别为0.153及0.325，无统计学差异。

2.3 自制质控品稳定性观察 自制质控品120天内各月测定值见表4、表5，对各月均值进行多组间F检验，P值均>0.05,无统计学差异，说明在实验期内自制质控品稳定性良好。

表1 同日20份自制质控品检测各项TM的均值、标准差、变异系数

表2 自制质控品与BIO-RAD质控品各项TM 120天累积实测值低值的对比

表3 自制质控品与BIO-RAD质控品各项TM 120天累积实测值高值的对比

表4 自制低值质控品各月TM测定值±SD)比较

表5 自制高值质控品各月TM测定值±SD)比较

3 讨论

在全面质量管理体系中，实验室内质量控制是一个重要环节，而质控品是保证质控工作的重要物质基础。根据卫生部《临床实验室定量测定室内质量控制指南》[1]，质控品物理性状可有冻干质控品、液体质控品和混合血清等；质控血清应尽可能与人血清样本一致，减少基质效应，反应速率尽量与人血清一致，并考虑合理的成本。通过本实验对自制质控品日内、日间各项指标的分析，自制质控血清瓶间变异小，观察期内质控品均值、标准差、变异系数均保持了良好的稳定性，与BIO-RAD质控品的各项指标比较无统计学差异，各项目变异系数均在不精密度要求[5]范围内。各项TM检测的每月均值、累积均值各组间无统计学差异，无明显漂移及趋势变化，观察期内未发生由质控品原因引起的失控。在自制质控品做质控物期间，8个TM项目共出现2次由于试剂原因引起的室内质控失控，自制质控品与BIO-RAD质控品同时出现报警。自制质控品除具有无基质效应、制备过程简单、成本低廉外，实验室还可以根据实际需要，配制自己所需浓度区间的TM质控品，本实验配制了8个TM参考区间上限和病理值两个浓度水平。由于本院肿瘤病人较多，配制相应TM浓度水平质控物方便。对于高值血清不易获得的实验室，可利用冷冻液体血清在缓慢解冻后，物质浓度会产生梯度变化的原理制备高、低各水平的质控物[6]。还有学者使用单份病人血清分装制备，避免了各个抗原抗体之间的相互交叉和干扰[7]。在自制质控品的制备过程中，必须严格按标准对血清进行筛选，以保证自制质控品性状满足指南中对液性质控物的基本要求。

由于本实验观察期较短，对于自制质控品更长的稳定期，还需继续观察。对于使用自制质控品的实验室，应当根据具体条件，制定适合自己实验室的自制质控品制备方法、使用规程、靶值设定及相应质控规则选择的标准化文件。确保实验室管理者在合理考虑成本的同时，保证检验质量，促进质量持续改进。

[1]GB/T 20468-2006,中华人民共和国卫生部《临床实验室定量测定室内质量控制指南》[S].

[2]Goi G,Besozzi M,Bairati C ,et al.Preparation of a Stable Liquid Material for Calibration and Quality Control for Lysosomal Enzymes in Plasma [J].Eur J Clin Chem Clin Biochem,1992,30(10):595.

[3]张丽萍，刘元明，张金红,等.自制他克莫司室内质控品的制备及临床应用研究[J].检验医学,2013(11):1021.

[4]段 勇，王玉明，赵 滢,等.临床化学检验的液性质控血清的制备研究[J].昆明医学院学报,2003，2：24.

[5]王治国.临床检验质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社，2004:42-54.

[6]戴 卉，钟志敏，周小棉,等.肿瘤标志物质控血清的研制及其初步应用[J].国际检验医学杂志,2013，34(19):2557.

[7]邵青青，刘志忠，李方强,等.患者血清作为Luminex-200测定肿瘤标志物室内质控的探讨[J].中国综合临床，2012,28(11):1187.

The preparation and clinical application research of home-made quality control material

ZHANGHui,GUOYing.

(DepartmentofClinicalLaboratoryofUnicareENTHospital,Beijing100122,China)

Objective To explore feasibility of home-made quality control material.Methods home-made quality control material was prepare by using routine residual serum and was run on Cobas8000 with daily serum samples and RIO-RAD control.Results home-made quality control material show good stability and have no significant difference with RIO-RAD control(P>0.05).Conclusion home-made quality control serum have advantages of low cost,good stability,and can meet the requirements of internal quality control.

Home-made quality control;Tumor marker;Internal quality control

1007-4287(2016)12-2027-03

R73-3

A

2016-01-20)