新疆产4种锦鸡儿属植物总黄酮含量研究

贾盛杰， 贾月梅， 潘　兰， 杨海燕， 贾新岳， 石明辉， 力瓦衣丁·买合苏提, 贾晓光

(1新疆农业大学， 乌鲁木齐　830046； 2新疆维吾尔自治区中药民族药研究所， 乌鲁木齐　830002)



新疆产4种锦鸡儿属植物总黄酮含量研究

贾盛杰1， 贾月梅2， 潘兰2， 杨海燕1， 贾新岳2， 石明辉2， 力瓦衣丁·买合苏提2, 贾晓光2

(1新疆农业大学， 乌鲁木齐830046；2新疆维吾尔自治区中药民族药研究所， 乌鲁木齐830002)

目的对新疆产4种锦鸡儿植物的根及地上部分的总黄酮含量进行测定比较。方法用70%乙醇提取锦鸡儿样品中总黄酮，亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定样品溶液中总黄酮含量。结果对于不同锦鸡儿，其各部位总黄酮含量差异较大，根部总黄酮含量为吐鲁番锦鸡儿>狭叶锦鸡儿>粉刺锦鸡儿>刺叶锦鸡儿；地上部分总黄酮含量为刺叶锦鸡儿>狭叶锦鸡儿>吐鲁番锦鸡儿>粉刺锦鸡儿。对于同种植物，其根与地上部分总黄酮含量不同。结论对锦鸡儿不同部位进行总黄酮含量测定，有助于锦鸡儿属植物的充分开发及可持续利用。

锦鸡儿； 根； 地上部分； 总黄酮

锦鸡儿属(Caragana Fabr.)植物隶属于豆科，落叶灌木，全世界有100多种，主要分布于亚洲和欧洲的干旱和半干旱地区；中国有62种，主产于东北、华北、西北、西南各省区[1]。锦鸡儿属植物在藏药、蒙药、维药、中药等传统药中有着悠久的用药历史，《中国民族药志要》记载锦鸡儿属植物具有祛风除湿、活血、利尿、调经、消炎等功效，在治疗高血压、风湿性关节炎、跌打损伤、胆囊炎等疾病方面有显著效果[2]。目前已从锦鸡儿属植物中分离鉴定了黄酮类、二苯乙烯类、萜类等化合物[3-5]，黄酮类化合物是锦鸡儿属植物中的一类重要的化学成分。孙晓东等[6]研究了昌都锦鸡儿异黄酮类成分，体外活性试验显示其具有抑制大鼠巨噬细胞NO生成活性。康亚男等[7]研究表明小叶锦鸡儿总黄酮能降低血黏度，对大鼠脑缺血再灌注损伤具有脑保护作用。蒙秋霞等[8]对小叶锦鸡儿、南口锦鸡儿、树锦鸡儿、青海锦鸡儿、扁刺锦鸡儿、鬼箭锦鸡儿不同部位的总黄酮含量进行了测定。目前尚未见刺叶锦鸡儿、吐鲁番锦鸡儿、狭叶锦鸡儿总黄酮含量的报道，为此，本研究对4种锦鸡儿根部及其地上部分总黄酮含量进行了测定分析，现报道如下。

1　试药与仪器

1.1材料吐鲁番锦鸡儿采集于新疆乌恰县(经度E75°25′41.76″，纬度N40°05′19.05″)，粉刺锦鸡儿采集于新疆乌恰县(经度E75°23′12.24″，纬度N40°05′57.30″)，狭叶锦鸡儿采集于新疆奇台县半截沟(经度E89°44′15.73″，纬度N43°39′30.42″)，刺叶锦鸡儿采集于新疆乌鲁木齐市红雁池(经度E87°38′10.09″，纬度N43°41′12.57″)。样品经新疆维吾尔自治区中药民族药研究所贾晓光研究员鉴定，凭证标本保存在新疆维吾尔自治区中药民族药研究所。芦丁对照品(中国食品药品检定研究院，批号：100080-201408)，无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝均为分析纯。

1.2仪器电子天平(AE163，metterler)，旋转蒸发仪(RE-52AA，上海亚荣生化仪器厂)，超声波清洗器(KQ3200型，昆山市超声仪器有限公司)，电热恒温水浴锅(HHS，江苏省医疗器械厂)，循环水式多用真空泵(SHB-Ⅲ，郑州长城科工贸有限公司)，紫外可见分光光度计(UV-2600，岛津仪器有限公司)。

2　方法与结果

2.1对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品适量，置于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇定容至刻度，使其浓度为160 μg/mL对照品溶液。

2.2供试品溶液的制备称取4种锦鸡儿根、地上部分粗粉约10 g，分别置于圆底烧瓶中，加150 mL70%乙醇,水浴回流提取2 h，连续提取3次，合并滤液，减压浓缩，干燥，获得浸膏。将各部位浸膏用70%乙醇溶解，定容至50 mL，取1 mL置于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇定容至刻度，作为供试品溶液。

2.3测定波长的选择精密移取芦丁对照品溶液1 mL,加入1 mL5%亚硝酸钠溶液，经10%硝酸铝碱性条件下显色，以试剂为空白，测定络合物吸光度，500 nm处有最大吸收波长，故选用此波长进行测定。

2.4标准曲线的制备精密吸取0、0.5、1、2、3、4、5 mL芦丁对照品溶液，分别置于25 mL容量瓶，加70%乙醇至5 mL，先加5%亚硝酸钠1 mL，摇匀，放置6 min，再加入10%硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加10%NaOH试液10 mL，再加70%乙醇至刻度，摇匀，放置15 min，以试剂做空白参比液测500 nm处的吸光度。应用最小二乘法，以浓度X(μg/mL)与吸光度Y进行线性拟合，得以吸光度做线性回归Y=0.016X+0.012，r=0.999 5。结果表明芦丁标准品溶液在浓度为2.957～31.006 μg/mL范围内浓度与吸光度的线性关系良好(图1)。

图1　芦丁标准曲线

2.5稳定性考察取同一供试品溶液于0、20、40、60、80、100 min测定吸光度，结果表明供试品溶液在40 min内稳定。

2.6精密度考察精密移取供试品溶液1份，以不加样品溶液为空白，按“2.4”项下方法测定吸光度，平行测定 5 次，结果RSD=0.19%，说明精密度良好。

2.7重复性考察精密移取同一供试品溶液5份，每份2 mL，于500 nm处测吸光度，结果RSD=1.63%，说明重现性良好。

2.8加样回收率试验精密称取已知含量的供试品溶液1 mL，9份，分别加入3水平的芦丁对照品溶液，按“2.4”项下方法测定吸光度，结果回收率98.71%，RSD=0.66%。

2.9样品中总黄酮的测定取供试品溶液2 mL，按“2.4”项下方法显色，于500 nm处测吸光度。根据标准曲线，计算4种锦鸡儿不同部位的总黄酮含量，结果见表1。

表1　4种锦鸡儿不同部位总黄酮的含量

3　讨论

锦鸡儿属植物中含有丰富的黄酮类物质，同种锦鸡儿不同部位总黄酮含量不相同，刺叶锦鸡儿和粉刺锦鸡儿地上部分都比根部黄酮含量高，而吐鲁番锦鸡儿和狭叶锦鸡儿根部比地上部分总黄酮含量高。不同种锦鸡儿各部位总黄酮含量差异较大，根部总黄酮含量为吐鲁番锦鸡儿>狭叶锦鸡儿>粉刺锦鸡儿>刺叶锦鸡儿；地上部分部分总黄酮含量为刺叶锦鸡儿>狭叶锦鸡儿>吐鲁番锦鸡儿>粉刺锦鸡儿。其中，锦鸡儿属植物总黄酮含量差异可能与采集时期[9]、生长地气候条件、海拔等因素相关。

所测4种锦鸡儿中，吐鲁番锦鸡儿和狭叶锦鸡儿中的总黄酮含量较高，超过3%。黄酮类物质具有良好的抗氧化、抗癌、抗血管增生、消炎、抗变应性和抗病毒的功效。与方献[6-7]的研究结果一致。提示吐鲁番锦鸡儿和狭叶锦鸡儿黄酮成分的开发利用具有较好的前景，有待进一步开发利用。

锦鸡儿属植物大多分布于新疆自然条件恶劣的荒漠、半荒漠、干旱、半干旱地区，其根系发达，具有防风固沙的作用[10]，而锦鸡儿的传统用药部位是根部，过度采挖必然会对当地环境造成极大破坏。本实验结果发现，刺叶锦鸡儿、吐鲁番锦鸡儿和狭叶锦鸡儿地上部分中同样含有丰富的总黄酮，为锦鸡儿地上部分替代根部入药提供可能，也为地上部分部分总黄酮进一步研究提供实验依据。

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京:科学出版社,1993:1.

[2]贾敏如,李星炜.中国民族药志要[M].北京:中国医药科技出版社,2005:131-132.

[3]宋萍,杨赵立,包锦渊.鬼箭锦鸡儿化学成分的研究[J].华西药学杂志,2009,24(4):381-382.

[4]郝英魁.藏药鬼箭锦鸡儿化学成分的研究[D].天津:天津大学,2007:27-28.

[5]Shi J, Chen B, Sun ZH, et al. Studies on flavonoid constituents of Caragana intermedia[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2003, 38(8): 599-602.

[6]孙晓东,房士明,臧小单,等.昌都锦鸡儿异黄酮类成分及其抑制NO生成活性[J].中国中药杂志,2015, 40(16):3220-3223.

[7]康亚男,李媛媛,岳永花,等.小叶锦鸡儿总黄酮提取工艺研究及对脑缺血再灌注损伤大鼠的作用[J].药物评价研究,2013,36(1):22-25.

[8]蒙秋霞,牛宇,牛西午.锦鸡儿属几种植物总黄酮含量研究[J].华北农学报,2005,20(3):43-45.

[9]蒙秋霞,张丽珍,牛宇.不同生长时期小叶锦鸡儿黄酮类化合物含量的变化动态[J].草地学报,2011, 19(6):943-947.

[10]姚彦臣.我国锦鸡儿属灌丛草地类型的基本特点及其经济评价[J].中国草地,1992,14(2):55,60.

(本文编辑周芳)

Determination of total flavonoids content of four genus Caragana Fabr in Xinjiang

JIA Shengjie1, JIA Yuemei2, PAN Lan2, YANG Haiyan1, JIA Xinyue2, SHI Minghui2,Liwayiding Maihesuti2, JIA Xiaoguang2

(1XinjiangAgriculturalUniversity,Urumqi830046,China;2XinjiangInstituteofChineseMateriaMedicaandEthnodrug,Urumqi830002,China)

ObjectiveTo determine and compare the contents of total flavonoids from the root and acrial part of four genus Caragana Fabr in Xinjiang. MethodsTotal flavonoids of samples extracted by 70% ethanol were determined with colorimetry. ResultsFor different genus C. Fabr, the contents of total flavonoids were different in various parts of the samples. The roots of total flavonoids contents: C. turfanensis (Krassn.) Kom>C. stenophylla>C. pruinosa Kom>C. acanthophylla Kom. The acrial part of flavonoids contents: C. acanthophylla Kom>C. stenophylla>C. turfanensis (Krassn.) Kom>C. pruinosa Kom. For the same genus C. Fabr, the flavonoids contents of root and aboveground part were different. ConclusionThe determination of total flavonoids content in different parts of C.Fabr may prove to be useful for the development, protection and further study.

CaraganaFabr; root; acrial part; total flavonoids

国家自然科学基金-新疆联合基金(U1203202)； 新疆维吾尔自治区重点实验室开放课题(XJDX0201-2013-02); 新疆维吾尔自治区科研机构创新发展专项资金(2014004)

贾盛杰(1983-)，男，在读硕士，研究方向：食品、药品研究。

贾晓光，男，研究员，硕士生导师，研究方向：中药民族药，E-mail:xgjia@vip.sina.com。

R28

A

1009-5551(2016)10-1230-03

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.10.004

2016-04-28]