多西他赛致大鼠外渗性皮肤损伤的治疗研究

林　欣，何　珂，黄朝芳，陈求薇

多西他赛致大鼠外渗性皮肤损伤的治疗研究

林欣，何珂，黄朝芳，陈求薇

目的探讨多西他赛致外渗性皮肤损伤的治疗效果。方法24只SD大鼠随机分为透明质酸酶组（n=6）、地塞米松组（n=6）、联合组（n=6）及对照组（n=6）。于大鼠双侧后肢注射6 mg/ml浓度的多西他赛制备外渗性皮肤损伤模型。所有动物在注射后1 w，以注射点为中心，周围4点分别注射药物0.1 ml，均注射1次。其中透明质酸酶组注射75 U/ml注射用透明质酸酶，地塞米松组注射1 mg/ml地塞米松磷酸钠注射液，联合组注射含75 U/ml注射用透明质酸酶及1 mg/ml地塞米松磷酸钠注射液混合液，对照组注射生理盐水。观察各组皮肤损伤面积随治疗时间的变化，对比各组14d内皮肤愈合率及愈合时间。结果24只大鼠48个注射部位在注射多西他赛后3～5 min局部形成红斑、充血、水肿，1 w左右均于注射点周围形成皮肤溃疡。各组皮肤损伤面积在治疗前均无统计学差异（P＞0.05）；各组各损伤部位经治疗后，皮肤损伤面积均随治疗时间延长而呈逐渐下降趋势，其中联合组下降最快，其次为透明质酸酶组、地塞米松组。截止治疗后14 d，各组愈合率有统计学差异（P＜0.05），其中联合组最高为100.0%，其次为透明质酸酶组（75.0%）、地塞米松组（66.7%），对照组最低（33.3%）。平均愈合时间各组相比有统计学差异（P＜0.05），其中联合组愈合时间最短，其次为透明质酸酶组、地塞米松组，对照组愈合时间最长。结论透明质酸酶、地塞米松局部注射是治疗多西他赛致外渗性皮肤损伤的有效方法，两者联用疗效更佳。

多西他赛；外渗皮肤损伤；透明质酸酶；地塞米松；大鼠

化疗是治疗恶性肿瘤的重要方法之一，大多数化疗药物通过静脉注射途径给药，但在静脉输注过程中容易发生药物外渗导致皮肤损伤，引起皮肤局部红肿、破溃、坏死、疼痛等，严重者可造成皮肤组织坏死、甚至损伤神经肌腱，导致肢体功能障碍［1-2］。而目前对化疗药物外渗性皮肤损伤的防治尚缺乏统一的指导性意见［3］。多西他赛是一种新型抗肿瘤药，主要用于卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌及其他恶性实体瘤的治疗，以静脉给药为主要途径。近年来发现该药血管外渗漏后引起严重组织坏死、溃疡形成等不良反应，给患者带来极大的痛苦［4-5］，并且目前尚缺乏有效的防治措施。为了探讨多西他赛外渗性皮肤损伤的治疗措施，本研究通过制备相关动物模型，研究透明质酸酶及地塞米松对其治疗效果，为多西他赛外渗性皮肤损伤的治疗提供实验依据。

1　材料与方法

1.1主要材料SPF级SD大鼠购自第三军医大学实验动物中心，雌雄各12只，动物合格证号：SCXK（渝）2015003，体质量178～190（180±5）g，周龄8～10 w。多西他赛注射液（江苏扬子江药业集团有限公司，国药准字H20093850）；注射用透明质酸酶（上海第一生化制药有限公司，国药准字H31022111）；地塞米松磷酸钠注射液（吉林敖东药业有限公司，国药准字H22022889）。

1.2方法

1.2.1实验动物分组24只SD大鼠按照随机数字表法随机分为4组：透明质酸酶组、地塞米松组、联合组及对照组，每组6只。各组大鼠体质量、周龄均无统计学差异（P＞0.05）。

1.2.2动物模型的制备将大鼠双侧后肢祛毛，暴露皮肤，并保证皮肤完好，无破溃、红肿等表现。于双侧股骨小头上方约1 cm处注射6 mg/ml多西他赛注射用0.4 ml，使皮肤隆起［6］。每个注射点为1个观察部位，注射完毕后，观察注射点周围皮肤情况，至出现皮肤红肿、破损直至溃疡直径＞2 mm达皮肤损伤标准。24只大鼠均在注射后1 w内成功制备外渗性皮肤损伤模型。

1.2.3治疗方案所有动物均在注射多西他赛1 w后开始治疗，以多西他赛注射点为中心，半径1 cm处上、下、左、右各4点注射药物0.1 ml，注射1次。其中透明质酸酶组注射75 U/ml注射用透明质酸酶，地塞米松组注射1 mg/ml地塞米松磷酸钠注射液，联合组注射含75 U/ml注射用透明质酸酶及1 mg/ml地塞米松磷酸钠注射液混合液，对照组注射生理盐水。

1.3观察指标及评定标准注射药物治疗后，每天观察并记录大鼠局部皮肤损伤面积，计算方法为损伤处最长垂直长度与最长水平长度乘积。观察周期为14 d，记录各组14 d内皮肤愈合情况及愈合时间。皮肤愈合标准为皮肤无红肿、充血，溃疡愈合，毛发重新长出。

1.4统计学方法采用SPSS16.0软件进行统计学分析，计量资料以均值±标准差表示，组间比较采用One-Way ANOVO；计数资料用频数和百分率表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1多西他赛致大鼠外渗性皮肤损伤的表现24只大鼠48个注射部位在注射多西他赛后3～5 min，局部形成红斑、充血、水肿，1 w左右均于注射点周围形成皮肤溃疡。皮损面积56～72 mm2，其中透明质酸酶组平均为（63.7±5.3）mm2，地塞米松组为（62.3± 5.0）mm2，联合组为（63.5±5.5）mm2，对照组为（63.4± 5.2）mm2。各组皮损面积无统计学差异（P＞0.05）。2.2各组治疗后皮损面积各组治疗后皮损面积均随治疗时间延长而呈逐渐下降趋势，透明质酸酶组、地塞米松组、联合组均较对照组下降明显（P＜0.01），其中联合组下降最快，其次为透明质酸酶组、地塞米松组。从治疗后第4 d起，各组损伤面积相比有统计学差异，其中联合组最低，其次为透明质酸酶组、地塞米松组，对照组最高，见图1。

2.3各组愈合率及愈合时间截止治疗后14 d，各组愈合率有统计学差异（P＜0.05），其中联合组最高为100.0%，其次为透明质酸酶组（75.0%）、地塞米松组（66.7%），对照组最低（33.3%）。各组平均愈合时间也显著不同（P＜0.05），其中联合组愈合时间最短，其次为透明质酸酶组、地塞米松组，对照组愈合时间最长。见表1。

表1　各组愈合率及愈合时间比较（n=12）

3　讨论

不同化疗药物外渗导致皮肤损伤的机制不同，主要通过化疗药物的溶脂作用使细胞膜通透性增强，造成细胞溶解，同时与细胞DNA结合引起细胞坏死［7］。多西他赛为一种新型的细胞周期特异性抗肿瘤药物，作用于M期细胞，抑制细胞有丝分裂从而杀伤肿瘤细胞，目前在临床上应用越来越广泛。多西他赛的给药途径为静脉给药，与很多化疗药物一样可引起外渗性皮肤损伤。为了探讨多西他赛致外渗性皮肤损伤的治疗方法，本研究制备了多西他赛致大鼠外渗性皮肤损伤模型。结果在大鼠后肢皮下注射多西他赛能够使大鼠皮肤数分钟内出现红斑、水肿等炎症表现，随后在1 w内形成溃疡，均达到外渗性皮肤损伤标准，模型制备成功。可见，SD大鼠皮下注射多西他赛制备外渗性皮肤损伤模型操作简单，可行性强。

透明质酸酶能够降低体内透明质酸活性，提高组织中液体渗透能力，临床上常用于加速皮下或肌肉注射药物的吸收，促进手术或创伤后局部组织水肿的消散。近年来用于治疗化疗药物所致的外渗性皮肤损伤的动物实验及临床研究发现，透明质酸酶有助于促进皮肤损伤的愈合［8-11］。地塞米松是一种糖皮质激素类药物，具有抗炎和抗过敏作用，能够抑制炎症细胞和炎症介质的释放。研究发现，地塞米松用于化疗药物引起的外渗性组织损伤具有一定疗效［12-13］。本研究对比分析了透明质酸酶、地塞米松以及二者联合局部注射治疗多西他赛所致大鼠皮肤损伤的疗效，结果表明上述治疗方法均能促进皮肤损伤的愈合，两者联合应用使损伤愈合率更高，愈合更快，疗效更佳。这与朱其聪等［13］报道的透明质酸酶与地塞米松治疗长春瑞滨所致的大鼠外渗性皮肤损伤疗效相似。其作用机制目前仍不明确，可能是由于透明质酸酶促进药物吸收，地塞米松抑制炎症反应，两者联用起到协同作用。

总之，本研究发现大鼠皮下注射多西他赛可成功制备外渗性皮肤损伤模型，透明质酸酶、地塞米松局部注射是治疗多西他赛致外渗性皮肤损伤的有效方法，两者联用疗效更佳。

图1　各组皮损面积随治疗时间变化曲线

［1］Sakaida E，Sekine I，Iwasawa S，et al.Incidence，risk factors and treatment outcomes of extravasation of cytotoxic agents in an outpatient chemotherapy clinic［J］.Jpn J Clin Oncol，2014，44（2）: 168-171.

［2］Pluschnig U，Haslik W，Bayer G，et al.Outcome of chemotherapy extravasation in a large patient series using a standardised management protocol［J］.Support Care Cancer，2015，23（6）: 1741-1748.

［3］Harrold K，Gould D，Drey N.The management of cytotoxic chemotherapy extravasation:a systematic review of the literature to evaluate the evidence underpinning contemporary practice［J］. Eur J Cancer Care（Engl），2015，24（6）:771-800.

［4］Cifuentes L，Ring J，Brockow K.Extravasation of docetaxel［J］.J Dtsch Dermatol Ges，2012，10（9）:662-663.

［5］Chang PH，Wang MT，Chen YH，et al.Docetaxel extravasation results in significantly delayed and relapsed skin injury:a case report［J］.Oncol Lett，2014，7（5）:1497-1498.

［6］Zhu JJ，Fu JF，Yang J，et al.Rat injury model of docetaxel extravasation［J］.Biomed Rep，2014，2（5）:649-652.

［7］Hahn JC，Shafritz AB.Chemotherapy extravasation injuries［J］.J Hand Surg Am，2012，37（2）:360-362.

［8］Beaulieu MJ.Hyaluronidase for extravasation management［J］. Neonatal Netw，2012，31（6）:413-418.

［9］朱其聪，罗荣城，李爱民，等.透明质酸酶、喜辽妥软膏治疗多西紫杉醇外渗性大鼠皮肤损伤［J］.临床肿瘤学杂志，2007，12（4）:259-263.

［10］朱其聪，罗荣城，缪景霞，等.二甲基亚砜、透明质酸酶治疗多西紫杉醇外渗性大鼠皮肤损伤［J］.解放军医学杂志，2007，32（6）:588-590.

［11］朱其聪，李爱民，罗荣城，等.几丁糖、透明质酸酶治疗多西紫杉醇外渗性大鼠皮肤损伤［J］.癌症，2007，26（4）:346-350.

［12］黎逢弟，梁凤英，陈晓莹，等.双柏散联合地塞米松湿敷对铂类化疗药物外渗的疗效观察［J］.中华护理教育，2015（6）: 470-471，472.

［13］朱其聪，罗荣城，张正义，等.透明质酸酶、地塞米松对长春瑞滨外渗性大鼠皮肤损伤的疗效［J］.肿瘤研究与临床，2010，22（10）:678-680.

Study on treatment of exosmosis-induced skin injury in rats caused by docetaxel

Lin Xin，He Ke，Huang Chaofang，Chen QiuweiCancer Center，Central Hospital 187 of PLA，Haikou，Hainan，571159，China

ObjectiveTo explore the treatment outcome of exosmosis-induced skin injury in rats caused by docetaxel. MethodsA total of 24 SD rats were randomly divided into hyaluronidase group（n=6），dexamethasone group（n=6），combination group（n=6）and control group（n=6）.Docetaxel with a concentration of 6 mg/ml was injected into the bilateral posterior limbs of rats to create model of exosmosis-induced skin injury.All rats were injected with 0.1 ml drug at the four points around the previous injection point for one time one week after the injection.The hyaluronidase group was injected with 75 U/ml hyaluronidase for injection，the dexamethasone group with 1 mg/ml dexamethasone sodium phosphate injection，the combination group was injected with the mixed liquor of 75 U/ml hyaluronidase for injection and 1 mg/ml dexamethasone sodium phosphate injection，and the control group with normal saline.The changes in the areas of skin injury in the four groups were observed and the skin healing rates and healing time periods in the four groups within 14 days were compared.ResultsLocal erythema，hyperemia and edema were formed at the 48 injection points of the 24 rats 3-5 min after injection of docetaxel，and skin ulcer was created around the injection points around one week.There was no significant difference among the areas of skin injury in the four groups before treatment（P＞0.05）；after treatment，the areas decreased along the prolonged treatment time；the areas in the combination group decreased the most quickly，followed by the hyaluronidase group and the dexamethasone group.14 days after the treatment，there was significant difference among the healing rates in the four groups（P＜0.05）:the healing rate in the combination group was the highest（100.0%），followed by the hyaluronidase group（75.0%）and the dexamethasone group（66.7%），and that in the control group was the lowest（33.3%）.There was also significant difference among the healing time periods in the four groups（P＜0.05）:the healing time periods in the combination group was the shortest，followed by the hyaluronidase group and the dexamethasone group，and that in the control group was the longest. ConclusionLocal injection of hyaluronidase and dexamethasone is effective for the treatment of exosmosis-induced skin injury. Better effect may be achieved by combining them.

docetaxel；exosmosis-induced skin injury；hyaluronidase，dexamethasone；rat

R 722.142/453

A

1004-0188（2016）08-0841-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2016.08.005

571159海口，解放军187医院肿瘤中心

（2016-05-02）