高效液相色谱法测定复方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量
2016-12-29程洪兵
程洪兵
(河南省濮阳市人民医院,河南 濮阳 457000)
高效液相色谱法测定复方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量
程洪兵
(河南省濮阳市人民医院,河南 濮阳 457000)
目的 建立测定复方醋酸曲安奈德尿素乳膏中测定醋酸曲安奈德含量的高效液相色谱法。方法 色谱柱为 Welchrom C18柱(250 mm×4.6 mm,5 m),流动相为甲醇-水(70∶30),检测波长为240 nm。结果醋酸曲安奈德质量浓度在25.4~89.0 g/mL范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为99.08%,RSD为1.10%(n=6)。结论 该法简便快捷、准确可靠,可作为测定醋酸曲安奈德含量的质量控制方法。
复方醋酸曲安奈德尿素乳膏;醋酸曲安奈德;含量测定;高效液相色谱法
复方醋酸曲安奈德尿素乳膏是本院医院制剂(批准文号为豫药制字H20121649<濮>),用于脂溢性皮炎、神经性皮炎、虫咬性皮炎、湿疹、银屑病等症的治疗,效果较佳,已在临床应用多年。该药物原质量标准中,醋酸曲安奈德和尿素2组分的含量测定均采用紫外分光光度法。由于醋酸曲安奈德含量较低,且易受尿素和其他基质的干扰,操作过程烦琐、费时,且准确度较差。本研究中通过方法学考察,建立测定醋酸曲安奈德含量的高效液相色谱法[1],旨在减少测定时间和强度,提高结果准确度,更好控制药品质量。现报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Waters 515型高效液相色谱仪(美国Waters公司);
92SM-202A型电子天平(瑞士Precisa公司);电热恒温水温箱(北京科学仪器厂)。
1.2 试药
复方醋酸曲安奈德尿素乳膏及阴性样品(批号分别为150722,150819,150915,濮阳市人民医院制剂室提供);醋酸曲安奈德对照品(中国食品药品检定研究院,供含量测定用,批号100125-201103);甲醇为色谱纯,水为注射用水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱:Welchrom C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(70∶30);流速:1.0 mL/min;检测波长:240 nm;进样量:20 μL;柱温:40℃。在拟订色谱条件下,醋酸曲安奈德的保留时间为15.6 min,理论板数按醋酸曲安奈德峰计算应不低于2 500。
2.2 溶液制备
取醋酸曲安奈德对照品适量,精密称定,加甲醇溶解并定量稀释制成每1 mL中约0.125 mg的溶液,作为对照品贮备液。精密量取此溶液20 mL,置50 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。取复方醋酸曲安奈德尿素乳膏3.0 g,精密称定,置100 mL容量瓶中,加甲醇约60 mL,置80℃水浴中加热2 min,振摇使醋酸曲安奈德溶解,放冷,用甲醇稀释至刻度,摇匀,置冰浴中冷却2 h以上,取出,迅速滤过,取续滤液,放置室温,作为供试品溶液。取处方中不含醋酸曲安奈德的其他药物制成的阴性样品同法制备阴性对照品溶液。
2.3 方法学考察
专属性试验:取2.2项下的对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液,按拟订色谱条件进行测定。结果供试品溶液中醋酸曲安奈德和其他组分色谱峰可达到基线分离,阴性对照品溶液对醋酸曲安奈德的测定无干扰,见图1。
图1 高效液相色谱图
线性关系考察:分别精密量取对照品贮备液2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0 mL,置10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。分别吸取20 μL,按拟订色谱条件进样,测定醋酸曲安奈德峰面积。以醋酸曲安奈德质量浓度(C,μg/mL)对峰面积(A)进行线性回归,得回归方程A=2.081 9×104C+1.415 1×104,r=0.999 9(n=6)。结果表明,醋酸曲安奈德质量浓度在25.4~89.0 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。
精密度试验:精密量取2.2项下的同一对照品溶液20 μL,按拟订色谱条件重复进样5次,以峰面积计算。结果的 RSD为0.46%(n=5),表明仪器精密度良好。
重复性试验:精密量取同一批号的样品(批号为150819)5份,依法制备供试品溶液并进样,测得峰面积。结果的 RSD为 0.65%(n=5),表明方法重复性良好。
稳定性试验:取同一份供试品(批号为150819)溶液,室温放置,于0,1,2,4,8 h时分别进样20 μL,按拟订色谱条件,注入高效液相色谱仪,记录峰面积。结果的 RSD为0.81%(n=5),表明供试品溶液在8 h内稳定。
加样回收试验:取同一批样品(批号为150915,含量为1.95 mg/g)6份,精密称取,分别精密加入醋酸曲安奈德对照品贮备液6.0,8.0,10.0 mL,依2.2项下供试品溶液方法制备溶液,按拟订色谱条件进行测定,并计算回收率。结果见表1。
表1 醋酸曲安奈德加样回收试验结果(n=6)
2.4 样品含量测定
分别精密量取样品 3批(批号分别为 150722,150819,150915),依2.2项下的方法制备3份供试品溶液,分别吸取对照品溶液和3份供试品溶液各20 μL注入液相色谱仪中,测定峰面积,按内标法计算含量,结果见表2。
表2 3批样品中醋酸曲安奈德含量测定结果(n=3)
3 讨论
曾考察超声30 min提取样品,经图谱比较计算,最终选择置80℃水浴中加热2 min后冰浴提取的方法。对醋酸曲安奈德对照品溶液进行波长扫描,显示于240 nm波长处有最大吸收,尿素在此处无吸收。由于本品中尿素含量较高,曾选用其他成分及比例的流动相[2-4],结果显示流动相比例为70∶30,醋酸曲安奈德峰与邻近组分色谱峰分离度大于 1.5,保留时间适宜。保持柱温40℃,醋酸曲安奈德峰对称性好,其他组分峰明显减少,结果满意。
高效液相色谱法测定复方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量,简便快捷、准确可靠,可作为测定醋酸曲安奈德含量的质量控制方法。
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:附录23-附录24.
[2]刘光斌,刘效栓,姜芳宁,等.高效液相色谱法测定湿疹乳膏中氯霉素和醋酸曲安奈德乳膏含量[J].中国药业,2010,19(23): 34-35.
[3]王 艳,徐 晖,刘玉强,等.HPLC法测定乳膏中联苯苄唑和醋酸曲安奈德的含量[J].中国新药杂志2007,16(8):631-633.
[4]李爱英,尹艳连,赵作连.复方曲氯乳膏的制备及临床应用[J].中国医院药学杂志,2007,27(2):260-262.
Content Determination of Triamcinolone Acetonide Acetate in Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream by HPLC
Cheng Hongbing
(Puyang People′s Hospital,Puyang,Henan,China 457000)
Objective To establish an HPLC method for the content determination of triamcinolone acetonide acetate in Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream.Methods Welchrom C18column(250 mm×4.6 mm,5 μm)was used with methanol-water (70∶30)as mobile phase and UV detection wave length was 240 nm.Results The linear range of triamcinolone acetonide acetate was 25.4~89.0 μg/mL.The average recovery was 99.08% and RSD was 1.10%(n=6).Conclusion The method is simple,convenient and accurate.It can be used for quality control of Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream.
Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream;triamcinolone acetonide acetate;content determination;HPLC
R927.2;R986
A
1006-4931(2016)11-0063-03
程洪兵,男,大学本科,副主任药师,主要从事药品检验及新制剂开发工作,(电子信箱)pychbing@126.com。
2015-08-13;
2016-01-11)