不同断奶日龄与精料补饲量对舍饲母羊产后雌二醇与孕酮的影响

许开云，马友记

（1.甘肃省武威市畜牧兽医科学研究院，武威 733000；2.甘肃农业大学动物科技学院，兰州 730070；3.甘肃省肉羊繁育生物技术工程实验室，民勤 733300）

繁殖与生理

不同断奶日龄与精料补饲量对舍饲母羊产后雌二醇与孕酮的影响

许开云1，马友记2，3

（1.甘肃省武威市畜牧兽医科学研究院，武威 733000；2.甘肃农业大学动物科技学院，兰州 730070；3.甘肃省肉羊繁育生物技术工程实验室，民勤 733300）

采用不同精料补饲量（0.25 kg/d、0.50 kg/d、1.00 kg/d）饲喂不同断奶日龄（42 d和63 d）的36只产后舍饲母羊，利用化学发光法和放射性免疫法分别对其0～91 d外周血液中雌二醇（17β-E）2和孕酮（P4）的变化规律进行研究。结果表明：母羊在产羔后当天17β-E2的浓度为175.22 pg/mL± 22.64 pg/mL，然后呈现下降趋势，断奶后呈现上升趋势，之后出现不规则的波动；在产羔后当天P4的浓度为0.13 ng/mL±0.02 ng/mL，之后维持较低的水平，在断奶前基本处于较低水平，之后出现波动，在断奶后出现小范围的升高之后降低。在断奶日龄上，舍饲母羊17β-E2和P442 d断奶出现峰值要早于63 d断奶。在精料补饲水平上，0.50 kg/d的精料补饲情况下，17β-E2波动出现较早；对17β-E2与P4变化趋势对比得出，在42 d断奶与0.50 kg/d的精料补饲下有利于频繁产羔技术体系，实现一年两产或两年三产模式。以上结果对产后母羊内分泌恢复和发情机理探讨提供了理论基础。

断奶日龄；补饲；母羊；雌二醇；孕酮

绵羊的生殖活动主要受体内生殖激素的调控，生殖激素直接调控母畜的发情、排卵、生殖细胞在生殖道内的运行、胚胎附植、怀孕和泌乳等生殖环节的某一方面或某些方面，特别是孕酮和雌激素倍受国内外专家和学者的重视［1］。毕浩磊等［2］对舍饲母羊妊娠期各阶段雌二醇（17β-E2）和孕酮（P4）的浓度变化规律进行了研究。王玉琴等［3］对超排绵羊血液中的激素水平与超排效果进行了研究。曾国庆等［4］对滩羊发情周期血液中促黄体素（LH）、P4和17β-E2的含量及其变化进行了研究。张振汉等［5］对产双羔的滩羊母羊生殖周期中血清的性激素含量也进行了研究。郎侠［6］探讨了不同断奶日龄对母羊体况和雌激素分泌的影响。Plokta E D等［7］的研究发现，血浆E2与孕酮P4浓度比值能较准确地反映雌性欧洲白尾鹿血浆P4浓度波动。目前工厂化与集约化养羊普遍采用密集产羔技术，而母羊密集产羔技术的关键是在繁殖季节与非繁殖季节对母羊进行诱导发情或同期发情，打破母羊的繁殖季节性，缩短母羊产后发情时间，使母羊尽早产后发情，但由于在实际生产中没有掌握泌乳期母羊生殖内分泌的变化，导致泌乳期诱导发情效果并不理想［8］。为此，本试验通过研究不同断奶日龄和不同精料补饲后泌乳期舍饲母羊的生殖内分泌变化，探讨影响母羊产后发情的因素及发情机理，了解自然状态下母羊产后激素变化规律及生长因子变化规律，从而为母羊产后尽早发情、配种，缩短产羔间隔，增加产羔频率等更好地发挥母羊生产性能提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 试验地概况

试验羊场地处东经102°22′07″～102°24′18″，北纬38°12′11″～38°13′20″，属于典型的大陆性气候，夏热冬寒，年均气温6.5～7.4℃，年降水量138mm，年蒸发量200mm，无霜期150 d，海拔高度1 580 m左右。场内饲料基地用水质良好的地下水灌溉，种植牧草饲料以紫花苜蓿、青贮玉米为主，每公顷产量青紫花苜蓿干草13.5～15.0 t，青贮玉米150 t左右。

1.2 试验设计

在保证母羊胎次一致的情况下选用产羔期相近（间隔在12～48 h）、膘情一致、身体健康的产羔母羊36只为试验用羊，并将其随机分为6组，每组6只，精料为泌乳羊全价配合饲料（永昌三洋饲料公司生产），羔羊出生后跟随母羊自由吮乳，断奶时，强制母羊与羔羊隔离，给羔羊补饲，母羊的饲养管理不变，具体试验设计方案见表1，精料组成与营养水平见表2和表3。

表1 试验设计

表2 试验精料配方%

表3 混合日粮营养水平

1.3 饲养管理

试验羊入舍前和试验期间，按常规消毒，并对母羊进行定期防疫注射。试验羊分隔到6个单圈中饲养，除精料添加量和断奶日龄不同外，其余管理措施完全相同。分别于每天7：00、11：30和18：00饲喂母羊3次，主要饲喂干玉米秸（2.5 kg/d）和泌乳羊全价配合饲料，并在饲槽内放置舔砖、水槽，保持新鲜洁净，供给充足，让羊自由饮水、自由运动。

1.4 血样采集

母羊产羔后当天记为试验的第0天，进行第1次采血（母羊产后12～24 h），之后0、7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77、84、91 d各采血一次。采血在当天早上7：30—8：00，用10 mL离心管进行颈静脉采血，并按柠檬酸钠抗凝剂与血液1∶8比例进行抗凝处理，3 000 r/min离心5～10 min，分离上清液，并分装于2 mL离心管中，标记后放置于-20℃冰箱中保存待测。

1.5 激素测定方法

雌二醇（17β-E2）、孕酮（P4）两种激素测定试剂盒购自北京北方生物技术研究所，测定方法分别为放射性免疫法和化学发光法。

1.6 统计分析

试验数据用SPSS20.0软件进行单因素方差分析，差异显著时用Tukey作多重比较。均以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 各组母羊血浆中17β-E2含量变化

A、B、C三组17β-E2平均值分别为77.81 pg/mL± 43.20 pg/mL、138.44 pg/mL±84.72 pg/mL、147.63 pg/mL ±104.76 pg/mL，呈现随着精料补饲量的增加而升高的趋势，且各组17β-E2含量间无显著差异（P＞0.05）；从图1可看出，在产羔后0～7 d中各组17β-E2的水平都有所降低，A组下降趋势明显，B组和C组在产羔后14 d出现第一个峰值，且C组高于B组，各组在产羔后28～42 d以后趋于平稳，84 d后B组和C组出现升高的波动趋势。

D、E、F三组17β-E2平均值分别为53.34 pg/mL± 18.72 pg/mL、44.45 pg/mL±14.81 pg/mL、42.12 pg/mL± 19.29 pg/mL，呈现随着精料补饲量的提高而降低的趋势。从图2可以看出，在产羔后0～7 d试验各组17β-E2均在下降，63 d断奶后各组的变化趋势明显。

图1 A、B、C组母羊血浆17β-E2浓度的变化趋势

图2 D、E、F组母羊血浆17β-E2浓度的变化趋势

从图3可以看出，在0.25 kg/d精料添加水平上，A组42 d断奶的17β-E2波动要早于D组63 d断奶，42 d断奶后17β-E2也出现上升的趋势，第一个峰值（133.3 pg/mL ±122.25 pg/mL）出现于断奶后12 d，63 d断奶后的第一个峰值（89.07 pg/mL±35.25 pg/mL）出现于断奶后14 d。

图3 A、D组母羊血浆17β-E2浓度变化趋势

从B和E组2个相同精料补饲量不同断奶日龄变化趋势对比可以看出（图4），在0.50 kg/d的精料补饲量情况下，B组42 d断奶后17β-E2出现明显的上升，第一个峰值出现在断奶后12 d（132.34 pg/mL±65.56 pg/mL）；B组和E组都在产羔后84 d上升。

从C组和F组2个相同精料补饲量不同断奶日龄的变化趋势对比可以看出（图5），在1.00 kg/d精料补饲量情况下，C组42 d断奶后17β-E2也呈现短暂上升之后下降的趋势，也在产羔后84d开始增加；F组63d断奶，在整个过程中17β-E2一直处于平稳水平，波动不明显。

2.2 各组母羊血浆中P4含量变化

A、B、C三组在42 d断奶情况下的P4平均值分别为0.48 ng/mL±0.25 ng/mL、0.29 ng/mL±0.11 ng/mL、0.45 ng/mL ±0.28 ng/mL。从图6可知，在产羔后28 d中各组P4浓度很低，28 d后出现上升趋势，42 d断奶时A组与C组上升明显，且均高于B组（P＜0.05），之后有所降低，产羔后77 d时A组和C组分别出现高峰（1.35ng/mL±0.49ng/mL、1.74ng/mL±0.84 ng/mL），之后迅速降低，而B组在产羔后84 d才出现高峰，之后也出现降低。

D、E、F三组在63 d断奶情况下，P4的平均值分别为0.49 ng/mL±0.27 ng/mL、0.28 ng/mL±0.22 ng/mL、0.33 ng/mL ±0.21 ng/mL。从图7可知，在产羔后21 d中各组P4处于较低水平，21d后D组、F组出现波动，E组在21d后开始缓慢上升，在63 d达到峰值。

图4 B、E组母羊血浆17β-E2浓度变化趋势

图5 C、F组母羊血浆17β-E2浓度变化趋势

图6 A、B、C组母羊血浆P4浓度变化趋势

图7 D、E、F组母羊血浆P4浓度变化趋势

从A、D组相同精料补饲量不同断奶日龄的变化趋势对比可以看出（图8），A、D组在产羔后21 d P4都处于较低水平，28 d后出现上升趋势。A组在断奶当天下降，之后缓慢上升，在产羔后77 d达到峰值后出现降低。D组在产后70～77 d范围内出现峰值，之后迅速下降。

从B、E组相同精料补饲量不同断奶日龄的变化趋势对比可以看出（图9），在0.50 kg/d精料补饲的情况下，42 d和63 d断奶P4的水平在产后56 d以前都处于较低水平。42 d断奶组在42 d断奶后P4有缓慢的上升趋势，63 d断奶组在断奶14 d后也出现类似的升高，两组断奶日龄在产后84 d都出现波峰，且42 d断奶组明显高于64 d断奶组。

从C、F组相同精料补饲量不同断奶日龄的变化趋势对比可以看出（图10），P4在1.00 kg/d精料补饲的条件下，42 d断奶C组与63 d断奶F组在产羔后28 d内均处于较低水平，之后有上升趋势，C组断奶后出现两次波峰，F组则没有出现此变化。

图8 A、D组母羊血浆P4浓度变化趋势

图9 B、E组母羊血浆P4浓度变化趋势

图10 C、F组母羊血浆P4浓度变化趋势

2.3 各试验组17β-E2与P4变化趋势对比

通过图11（A～F）可知，A组在产羔后42～56 d内17β-E2表现上升趋势，而P4表现下降趋势；B组产羔后49～70 d 17β-E2呈现升高趋势，而P4有所下降；C组在产羔后63～70 d 17β-E2有上升趋势，P4处于下降趋势；D组63 d断奶后17β-E2与P4表现相同的升高与降低趋势；E组在产羔后84～91 d出现17 β-E2上升、P4下降趋势；F组在产羔后63 d断奶，各段时间17β-E2与P4都出现相同的变化趋势。从对比可知，在断奶日龄相同的情况下，随着精料补饲量的增加，出现17β-E2与P4发情变化的趋势时间越来越晚，在42 d断奶情况下，0.50 kg/d的精料补饲水平出现发情趋势的时间较1.00 kg/d的要早；在63 d断奶情况下，0.50 kg/d的精料补饲也比1.00 kg/d的早。从而得出0.50 kg/d的精料补饲水平有利于断奶后的早期发情，同样在精料补饲相同的情况下，42 d断奶比63 d断奶更有利于产后发情。

图11 17β-E2与P4浓度变化趋势对比图

3 讨论

3.1 断奶时间对母羊17β-E2与P4的影响

母羊在孕激素与雌激素协同作用下，通过协同与拮抗途径调节发情等生殖活动［9］。E2对启动雌性哺乳动物的发情有重要作用，是雌性哺乳动物发情的基础。少量孕酮与雌激素间有协同作用，可促进发情行为的表现。大量孕酮对下丘脑或垂体前叶有负反馈作用，抑制FSH和LH的释放而抑制发情［10］。在发情间期，母羊血清中E2处于较低水平，在发情间期缓慢上升，进入发情期后突然升高，达到最高水平后迅速下降，母羊表现出发情症状。母羊分娩后处于泌乳性生理乏情的情况下，卵巢活动处于静止状态，卵泡即不发育，黄体生成也不表现周期性发情现象。泌乳期由于促乳素对促性腺激素的分泌有抑制作用，卵巢周期性活动受到抑制，卵泡不能发育，虽然在血液中能检测到雌激素与孕酮，但卵巢无活动，只有当断奶后才会很快发情，绵羊泌乳期乏情持续5～7周，在断奶后20 d左右发情［11］。母羊断奶后，机体主要将营养转运使机体恢复体况，而无需将获取的营养素转换为乳汁，所以断奶后比不断奶的增重更明显。

本试验17β-E2与P4的水平与其他研究得出的结论相近［1］，试验中两组断奶日龄母羊血清中的17β-E2均为42d断奶组高于63d断奶组，表明提早断奶能够提高母羊机体17β-E2水平。从趋势图可以看出，P4整体呈现上升趋势。在断奶对产后母羊体内雌二醇与孕酮变化的研究中，喻世刚等［12］通过对巴音布鲁克母羊产后40d和60d断奶与正常断奶的对比研究表明，早期断奶组母羊17β-E2浓度高于正常断奶组，说明早期断奶有利于生殖机能恢复和生殖功能重建。

3.2 营养对泌乳期母羊17β-E2与P4的影响

营养因素对于泌乳期母羊体内雌激素与孕激素的影响主要是指日粮中的蛋白质、能量、微量元素等因素的影响，日粮中能量不足能够延长母羊乏情期，使产羔间隔延长，降低母羊利用率，同时过高的能量水平增加了机体对雌激素与孕酮的清除几率，使母体对胚胎的识别降低，不利于机体的发情和受孕。有研究表明，泌乳期提高日粮中蛋白质水平可以提高机体尤其是乳汁中雌激素含量［13-14］。绵羊的发情表现呈季节性，同时受营养状况、妊娠、分娩、泌乳、光照与品种等因素影响。正常发情是母羊正常繁殖的关键，绵羊机体内的生殖激素是控制母羊周期性发情及表现的物质［15］。

本试验表明，17β-E2和P4数值与李爱华等［1］在舍饲滩羊母羊生殖激素变化规律研究中的泌乳期所测得值基本一致，在变化规律上17β-E2在试验各组分娩后0～7d都有下降趋势，之后维持在较低的水平波动，A、B、C三组在42 d断奶后第1次出现17β-E2峰值的时间大致相同，都在产羔后56～70 d之间，之后出现下降趋势，第2次出现峰值的时间大致在84 d之后。在P4的变化趋势上，A、B、C三组在42 d断奶后下降趋势均集中在产后49～63 d，之后缓慢上升，出现高峰大致在70～84 d；D、E、F三组P4在63 d断奶后下降趋势集中在70～77 d，之后有上升，出现高峰大致在产后84 d，晚于42 d断奶各组。从P4变化曲线可以看出，产后母羊在28 d后均有卵巢活动，最早出现在产后21 d，最晚出现在产后35 d，产后羊P4浓度变化个体差异较大，变化不太规则，说明产后泌乳母羊卵巢均恢复活动。

4 小结

在本试验条件下，依据17β-E2与P4变化规律可以得出，在42 d断奶、0.50 kg/d的精料补饲下，有利于产后舍饲母羊繁殖机能的恢复，实现一年两产或两年三产的频繁产羔技术体系。

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［8］ 马友记.绵羊高效繁殖理论与实践［M］.兰州：甘肃科学技术出版社，2013.

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［15］Mann G E，Wathes D C，Robinson R S.The progesterone receptor antagonist，onapristone has differential effects on the timing and control of the luteolytic mechanism depending on timing of administration in sheep［J］.Mol Cell Endocrinal，2013，376（1-2）：1-11.

Effects of Weaning Ages and Concentrate Supplements on the Changes of 17β-E2and Progesterone in Postpartum Ewes

Xu Kaiyun1，Ma Youji2，3
（1.Wuwei AcademyofAnimal Husbandryand VeterinaryScience，Wuwei 733000，Gansu，China；2.College ofAnimal Science and Technology，Gansu Agricultural University，Lanzhou 730070，China；3.Sheep BreedingBiotechnologyEngineeringLaboratory，Minqin 737200，Gansu，China）

Thirty-six postpartum ewes were selected and divided into six groups to study the effects of weaning ages（42 d and 63 d）and concentrate supplements（0.25 kg/d，0.50 kg/d，1.00 kg/d）on the changes of 17β-E2and progesterone in postpartum ewes.The concentration of estradiol（17β-E2）and progesterone（P4）from 0 d to 91 d were determined by chemical luminescence method and radioimmunoassay respectively.The results showed that the concentration of 17β-E2in ewes was 175.22 pg/mL± 22.64 pg/mL on the 0th day after parturition，then downward，and upward after weaning；The concentration of P4in ewes，was 0.13 ng/mL±0.02 ng/mL on the 0th day after parturition and then kept on a low level，rose a little after weaning，then downward. The concentration peak of 17β-E2in the ewes weaning on 42 d appeared earlier than that on 63 d.The concentration peak of 17β-E2in the ewes on the 0.50 kg/d supplementing level appeared earlier than those in other two groups.So it was concluded that the mode of weaning on 42 d and supplementing on the 0.50 kg/d level would be more productive in high frequence lambing system.Meanwhile，the results would provide a the-oretical basis for understanding the mechanism of endocrine recovery and estrus mechanism.

weaning age；concentrate supplement；ewe；estrogen；progesterone

S826.3

A

2095-3887（2016）03-0024-07

10.3969/j.issn.2095-3887.2016.03.007

2016-03-29

甘肃省高校基本科研业务费（2014）；甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目（GNSW-2012-19）；国家肉羊产业技术体系（CARS-39）

许开云（1963-），男，高级兽医师，主要从事动物饲养与疫病防治工作。

马友记（1976-），男，教授，主要从事绵山羊生产教学科研工作。