肝细胞肝癌超声造影峰值强度与血管生成相关性分析*

河北省唐山市人民医院彩超室(唐山 063000)

王海霞 刘景萍 梁永平 胡 健 赵西凤



肝细胞肝癌超声造影峰值强度与血管生成相关性分析*

河北省唐山市人民医院彩超室(唐山 063000)

王海霞 刘景萍 梁永平 胡 健 赵西凤

目的：探讨肝细胞肝癌(HCC)超声造影峰值强度与血管生成的相关性。方法：选择HCC患者100例，运用免疫组化法(SP)测定其病灶组织与癌旁组织的微血管密度(MVD)，并采用超声造影检查超声造影峰值强度(PI)，研究两者之间的关系。结果：100例HCC 106个病灶超声造影特征为“快进快退”，进一步分析 TIC 是上升支陡直，达峰值比较迅速，病灶峰值强度比癌旁组织的峰值强度更强。病灶组织PI平均值为45.73±9.52 dB,明显高于癌旁组织PI平均值18.91±7.16 dB(P<0.05)；病灶组织MVD 平均值为51.56±11.74，明显高于癌旁组织MVD 平均值19.85±8.32 (P<0.05)。免疫组化染色结果显示,HCC 病灶里面存在丰富的微血管,但是在癌旁组织里面则发现的微血管比较少。病灶组织及癌旁组织PI与MVD计数呈现正相关的关系(r=0.791,P<0.05)。结论：HCC超声造影峰值强度与血管生成呈正相关,可通过超声造影峰值强度评估患者微血管密度，也可为HCC临床诊断及预后预测提供有价值的参考。

肝细胞肝癌(HCC)属于人类常见的一种恶性肿瘤，预后较差，病死率比较高。研究证实[1-2],血管生成可促进HCC的发生、侵袭、生长与转移等,而微血管密度(MVD)则常常用来反应肝癌患者体内新生成的血管情况,通过MVD也可以有效判断出癌症患者的预后。常规彩超是临床上首选的微血管诊断手段,然而因为微血管存在显示困难等因素,致使HCC早期难以正确诊断出来[3]。超声造影(CEUS)技术则是近年来随着超声技术的日益发展而新兴起来的一种动态监测癌组织的血流灌注过程，可较好地反映出癌组织的血供特征，有益于癌症定性及定量的诊断[4]。本文旨在分析HCC超声造影峰值强度与血管生成的相关性，以期为HCC的临床诊断开辟新的方法及途径。

资料与方法

1 一般资料 选择2014 年3 月至2016年3 月我院收治的HCC患者100例(106个病灶)，其中男58例，女42例；年龄36～74岁，平均年龄55.3±1.6岁；结节直径3～5 cm，平均直径3.6±1.2 cm。

2 仪器和试剂 超声诊断仪为GE LOGIQ E9,由美国生产,超声探头型号为C1-5型,并配套有CPS超声造影成像软件与ACQ超声造影定量分析软件。造影剂为六氟化硫微泡(声诺维)则为上海博莱科信谊药业有限责任公司提供。羊抗鼠试剂盒为上海佳和生物科技有限公司提供，鼠抗人CD34单克隆抗体为上海佳和生物科技有限公司提供。

3 方 法 ①超声造影：运用二维和彩超全面扫查患者肝脏与其病灶部位，详细记录患者病灶大小、病灶位置、病灶边界及内部血供情况等。开启CPS超声造影系统，注入适量的造影剂，调节机械操作指数，动态监测患者的病灶区域、癌旁肝组织超声回声强度、血流灌注过程，然后将超声造影数据给予记录并存盘。超声造影完成之后，通过ACQ分析软件对超声图像定性及定量分析。选择好动脉期的感兴趣区域，对患者强化最为明显之病灶部位与其癌旁组织进行造影时间-强度曲线(TIC)的绘制，这样就可以得出病灶部位、癌旁组织之造影峰值强度(PI)。②免疫组化检查：选择106个病灶经超声造影检查而显示出动态增强区域(ROI)的组织标本，使用苏木素-伊红实施染色操作,SP法CD34染色,观察肝癌病灶及癌旁组织微血管染色,并测定MVD值。设置阳性与阴性对照,以抑制阳性HCC组织作为阳性对照,以PBS代替一抗,当作阴性对照。在光镜下(×200)下察看并且选择微血管,在染色最为清楚的区域中选择5个背景对照比较佳的视野较小的微血管计数,取其平均值进行计数,以此当作MVD。

4 统计学方法 使用SPSS 21.0对各项资料进行统计分析，PI与MVD之间关系采用直线相关性分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 病灶与癌旁组织超声造影特征比较 见图 1、2。100例HCC 106个病灶超声造影特征为“快进快退”，进一步分析 TIC 是上升支陡直，达峰值比较迅速，病灶峰值强度比癌旁组织的峰值强度更强。

图1 超声造影显示肝S3段肿块动脉期呈高增强

图2 TIC显示癌肿峰值强度强于癌旁组织

2 免疫组化染色结果比较 病灶组织PI平均值为45.73±9.52 dB,明显高于癌旁组织PI平均值18.91±7.16 dB (P<0.05)；病灶组织MVD 平均值为51.56±11.74，明显高于癌旁组织MVD 平均值19.85±8.32 (P<0.05)。免疫组化染色结果显示，HCC 病灶里面存在丰富的微血管(见图3)，但是在癌旁组织里面则发现的微血管比较少(见图4)。

图3 病灶组织的微血管染色(CD34×200)

图4 癌旁组织的微血管染色(CD34×200)

3 PI和MVD之间的关系 见图5。病灶组织及癌旁组织PI与MVD计数呈现正相关关系(r=0.791，P<0.05)。

图5 PI与MVD的关系

讨 论

肿瘤生长“血管依赖说”是近年来肿瘤界关注的一个话题，此学说认为，新生血管对于肿瘤在人体中的生长与发展过程中的作用很重要，可用于肝细胞肝癌预后判断[5-6]。研究表明[7-8]，新生血管可以为癌症细胞生长给予充足的氧气及其他营养物质，也可以加快肿瘤发生转移。而MVD则可以比较客观地反映出病灶组织之新生血管情况，通过MVD计数则可以判断出癌症患者的临床预后。常规检查MVD方法是通过组织学标本进行测定，此项方法操作复杂，会给人体带来一定的创伤，很难在术前进行准确的判断，导致组织学MVD计算难以在临床中得到广泛的应用[9]。鉴于此，有必要探究出一种具有无创性、操作简单，可以反复在活体进行操作测定MVD的方法。

超声造影属于近年来新兴起来的一种影像诊断方法，它是在超声造影剂的辅助下，通过低机械指数对病灶部位进行动态监测，并根据成像特征进行观察血液灌流分布，对肿瘤组织作定性及定量诊断。与常规的超声技术比较，超声造影由于得到超声造影剂的辅助，进而可以更敏感地观察到病灶组织，提升临床诊断的准确性，也可以更好地将人体血流分布及灌注情况显示出来[10]。

本研究显示，100例HCC 106个病灶超声造影特征为“快进快退”，进一步分析 TIC 是上升支陡直，达峰值比较迅速，病灶峰值强度比癌旁组织的峰值强度更强。病灶组织PI平均值为45.73±9.52 dB ，明显高于癌旁组织PI平均值18.91±7.16 dB(P<0.05)；病灶组织MVD 平均值为51.56±11.74,明显高于癌旁组织MVD 平均值19.85±8.32(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,HCC 病灶里面存在丰富的微血管,但是在癌旁组织里面则发现的微血管比较少。病灶组织及癌旁组织PI与MVD计数呈现正相关的关系(r=0.791,P<0.05)。研究提示,肝细胞肝癌的病灶组织中的超声造影峰值强度PI较对应的癌旁组织PI更强,PI跟MVD计数呈正相关,PI值愈大则MVD水平越高；通过病灶组织的PI测定能够推测出肝细胞肝癌MVD的水平，从而可判断出肝癌病灶组织中的新生血管生长情况。也说明肿瘤组织的血流灌注较癌旁组织更高。

综上所述，HCC超声造影峰值强度与血管生成呈正相关,可通过超声造影峰值强度评估患者微血管密度,进而评价血管生成情况,可为HCC临床诊断及预后预测提供理论参考。

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[8] 王晓东,赵 萍.二维与三维超声造影在原发性肝癌射频治疗中的应用比较[J].中山大学学报：医学科学版,2014,35(4)：602-606.

[9] 郭长义,杨 林，刘 健.超声造影在原发性肝癌介入治疗中的应用价值[J].川北医学院学报,2012，27(1)： 77.

[10] 陈 琼.超声造影诊断原发性肝癌的现状及新进展[J].临床肿瘤学杂志,2013,18(9)：857-860.

(收稿：2016-04-27)

*河北省医学科学研究重点课题计划(20150974)

癌,肝细胞 超声检查 微血管 @超声造影时间-强度曲线

R735.7

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10.3969/j.issn.1000-7377.2016.10.014