3种方法检测丙型肝炎患者的早期诊断价值

王春玮

(青海省红十字医院检验科，西宁 810000)



·临床研究·

3种方法检测丙型肝炎患者的早期诊断价值

王春玮

(青海省红十字医院检验科，西宁 810000)

目的探讨采用丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、HCV-RNA 3种方法联合检测丙型肝炎患者的早期诊断价值。方法收集该院西宁地区203例HCV-Ab阳性患者及5例HCV-Ab阴性HCV-cAg阳性的患者，使用荧光定量PCR法进行HCV-RNA检测，化学发光法检测HCV-Ab，ELISA法检测HCV-cAg。结果203例HCV-Ab阳性患者中HCV-cAg阳性例数为67例、HCV-RNA>1×103U/L 143例；72例HCV-Ag阳性患者中HCV-RNA阳性例数69例，符合率达95.83%，其中5例HCV-Ab阴性HCV-cAg阳性患者中，HCV-RNA阳性3例，符合率达60.00%。结论HCV-cAg、HCV-Ab和 HCV-RNA 3种方法联合检测可用于丙型肝炎患者的早期诊断，同时可有效缩短HCV窗口期，降低HCV感染的漏检率。

丙型肝炎病毒抗体；丙型肝炎病毒核心抗原；HCV-RNA

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)经血液传播引起的传染性疾病，是临床常见的慢性进行性肝病之一[1]。HCV感染的最大特征是慢性化，感染后约10%～15%的患者会发展为肝硬化，2009年报告的发病例数是2001年的10.56倍[2-3]。目前临床以丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)检测为主，但HCV-Ab阳性并不能说明患者携带的HCV是否具有传染性，且HCV感染至HCV-Ab产生有较长的窗口期，单独HCV-Ab检测容易漏检。现对西宁地区HCV-Ab阳性患者同时进行HCV核心抗原(HCV-cAg)、HCV-RNA不同方法的检测进行相关性分析。

1　资料与方法

1.1一般资料选择2014年1月至2015年4月203例该院检验科检测的西宁地区HCV-Ab阳性的203例患者及HCV-Ab阴性HCV-cAg阳性的5例患者，共208例，平均年龄(47.13±14.88)岁，男81例，平均年龄(49.89±16.01)岁；女127例，平均年龄(45.17±13.78)岁。排除甲、乙、丁、戊型肝炎病毒混合感染，同时排除其他疾病引起的肝脏损坏。

1.2标本采集与保存清晨空腹抽取静脉血5 mL，立即分离血清(所有标本无黄疸、无溶血)，分为3份：1份即检HCV-Ab；1份即检HCV-cAg；1份置EP管中，-80 ℃冰箱保存，进行HCV-RNA检测。

1.3检测方法HCV-Ab检测采用化学发光法，使用上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂，质控品为北京康彻思坦生物技术有限公司提供的低值、中值质控品，仪器为CHEMCLIN全自动化学发光仪。HCV-cAg检测采用ELISA法，采用湖南康润有限公司提供的试剂及配套质控品，所选酶标仪为芬兰雷勃MK3酶标仪。HCV-RNA检测采用荧光定量PCR法，应用中山大学达安基因股份有限公司提供的试剂及配套的校准品和质控品。

1.4质量控制HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA检测均严格按照实验室SOP程序文件严格执行，HCV-Ab、HCV-RNA的性能验证符合实验室ISO15189要求。3个项目的室内质控均在受控范围之内，达到实验室质量水平要求。

2　结　　果

2.1HCV-Ab阳性患者HCV-Ag和HCV-RNA检测结果比较203例HCV-Ab阳性患者中HCV-cAg阳性例数67例，HCV-RNA检测值大于检测下限(检测下限为1×103U/L)的例数143例。见表1。

表1　　203例HCV-Ab阳性患者HCV-Ag和HCV-RNA检测结果比较

2.272例HCV-cAg阳性患者HCV-RNA检测结果比较HCV-Ab阳性患者有67例HCV-cAg阳性，5例HCV-Ab阴性但HCV-cAg阳性患者。72例HCV-cAg阳性患者检测HCV-RNA，检测值大于1×103U/L为69例，符合率达95.83%。5例HCV-Ab阴性HCV-cAg阳性的患者中，HCV-RNA检测值大于1×103U/L者3例。见表2。

表2　　72例HCV-cAg阳性患者HCV-RNA检测结果比较

2.3203例HCV-Ab阳性患者HCV-RNA检测结果比较203例HCV-Ab阳性患者有143例HCV-RNA检测值大于1×103U/L。见表3。

表3　　203例HCV-Ab阳性患者HCV-RNA检测结果比较

3　讨　　论

丙型肝炎隐蔽性很强，早期症状不明显，大多数患者最初并不知晓，耽误早期诊断、早期治疗的最佳时机[4]。患者5年以内的治愈率可达70%～90%，5～10年的治愈率为55%～75%，患病10年以上的治愈率将会明显降低。因此临床面临如何采用一个能早期筛查，并缩短窗口期的诊断方法，对初期感染患者做早期诊断及有效治疗。

目前临床常采用检测HCV-Ab的诊断判断是否HCV感染，但表2结果表明，208例患者HCV-Ab阴性而HCV-cAg阳性者5例，其中HCV-RNA检测值大于1×103U/L者3例，所以HCV-Ab阴性并不完全代表无感染。HCV感染后至HCV-Ab产生有6～12周甚至更长的时间，也就是常说的窗口期，且少数免疫功能低下或者异常者产生的抗体少甚至不产生抗体，所以仅通过检测HCV-Ab而作早期诊断容易造成漏检[5]。

HCV-cAg是HCV感染者的早期血清标志物，与HCV-RNA同时出现，HCV-cAg的检测可将HCV检测的窗口期缩短至15 d，明显降低HCV感染的漏检率[6]。有关研究报道，HCV-RNA和HCV-cAg之间具有较好的一致性[7-9]。本研究表2结果显示，67例HCV-Ab和HCV-cAg阳性患者HCV-RNA >1×103U/L者66例，符合率达98.50%；5例HCV-Ab阴性HCV-cAg阳性患者HCV-RNA >1×103U/L者3例，符合率为60.00%；72例HCV-cAg阳性患者与HCV-RNA的符合率达95.83%。HCV-RNA作为诊断HCV感染的金标准，可表明HCV的复制性，而HCV-RNA低于检测下限时并不代表无HCV感染。HCV-cAg与HCV-RNA联合检测可提高检出率，同时能更好地反映HCV病毒复制情况。表3数据显示，随HCV-RNA浓度降低，HCV-cAg阳性率也逐渐降低(P<0.05)，相关学者报道HCV-cAg检测可作为评判HCV复制的标志物[4-6]。但HCV-cAg不能取代HCV-RNA检测，表1结果提示，HCV-Ab阳性患者，HCV-cAg阳性率为33.00%，HCV-RNA阳性率为70.44%，HCV-RNA能够更敏感、更准确地反映病毒复制水平。

本研究结果表明，203例HCV-Ab阳性患者HCV-RNA>1×103U/L者143例，阳性率达70.44%，72例HCV-Ag阳性患者，HCV-RNA>1×103U/L者69例。可能由于荧光定量PCR方法检测HCV-RNA的影响因素较多，特别是HCV为RNA病毒，容易被RNA酶降解，从而出现假阴性；另外机体内HCV复制呈间断性，当病毒暂停复制时，HCV-RNA浓度较低，可使检测结果呈阴性，而HCV-Ab会持续存在一段时间[10-11]。所以，HCV-RNA<1×103U/L不能排除HCV感染及病毒复制。

表3数据显示，HCV-Ab和HCV-RNA检测结果比较，HCV-Ab高低与HCV-RNA高低有一定的相关性，HCV-Ab浓度越低，HCV-RNA也越低，甚至低于检测下限或阴性，HCV-RNA高低与HCV-Ab呈正相关关系(P<0.05)。因此HCV-Ab阳性并不表示不会再感染丙型肝炎，只是代表患者曾经感染或正在感染。HCV-Ab高低能间接反映感染情况，但不是绝对，还需检测HCV-RNA。HCV-RNA是1个敏感指标，可在感染2个星期内检测到HCV病毒。

综述所述，HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA 3种检测方法各有局限性，但HCV-cAg和HCV-RNA作为补充指标，与HCV-Ab联合检测，可有效缩短窗口期，降低漏检率，达到HCV患者早期诊断、早期治疗的临床目标。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.047

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1673-4130(2016)19-2765-03

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