细胞信号转导通路MEK在宫颈癌前病变和宫颈癌的表达及意义

符敏，瞿全新

细胞信号转导通路MEK在宫颈癌前病变和宫颈癌的表达及意义

符敏，瞿全新

目的：探讨宫颈癌前病变及宫颈癌组织中丝裂原激活细胞外信号调节激酶（mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase，MEK）细胞信号转导通路表达的意义。方法：选择并收集2013年1月—2014年4月在天津市第一中心医院妇科诊治、临床病理资料完整的宫颈病变患者共92例，根据宫颈病变程度将患者分为正常组（30例）、高级别宫颈上皮内瘤样变（CIN）组（30例）和宫颈癌组（32例）。用免疫组织化学SP法检测MEK在不同组织中的表达。结果：MEK在正常组、高级别CIN组和宫颈癌组中阳性表达率分别为20.0%、56.7%和68.8%，其中宫颈癌组MEK阳性表达率最高，分别高于高级别CIN组及正常组，差异有统计学意义（P＜0.05）。高级别CIN组MEK的阳性表达率高于正常组（P=0.003）。MEK阳性表达率与患者年龄、宫颈癌病理类型、肿瘤组织分化程度、肿瘤大小及宫颈癌临床分期等因素无关（P＞0.05）。结论：MEK转导通路可能在宫颈癌及癌前病变的发生发展中有一定的作用。

宫颈肿瘤；癌前状态；丝裂原激活蛋白激酶激酶类；信号传导

（J Int Obstet Gynecol，2016，43:340-342）

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，全世界范围内大约每年有新发宫颈癌病例50万例，中国每年约新增病例13.15万例［1-2］，且发病年龄有年轻化趋势［3］。因此，寻找宫颈癌前病变及宫颈癌发生、发展的相关因素并对其进行干预、控制，对于宫颈癌的治疗和预防有着重要意义。众所周知，宫颈癌的病因是人乳头瘤病毒（HPV）持续感染，从HPV感染到发展为宫颈癌是一个漫长的过程，这为研究者提供了有利的阻断时机［4］。已有研究证明，MEK在乳腺癌、结肠癌等中有促进肿瘤细胞增殖的作用［5-6］。然而，关于MEK在宫颈癌及癌前病变组织中的表达及其临床意义研究很少，本研究采用免疫组化SP法，分别对正常宫颈、高级别宫颈病变（包括原位癌）及宫颈癌组织中MEK的表达量进行检测，探讨MEK在宫颈癌前病变及宫颈癌中的表达及其临床意义，为宫颈癌的治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2013年1月—2014年4月在天津市第一中心医院妇科诊治、临床病理资料完整的宫颈病变患者共92例，根据宫颈病变程度，将患者分为正常组（A组，30例）、高级别宫颈上皮内瘤样变（CIN）组（B组，30例）和宫颈癌组（C组，32例）3组。A组中有CINⅠ8例，同时收集因良性病变行子宫切除的正常宫颈组织22例。B组中有CINⅡ～Ⅲ24例、原位癌6例。C组中，宫颈癌32例，包括鳞癌27例，腺癌5例。所有患者在采集标本前未行放、化疗。3组患者年龄分别为（45.73±7.56）岁、（43.97±11.56）岁和（48.56±11.98）岁，差异无统计学意义（F=1.491，P=0.231）。

1.2 方法采用免疫组化SP法，将因良性病变行子宫切除术的正常宫颈组织标本作为阴性对照，3，3-二氨基联苯胺（DAB）显色后苏木素复染，中性树胶封片。用磷酸盐缓冲溶液（PBS）代替一抗（兔抗人MEK多克隆抗体：北京中杉金桥公司，工作液浓度1∶100）作阴性对照，用已知阳性组织切片作阳性对照［7］。

1.3 观察指标在100倍光学显微镜下随机抽取8个视野，每个视野观察100个细胞，计数阳性细胞，取平均值。将阳性细胞按其染色数量比例和显色强度分为4级：阳性细胞数为0计0分；1%～25%计1分；26%～50%计2分；51%～75%计3分；76%以上计4分；染色强度按无着色计0分、浅黄色计1分、棕黄色计2分、棕褐色计3分；两项计分相加，计为总分，0～3分为阴性，4～7分为阳性。所有标本由经验丰富的高年资病理医师诊断证实。

1.4 统计学方法采用SPSS 20.0软件进行统计分析。定性资料用率表示，采用χ2检验或Fisher精确概率法。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.13 组患者MEK的表达A、B、C组MEK表达阳性率分别为20.0%（6/30）、56.7%（17/30）和68.8% （22/32），差异有统计学意义（χ2=8.058，P=0.017），其中C组MEK阳性表达率最高，高于B组和A组，差异有统计学意义（χ2分别为4.444和15.017，P＜0.05），B组MEK阳性表达率高于A组（χ2=8.531，P=0.003）。MEK在宫颈组织细胞质中表达，见图1。

2.2 MEK与宫颈癌临床病理特征的关系在32例宫颈癌患者中，MEK阳性表达率与患者年龄、病理类型、肿瘤组织分化程度、肿瘤大小及临床分期无关（均P＞0.05），见表1。

表1 宫颈癌患者临床特征与MEK表达的关系

3 讨论

MEK是丝裂原活化蛋白激酶家族的重要一员，可被多种炎性因子、生长因子和环境应激反应等激活，导致细胞的增殖［8-9］。MEK分为分子质量44 ku和45 ku的MEK1和MEK2两种类型，在肿瘤细胞生物学中，MEK是丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路中特性了解最为透彻的激酶之一［10］。本研究发现由正常宫颈组织到宫颈癌组织的变化过程中，MEK表达呈递增趋势，宫颈癌组中表达率最高，这说明MEK参与了宫颈肿瘤的发展。原因可能是宫颈癌的发生多数伴有Ras基因突变，然后通过Ras-Raf-MEK-细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）信号转导通路激活MEK，MEK使其下游底物ERK磷酸化而具有活性，将信号传导至细胞核内使细胞的增殖增强，从而促使宫颈细胞进一步向宫颈癌细胞发展。

有研究表明，在年龄≥50岁、临床分期较早、病理分级高分化和肿瘤直径＜5 cm的肝癌患者中MEK-1的表达强于年龄＜50岁、分期较晚、低分化、肿瘤直径≥5 cm者［11］。但本研究对宫颈癌患者的结果表明，MEK阳性表达与患者年龄、宫颈癌病理类型、肿瘤组织分化程度、原发肿瘤大小及宫颈癌临床分期等因素无关，这一结果可能与本研究病例数较少有关，需增加样本量进一步研究。

图1 MEK在不同宫颈组织中表达（SP法×100）

综上，MEK可能参与了宫颈癌的发生、发展，通过抑制MEK的活性使Ras-Raf-MEK-ERK信号转导通路受到阻断，抑制MEK的磷酸化［12-13］，从而可以抑制肿瘤细胞的发展。目前已有多种MEK抑制剂投入临床试验，如有突破将为宫颈癌的治疗提供新的思路，为宫颈癌患者带来希望。

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The Expression and Its Significance of Cell Signal Transduction Pathways MEK in Cervical Precancerous Lesions and Cervical Cancer

FU Min，QU Quan-xin.Department of Obstetrics and Gynecology，Tianjin Occupational Diseases Precaution and Therapeutic Hospital，Tianjin 300011，China（FU Min）；Department of Obstetrics and Gynecology，Tianjin First Center Hospital，Tianjin 300192，China（QU Quan-xin）

FU Min，E-mail:yzxfck@163.com

Objective:To explore the expressssion of mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase（MEK）signaling pathways in cervical precancerous lesions and cervical cancer.Methods:A total of 92 patients with cervical lesions were collected between January 2013 and April 2014 in the department of gynecology of Tianjin First Central Hospital. According to the degree of cervical lesions，the patients were divided into three groups:normal group（30 cases），high level cervical intraepithelial neoplasia（CIN）group（30 cases），cervical cancer group（32 cases）.Using immunohistochemical SP method to detect the MEK expression in different tissues.Results:In normal group，high level CIN group and cervical cancer group，the positive rates of MEK were 20.0%，56.7%，68.8%respectively.MEK positive expression rate is highest in the cervical cancer group，higher than that of the high level CIN group and normal group（P＜0.05）.The difference between the normal group and the high level CIN group was the statistical significant（P=0.003）.MEK positive expression rate had no correlated with patients′age，cervical cancer pathological type，degree of tumor differentiation，tumor size and clinical stage（P＞0.05）. Conclusions:MEK pathway may play a certain role in cervical cancer and precancerous lesion development.

Uterine cervical neoplasms；Precancerous conditions；Mitogen-activated protein kinases；Signal transduction

2015-12-23）

［本文编辑 秦娟］

300011天津市职业病防治院妇产科（符敏）；天津市第一中心医院妇产科（瞿全新）

符敏，E-mail：yzxfck@163.com