肺炎支原体肺炎合并肺外表现患儿外周血辅助性T细胞表达水平分析

陈小庚, 魏杰淼, 闫虹



临床研究

肺炎支原体肺炎合并肺外表现患儿外周血辅助性T细胞表达水平分析

陈小庚, 魏杰淼, 闫虹

目的 分析肺炎支原体肺炎(MPP)合并肺外表现患儿外周血辅助性T细胞表达水平。方法 选择2015年1月至12月在沈阳市儿童医院门诊就诊或住院治疗的MPP患儿97例，入选对象均在开始治疗前接受了外周血辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)检测，并与同期体检结论正常儿童(对照组，35例)相同测试结果比较。结果 MPP组外周血CD3+、CD4+表达强度及CD4+/CD8+比值均明显低于对照组，而CD8+水平则明显高于后者，差异均有统计学意义(P<0.05)。97例MPP患儿中，合并肺外表现者43例(44.33%)，合并肺外表现组外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明显低于无肺外表现组，而CD8+水平则明显高于后者，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MPP患儿存在着明确的外周血辅助性T细胞表达异常，合并肺外表现者变化更为显著。

肺炎支原体肺炎； 肺外表现； 辅助性T细胞； 儿童

肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae，MP)是中国儿童呼吸道感染极为常见的病原体，好发于幼儿及学龄前儿童。MP感染不但带来了呼吸系统病变，还会引发肺外脏器损伤，甚至出现诸多脏器、系统共同受累，后者更易使肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)病情呈现多元化、复杂化，发生临床上的误诊、误治[1-2]。新近认为[3-5]，MP发生和进展与人体内细胞免疫关系密切，MPP患儿是否合并肺外损伤的免疫学机制也有所不同，但迄今为止，国内专项涉及这方面内容报道不多。笔者连续选择近一年在沈阳市儿童医院门诊就诊或住院治疗的MPP患儿97例，他们均在治疗前接受了外周血辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)检测，并按是否合并肺外损伤进行分组，并与同期体检结论正常儿童(对照组，32例)相同检查结果比较，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2015年1月至12月在沈阳市儿童医院门诊就诊或住院治疗的MPP患儿97例，其中男58例，女39例；年龄1～14岁，平均(6.03±2.94)岁。选取同期在本院健康体检结论正常儿童35例为对照组，其中男22例，女13例；年龄1～14岁，平均(6.29±2.61)岁。两组儿童的年龄和性别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 诊断标准 参照《实用小儿呼吸病学》中MPP诊断标准[6]。

1.3 纳入标准 (1)符合上述MPP诊断标准；(2)年龄≤14岁；(3)患儿家属知情同意。

1.4 排除标准 (1)近期急、慢性感染性疾病患儿；(2)有心、肝、肾及神经系统疾病史患儿；(3)近3个月接受激素或免疫抑制剂治疗患儿。

1.5 外周血辅助性T细胞表达水平测定 入选对象均在空腹8 h后抽取静脉血8 mL，高速离心10 min后，分离血清，保存于超低温冰箱待检。机器采用美国FC-500-MPL流式细胞仪，外周血辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)测定由海丰翔生物科技有限公司提供试剂盒，按照使用说明书规定步骤操作。

1.6 观察指标 CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值。

2 结果

2.1 两组对象外周血辅助性T细胞表达水平比较 见表1。

表1 两组对象外周血辅助性T细胞表达水平比较

表1结果表明，MPP组外周血CD3+、CD4+表达强度及CD4+/CD8+比值均明显低于对照组，而CD8+水平则明显高于后者，差异均有统计学意义(P<0.05)。

2.2 有无肺外表现MPP患儿外周血辅助性T细胞表达水平表达水平比较 97例MPP患儿中，合并肺外表现者43例(44.33%)，无肺外表现者54例(55.67%)。有无肺外表现MPP患儿外周血辅助性T细胞表达水平比较见表2。

表2 有无肺外表现MP患儿外周血辅助性T细胞表达水平比较

表2结果表明，合并肺外表现组外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明显低于无肺外表现组，而CD8+水平则明显高于后者，差异均有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

各种T淋巴细胞是人体内免疫系统中发挥重要作用的细胞群，辅助性T细胞主要发挥免疫调节功能，其中CD4+协调B细胞完成分化，并产生抗体，而CD8+则抑制这类抗体合成、分泌及刺激T细胞增殖。迄今为止，MPP发病确切机制不完全明了，目前主要倾向于免疫调节紊乱学说，发生了免疫抑制及免疫逃逸现象。MP是介于细菌与病毒之间没有细胞壁的一种原核细胞微生物，随着各种诊断技术完善及提高，MPP患病率明显上升，其主要症状为发热、头痛、咽痛及剧烈干性呛咳，部分患者还伴有多系统及多器官肺外并发症，且较多累及血液、消化、心脏、泌尿以及神经系统。已有大量资料[7-10]证实，辅助性T细胞及其分泌的炎性细胞因子体内表达失常在MP呼吸道感染过程中扮演重要角色，并直接引发了患者呼吸系统免疫损伤；另一方面，MP抗原与人体宿主的心、肺、肝、脑、肾各主要脏器及平滑肌组织拥有相同抗原，MP入侵后产生了自身相应抗体，结合后形成免疫复合物，导致肺及肺外靶器官发生病变，加重了MPP病情。笔者连续选择近一年在沈阳市儿童医院门诊就诊或住院治疗的MPP患儿为观察对象，他们均在治疗前接受了外周血辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)检测，并按是否合并肺外损伤进行分组，并与同期体检结论正常儿童(对照组，35例)相同检查结果比较，研究发现，MPP组外周血CD3+、CD4+表达强度及CD4+/CD8+比值均明显低于对照组，而CD8+水平则明显高于后者；同时，合并肺外表现者外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明显低于无肺外表现组，而CD8+水平则明显高于后者。这些数据均提示，MPP患儿存在着明确的外周血辅助性T细胞表达异常，其中，CD3+、CD4+及CD4+/CD8+表达明确低下，而CD8+表达增强，合并肺外表现者上述变化更为显著。一些国内同行[11-14]通过免疫荧光和补体介导方法发现，急性期及肺外并发症组MPP患儿体内CD3+、CD4+表达水平呈一过性降低，CD4+/CD8+比值显著下降，抑制性T细胞(CD8+)表达明显加强，这都说明，MPP患儿体内负免疫调节机制消弱，导致发生过度免疫反应。另几位作者发现，将两组缺少T细胞的SCID小鼠和免疫功能正常小鼠感染分别感染相同数量MP，后者的肺部症状明显强于前者，这些提示决定MPP病情主要因素不是病原体本身而是T淋巴细胞功能状态[15]。

总之，MPP患儿，特别是合并肺外表现者存在明显的外周血相关辅助性T细胞表达低下或绝对量不足，这也可能是MPP发生机制之一，由此推论通过各种途径补充及刺激机体增加辅助性T细胞，促进他们在体内表达平衡，就可能减轻患儿体内炎症反应，并保护自身及清除病原，同时，这些细胞免疫体内表达状态也可能成为MPP确诊标识和评估疗效参照指标。

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(本文编辑：李志文)

Expression of T helper cells in peripheral blood of children with Mycoplasma pneumonia complicated with extrapulmonary manifestations

CHENXiaogeng，WEIJiemiao，YANHong.

TheChildrenHospitalofShenyang，Shenyang110032，China.

Objective To analyze the expression level of T helper cells in peripheral blood of children with Mycoplasma pneumonia complicated with extrapulmonary manifestations.Methods We detected the peripheral T helper cells(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/ CD8+)in the blood of the 97 selected continuous cases of children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia before starting treatment,who received treatment in the Children Hospital of Shenyang from Jan.to Dec.2015,and compared with the results of the normal children on the medical conclusions at the same test in the same period(control group,n=35).Results The expression intensity of the peripheral CD3+,CD4+, and ratio of CD4+ /CD8+ of the Mycoplasma pneumoniae pneumonia group were significantly lower than the control group,while that of CD8+ was higher (P<0.05～ 0.01).In the 97 children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia,43 cases had extrapulmonary manifestations(44.33%), and the CD3+level,the CD4+ level,CD4+ /CD8+ ration in the group with extrapulmonary manifestations were obviously lower than the group without extrapulmonary manifestations,while the CD8+ level was higher than the latter(P<0.05～0.01).Conclusion Peripheral blood helper T cells are abnormally expressed in children with Mycoplasma pneumonia;these abnormalities are more obvious in the patients complicated with extrapulmonary manifestations.

Mycoplasma pneumoniae pneumonia; Extrapulmonary manifestations; T helper cells； Child

110032沈阳,沈阳市儿童医院内二科(陈小庚,闫虹),内五科(魏杰淼)

陈小庚(1978-),女,主治医师。研究方向:小儿感染性肺疾病诊断及治疗

陈小庚,E-mail:13889380301@163.com

10.3969/j.issn.1674-3865.2016.05.022

R725.6

A

1674-3865(2016)05-0525-03

2016-05-12)